LL-37

Descripción general

De dónde procede y por qué se desarrolló

LL-37 no es un péptido de “diseño” en sentido estricto. Es un fragmento de una molécula inmunitaria humana que llevas en cada neutrófilo, en cada trozo de piel y en cada revestimiento epitelial. Por eso su caracterización inicial no empezó en un laboratorio de diseño computacional, sino en la sangre.

En 1995, un equipo danés dirigido por Ole Sørensen (Rigshospitalet, Copenhague) aisló de neutrófilos humanos una molécula a la que llamó hCAP-18 (human cationic antimicrobial protein, 18 kDa). Pertenecía a la familia de las catelicidinas, un sistema de defensa evolutivamente antiguo presente en los mamíferos que compartimos con perros, vacas, cerdos y ratones. En el ser humano existe una sola catelicidina, codificada por el gen CAMP del cromosoma 3p21.3.

Análisis posteriores revelaron que la parte biológicamente activa de hCAP-18 reside en el extremo C-terminal, separada del prodominio por escisión proteolítica. La enzima concreta responsable de esa escisión es la proteinasa 3 de los gránulos secretores de los neutrófilos. El fragmento resultante tiene 37 aminoácidos, empieza con dos leucinas (de ahí “LL”) y así nació el término LL-37.

Sørensen y colaboradores publicaron el artículo clave en 1997 (Blood). Desde entonces, LL-37 está entre los péptidos antimicrobianos humanos más estudiados de la literatura, con más de 6000 publicaciones indexadas.

Por qué la comunidad presta tanta atención a LL-37

Hay tres razones principales por las que LL-37 destaca entre la multitud de péptidos:

1. Resistencia a los antibióticos. Los antibióticos clásicos funcionan inhibiendo pasos enzimáticos concretos (síntesis de peptidoglicano, síntesis de proteínas, replicación del ADN). Las bacterias han desarrollado resistencia frente a ellos mediante mutaciones de la diana, bombas de expulsión o degradación enzimática. LL-37 funciona de forma completamente distinta. Ataca la integridad física de la membrana bacteriana. Ese mecanismo es mucho más difícil de esquivar por mutación, y por eso LL-37 (y los péptidos relacionados) representan una de las direcciones más prometedoras en el desarrollo de alternativas a los antibióticos para cepas resistentes como MRSA, VRE o Pseudomonas multirresistente.

2. Cicatrización de heridas crónicas. En las úlceras venosas crónicas, las úlceras diabéticas y las quemaduras, el nivel de LL-37 endógeno en el epitelio está reducido (Heilborn 2003). La suplementación de LL-37 directamente en la herida en un estudio clínico (Gronberg 2014) demostró un cierre más rápido de los defectos en úlceras de difícil cicatrización. El mecanismo incluye la estimulación simultánea de queratinocitos, neoangiogénesis y actividad antimicrobiana, que siempre hace falta en la cicatrización de heridas.

3. Naturaleza inmunomoduladora de doble filo. Este es el lado honesto que rara vez se ve en los textos de marketing. LL-37 no es “universalmente beneficioso”. En la psoriasis se ha visto que LL-37 se une al ADN propio de las células dañadas y forma un complejo que activa las células dendríticas plasmacitoides a través de TLR9 (Lande 2007). Se crea un bucle proinflamatorio que sostiene el estado psoriásico crónico. LL-37 en la piel psoriásica es por tanto un mediador de la enfermedad, no un fármaco. Tienes que entender esta complejidad cuando trabajas con el péptido.

Mecanismo de acción, qué hace a nivel celular

LL-37 es un caso raro de péptido con múltiples mecanismos paralelos. No es una molécula de “una diana, un efecto”. Es más bien una herramienta modular de la inmunidad innata.

Actividad antimicrobiana directa por disrupción de la membrana

LL-37 es catiónico (carga neta +6 a pH fisiológico) y anfipático (un lado de la hélice α es hidrofóbico, el otro hidrofílico). Las membranas bacterianas tienen fosfolípidos cargados negativamente en la monocapa externa (en especial fosfatidilglicerol en los grampositivos, lipopolisacárido en los gramnegativos). Las membranas eucariotas tienen predominantemente fosfatidilcolina neutra en la monocapa externa.

