Guía de reconstitución
La reconstitución es el proceso en el que un péptido liofilizado (secado por congelación) se mezcla con agua bacteriostática para obtener una forma líquida lista para el trabajo de laboratorio. Es una parte inseparable de la preparación de péptidos de investigación y requiere un entorno estéril, una técnica correcta y un cálculo preciso del volumen de disolvente para la concentración prevista.
5 pasos de la reconstitución
El procedimiento se resume en cinco pasos; para la guía completa con la explicación de cada fase, consulta el artículo detallado.
- 1 Preparación del espacio de trabajo estéril. Limpia la superficie de trabajo con alcohol isopropílico al 70 %. Material: vial liofilizado, agua bacteriostática, jeringa estéril con aguja y toallita con alcohol isopropílico.
- 2 Desinfección de los tapones. Limpia los tapones de goma de ambos viales (péptido + agua bacteriostática) con la toallita y deja secar 10 segundos; el alcohol todavía húmedo entraría dentro empujado por la aguja.
- 3 Extracción del agua bacteriostática. Con una jeringa estéril, extrae el volumen calculado de agua bacteriostática. Sin burbujas de aire.
- 4 Adición al vial del péptido. Introduce la aguja en un ángulo oblicuo de ~45° y deja que el líquido resbale por la pared interna del vial, no directamente sobre el pellet del péptido. Así se evitan la espuma y la desnaturalización.
- 5 Disolución. Haz rodar el vial suavemente entre los dedos (no lo agites). El liofilizado se disuelve en 30–60 segundos. Tras la disolución, consérvalo en el frigorífico a 2–8 °C.
Errores más frecuentes
- Agitar en lugar de hacer rodar. La agitación mecánica puede desnaturalizar la estructura del péptido.
- Añadir el agua bacteriostática demasiado rápido. Si el líquido cae directamente sobre el pellet, se forma espuma y una parte del péptido se degrada.
- Usar agua estéril (NaCl al 0,9 %) en lugar de agua bacteriostática. El agua estéril no tiene efecto conservante: en ella el péptido dura solo 24 horas, frente a aproximadamente 28 días en agua bacteriostática.
- Guardar en el congelador después de la reconstitución. Los ciclos repetidos de congelación y descongelación degradan el péptido. Tras la reconstitución, su sitio es el frigorífico a 2–8 °C.
- Conservar un vial liofilizado sellado a temperatura ambiente. También el liofilizado pierde estabilidad: su sitio es el frigorífico a 2–8 °C (corto plazo) o el congelador a −20 °C (conservación prolongada).
Conservación
| Estado | Temperatura óptima | Duración de la estabilidad |
|---|---|---|
| Liofilizado (vial sellado) | −20 °C a largo plazo / 2–8 °C a corto plazo | 24–36 meses a −20 °C |
| Tras la reconstitución con agua bacteriostática | 2–8 °C, protegido de la luz | ~28 días (según el péptido) |
| Tras la reconstitución con agua estéril (sin conservante) | 2–8 °C | 24 horas |
Nota: la duración real de la estabilidad varía según el péptido. Consulta siempre la documentación técnica del lote concreto.
Volumen de agua bacteriostática
Para la concentración que quieres preparar se aplica una relación sencilla:
volumen de agua bacteriostática (ml) = cantidad de péptido (mg) ÷ concentración deseada (mg/ml) Ejemplo: 5 mg de péptido disueltos en 2 ml de agua bacteriostática dan una concentración de 2,5 mg/ml.
Para un cálculo rápido y sin errores usa la calculadora de péptidos, una herramienta interactiva que calcula el volumen de disolvente y la cantidad por dosis según tu protocolo experimental.
Sigue leyendo
- Calculadora de péptidos Cálculo interactivo del volumen de disolvente y de la concentración.
- Guías prácticas de laboratorio Reconstitución, conservación, cálculo de volumen y manipulación paso a paso.
- Catálogo de péptidos de investigación Todas las moléculas con pureza HPLC ≥ 99 % y certificado de análisis por lote.
Preguntas frecuentes
¿Qué es el agua bacteriostática?
El agua bacteriostática es agua estéril con un 0,9 % de alcohol bencílico como conservante. Impide el crecimiento microbiano en el péptido reconstituido y prolonga la estabilidad hasta aproximadamente 28 días.
¿Cuánto dura un péptido después de la reconstitución?
En agua bacteriostática a 2–8 °C, un péptido suele mantenerse estable durante 28 días. La duración exacta depende del péptido y figura en la documentación técnica del lote.
¿Qué hago si veo partículas o turbidez en el vial tras la reconstitución?
Descártalo para cualquier uso posterior. La turbidez indica agregación o contaminación microbiana. Anota el número de lote y contacta con el proveedor.
¿Puedo congelar un péptido reconstituido?
No se recomienda. Los ciclos repetidos de congelación y descongelación reducen la actividad del péptido. Si el almacenamiento prolongado es necesario, reparte en alícuotas de menor volumen y congela una sola vez.
¿Qué hago si no tengo agua bacteriostática?
El agua estéril (NaCl al 0,9 %) es una alternativa, pero la estabilidad baja a aproximadamente 24 horas. Para protocolos experimentales más largos, el agua bacteriostática es el estándar.