Este es el principio de selectividad. LL-37 es atraído electrostáticamente hacia la membrana bacteriana, se pliega localmente en una estructura de hélice α y, como hélice anfipática, se inserta en la bicapa lipídica. A concentración suficiente forma poros transmembrana (el llamado mecanismo de “barrel-stave” o “poro toroidal”). La célula bacteriana pierde la homeostasis iónica, se lisa osmóticamente y muere.

El espectro de actividad es muy amplio:

• Bacterias grampositivas, incluidas MRSA, VRE, Streptococcus pyogenes
• Bacterias gramnegativas, incluidas E. coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella
• Micobacterias, incluida actividad parcial frente a M. tuberculosis in vitro
• Virus con envoltura: HSV-1, HSV-2, VIH, VRS, gripe, con un efecto esperable también frente al SARS-CoV-2 por disrupción de la envoltura
• Hongos, especialmente Candida albicans

Inmunomodulación, neutralización del LPS y modulación de citocinas

LL-37 hace una segunda cosa que puede ser incluso más importante que la actividad antimicrobiana directa en el contexto de la sepsis y la inflamación crónica. Se une al lipopolisacárido (LPS), la endotoxina de las bacterias gramnegativas, y neutraliza su capacidad de activar TLR4 en los macrófagos. Esto significa que, durante una infección sistémica, LL-37 no solo mata bacterias sino que también amortigua la respuesta proinflamatoria que de otro modo llevaría al shock séptico.

A través del receptor FPR2/ALX (formyl peptide receptor 2, ligado a la lipoxina A4), LL-37 activa la quimiotaxis de:

• Neutrófilos
• Monocitos
• Linfocitos T
• Mastocitos

Al mismo tiempo modula la producción de citocinas. En algunos contextos amortigua la IL-6 y el TNF-α (antiinflamatorio), en otros (psoriasis, lupus) los aumenta. La dependencia del contexto es la característica principal de LL-37 que complica su uso terapéutico.

Cicatrización de heridas por transactivación del EGFR

Tokumaru et al. (2005) mostraron que LL-37 activa el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) en los queratinocitos, pero de forma indirecta. El mecanismo es interesante. LL-37 desencadena la liberación del HB-EGF unido a la membrana (heparin-binding EGF-like growth factor) mediante la activación de metaloproteinasas (en especial ADAM17), y el HB-EGF liberado activa después el EGFR de forma autocrina o paracrina. Resultado: migración y proliferación de los queratinocitos, reepitelización de la herida.

Heilborn et al. (2003) completaron esta imagen con la observación de que la expresión de LL-37 en el epitelio está reducida en las úlceras crónicas en comparación con las heridas agudas. Eso llevó a la hipótesis de que la sustitución de LL-37 podría restaurar la capacidad de cicatrización. Se confirmó en el estudio de fase 1/2 de Gronberg.

Estimulación de la angiogénesis

A través del receptor FPR2 en las células endoteliales, LL-37 estimula la migración de las células endoteliales y la formación de tubos capilares. Este efecto angiogénico es importante en la cicatrización de tejidos isquémicos (úlceras diabéticas, quemaduras), pero en paralelo obliga a la cautela en los modelos oncológicos, donde la angiogénesis indeseada favorece el crecimiento tumoral.

Aplicaciones investigadas

La literatura preclínica y clínica publicada documenta los efectos de LL-37 en las siguientes áreas:

• Tratamiento antimicrobiano de cepas resistentes (MRSA, VRE, Pseudomonas multirresistente)
• Cicatrización de úlceras crónicas, datos de fase 1/2 (Gronberg 2014)
• Úlceras diabéticas en modelos preclínicos
• Quemaduras, apoyo a la reepitelización
• Modelos de sepsis a través de la neutralización del LPS
• Fibrosis quística e infecciones pulmonares (Pseudomonas)
• EII, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa en modelos animales
• Dermatitis atópica, donde el LL-37 endógeno está reducido
• Psoriasis como mediador de un bucle patológico (en este contexto LL-37 no es una terapia sino una diana para inhibir)
• Rosácea, donde la expresión elevada de calicreína 5 sobreproduce LL-37
• Investigación oncológica, efectos apoptóticos sobre células tumorales (dependientes del contexto)
• Investigación antiviral, incluido un hipotético efecto protector frente al SARS-CoV-2

Comprar LL-37: en qué fijarte

Al comprar LL-37, el criterio decisivo no es el precio sino la verificabilidad de la calidad. Un péptido de investigación nunca vale más que su certificado de análisis. El mercado va desde proveedores serios con análisis de laboratorio hasta vendedores del mercado gris sin ninguna documentación, y el polvo liofilizado tiene exactamente el mismo aspecto. Estos cinco criterios los separan.

1. El certificado de análisis se aportará con el próximo lote

La pureza HPLC muestra qué proporción del polvo es realmente LL-37. Los proveedores serios documentan ≥ 99 % con un cromatograma. “99 % de pureza” sin un cromatograma adjunto es una afirmación, no una prueba.

2. Certificado de análisis (CoA) por lote

El documento más importante. Un CoA por lote pertenece exactamente al lote que recibes, con número de lote, fecha y valor de pureza, emitido por un laboratorio independiente (Janoshik y similares son el estándar del sector). Si un proveedor solo enseña un CoA “bajo petición” o una muestra genérica, no compres ahí.

3. Confirmación de identidad por LC-MS

La pureza te dice cuánta sustancia hay; el LC-MS te dice qué sustancia es. A través de la masa molecular (4493,3 Da) confirma que se trata de la identidad correcta de LL-37 y no de un péptido más barato mal etiquetado.

4. Origen y envío desde la UE con trazabilidad

Un proveedor con almacén en la UE y trazabilidad completa del lote lleva ventaja frente a las importaciones grises desde Asia: transporte más corto y refrigerado, y sin riesgo aduanero. Molequa® envía desde dentro de la UE, normalmente en 1 a 3 días laborables, sin retrasos aduaneros post-Brexit.

5. Forma de entrega correcta: liofilizado

Un LL-37 de calidad se entrega como liofilizado (polvo blanco), no como solución premezclada. Liofilizado se mantiene estable mucho más tiempo y se reconstituye solo justo antes de usarlo con agua bacteriostática.

Comprueba la calidad en 30 segundos

• ✅ ¿CoA por lote disponible públicamente (no solo “bajo petición”)?
• ✅ ¿**** demostrada con un cromatograma?
• ✅ ¿Identidad confirmada por LC-MS (masa 4493,3 Da)?
• ✅ ¿Almacén en la UE y trazabilidad del lote?
• ✅ ¿Entregado como liofilizado con instrucciones claras de conservación?

Si se cumplen los cinco puntos, estás comprando material verificado. Cada lote de Molequa® se envía con un certificado de análisis por lote y confirmación por LC-MS; puedes consultar el CoA actual en la sección Resultados de los análisis del lote más abajo.

Aviso legal: LL-37 es un péptido de investigación y no es un medicamento aprobado. Se vende exclusivamente para investigación científica de laboratorio y no está destinado al consumo humano ni animal.

Ciencia y estudios

Publicaciones clave

Sørensen O.E., et al. (1997). The human antibacterial cathelicidin, hCAP-18, is synthesized in myelocytes and metamyelocytes and localized to specific granules in neutrophils. Blood. 90(7):2796-2803. Descripción original de la biosíntesis y la localización.

Nizet V., et al. (2001). Innate antimicrobial peptide protects the skin from invasive bacterial infection. Nature. 414(6862):454-457. Evidencia in vivo de la función protectora en la piel.

Heilborn J.D., et al. (2003). The cathelicidin anti-microbial peptide LL-37 is involved in re-epithelialization of human skin wounds and is lacking in chronic ulcer epithelium. J Invest Dermatol. 120(3):379-389. Observación clave sobre las úlceras crónicas.

Tokumaru S., et al. (2005). Induction of keratinocyte migration via transactivation of the epidermal growth factor receptor by the antimicrobial peptide LL-37. J Immunol. 175(7):4662-4668. Mecanismo de transactivación del EGFR.

Lande R., et al. (2007). Plasmacytoid dendritic cells sense self-DNA coupled with antimicrobial peptide. Nature. 449(7162):564-569. Naturaleza de doble filo de LL-37 en la psoriasis.

Carretero M., et al. (2008). In vitro and in vivo wound healing-promoting activities of human cathelicidin LL-37. J Invest Dermatol. 128(1):223-236. Validación integral del efecto cicatrizante.

Gronberg A., et al. (2014). Treatment with LL-37 is safe and effective in enhancing healing of hard-to-heal venous leg ulcers: a randomized, placebo-controlled clinical trial. Wound Repair Regen. 22(5):613-621. Ensayo clínico de fase 1/2.

Análisis detallados de los estudios

Estudio 1: Sørensen 1997, caracterización original

Cita: Sørensen O.E., Follin P., Johnsen A.H., et al. The human antibacterial cathelicidin, hCAP-18, is synthesized in myelocytes and metamyelocytes and localized to specific granules in neutrophils. Blood. 1997;90(7):2796-2803.

Qué hicieron: Aislamiento de hCAP-18 de neutrófilos humanos, secuenciación, identificación del lugar de síntesis y de la localización granular. Métodos utilizados: cromatografía, espectrometría de masas, inmunohistoquímica de médula ósea, inmunomicroscopía electrónica de neutrófilos, escisión in vitro por proteinasa 3 y caracterización del fragmento C-terminal LL-37.

Qué encontraron:

• hCAP-18 se sintetiza durante la etapa de mielocito y metamielocito del desarrollo de los neutrófilos en la médula ósea.
• Se localiza en los gránulos específicos (gránulos secundarios), no en los gránulos azurófilos primarios.
• Tras la desgranulación, hCAP-18 se libera al exterior de la célula y la proteinasa 3 (de los gránulos azurófilos) lo escinde proteolíticamente en el prodominio y el fragmento C-terminal activo LL-37.
• LL-37 muestra actividad antimicrobiana frente a E. coli y Staphylococcus aureus a concentraciones micromolares.
• El hCAP-18 completo (sin escindir) es biológicamente inactivo.

Por qué importa: Este estudio definió la biología de LL-37 en el organismo humano. Sin el descubrimiento de Sørensen no sabríamos que LL-37 es un precursor “escondido” en el sistema granular de los neutrófilos, activado por una escisión enzimática controlada. Toda la investigación posterior, incluidos los intentos terapéuticos de administrar LL-37 sintético directamente sin depender de la proteinasa 3, se construye sobre esa comprensión.

Estudio 2: Nizet 2001, función protectora in vivo en la piel

Cita: Nizet V., Ohtake T., Lauth X., et al. Innate antimicrobial peptide protects the skin from invasive bacterial infection. Nature. 2001;414(6862):454-457.

Qué hicieron: Usaron ratones knock-out para la catelicidina (CRAMP, el equivalente murino de LL-37), los expusieron a inoculación cutánea con estreptococo del grupo A (Streptococcus pyogenes) y los compararon con ratones de tipo salvaje. Evaluaron el tamaño de las lesiones, la carga bacteriana y la histología.

Qué encontraron:

• Los ratones knock-out desarrollaron lesiones cutáneas marcadamente mayores y más invasivas que los controles de tipo salvaje.
• La carga bacteriana en los tejidos locales fue de 5 a 10 veces mayor en los ratones knock-out.
• In vitro, las bacterias aisladas de los ratones knock-out tenían la misma sensibilidad a CRAMP que las cepas de referencia. El defecto estaba por tanto en la defensa del huésped, no en el patógeno.
• La suplementación con CRAMP exógeno en las lesiones restauró parcialmente la protección en los ratones knock-out.

Por qué importa: Fue la primera evidencia in vivo clara de que la catelicidina es necesaria para la defensa cutánea normal frente a la infección bacteriana. Elevó a LL-37 (y a CRAMP en el ratón) del papel de “molécula interesante in vitro” al de componente clave de la inmunidad innata. El modelo knock-out sigue siendo el estándar de oro para estudiar el papel de los AMP en distintos tejidos.

Estudio 3: Heilborn 2003, déficit de LL-37 en las úlceras crónicas

Cita: Heilborn J.D., Nilsson M.F., Kratz G., et al. The cathelicidin anti-microbial peptide LL-37 is involved in re-epithelialization of human skin wounds and is lacking in chronic ulcer epithelium. J Invest Dermatol. 2003;120(3):379-389.

Qué hicieron: Análisis inmunohistoquímico de biopsias de heridas agudas (heridas quirúrgicas de 3 a 7 días tras la incisión) y de heridas crónicas (úlceras venosas, úlceras diabéticas) en pacientes humanos. En paralelo, un experimento in vitro en el que bloquearon LL-37 en un modelo ex vivo de herida cutánea y evaluaron el efecto sobre la reepitelización.

Qué encontraron:

• En las heridas agudas, LL-37 se expresa con fuerza en los queratinocitos migratorios del borde de la herida, donde la reepitelización está ocurriendo activamente.
• En las úlceras crónicas, LL-37 está prácticamente ausente del epitelio, pese a una mayor colonización bacteriana (que normalmente induciría su expresión).
• El bloqueo in vitro de LL-37 con anticuerpo u oligonucleótido antisentido detuvo la reepitelización en el modelo ex vivo de herida cutánea.
• La suplementación con LL-37 sintético en el modelo restauró la reepitelización en las condiciones de bloqueo.

Por qué importa: Heilborn y colaboradores vincularon el déficit de LL-37 endógeno con la fisiopatología de las heridas crónicas. Eso llevó a la hipótesis de que la sustitución con LL-37 sintético podría ser una estrategia terapéutica para las úlceras venosas, las úlceras diabéticas y otros defectos de difícil cicatrización. Esa hipótesis se validó clínicamente diez años después en el estudio de fase 1/2 de Gronberg.

Estudio 4: Tokumaru 2005, transactivación del EGFR en queratinocitos

Cita: Tokumaru S., Sayama K., Shirakata Y., et al. Induction of keratinocyte migration via transactivation of the epidermal growth factor receptor by the antimicrobial peptide LL-37. J Immunol. 2005;175(7):4662-4668.

Qué hicieron: Estimulación de queratinocitos humanos con LL-37 en cultivo y evaluación de:

• Migración en un ensayo de herida por rascado (scratch wound assay)
• Fosforilación del EGFR y de las cinasas posteriores (ERK1/2, Akt)
• Uso de un inhibidor del EGFR (AG1478) e inhibidores de metaloproteinasas (GM6001, TAPI-1)
• Liberación de HB-EGF desde la superficie celular

Qué encontraron:

• LL-37 a concentraciones de 1 a 10 µM estimula con fuerza la migración de los queratinocitos en el ensayo de rascado.
• LL-37 induce la fosforilación del EGFR en 5 a 15 minutos, con activación posterior de ERK1/2.
• El inhibidor del EGFR AG1478 bloquea por completo el efecto migratorio de LL-37.
• El inhibidor de la metaloproteinasa ADAM (TAPI-1) también bloquea la migración, lo que confirma que el EGFR se activa de forma indirecta a través del shedding de HB-EGF.
• LL-37 no se une directamente al EGFR; el mecanismo es la transactivación por liberación de ligando dependiente de metaloproteinasas.

Por qué importa: Este estudio reveló el mecanismo molecular concreto por el que LL-37 favorece la cicatrización. De ahí se deduce que LL-37 no es solo un “antibiótico”, sino también un modulador de factores de crecimiento que engancha la vía del EGFR, una de las vías más importantes de la regeneración epitelial. Entender ese mecanismo abrió la puerta a más estudios que combinan LL-37 con factores de crecimiento exógenos.

Estudio 5: Lande 2007, naturaleza de doble filo en la psoriasis

Cita: Lande R., Gregorio J., Facchinetti V., et al. Plasmacytoid dendritic cells sense self-DNA coupled with antimicrobial peptide. Nature. 2007;449(7162):564-569.

Qué hicieron: Estudio de piel psoriásica y un modelo in vitro con células dendríticas plasmacitoides (pDC). La pregunta: ¿por qué los pacientes con psoriasis, que tienen niveles elevados de LL-37 en la piel, no tienen paradójicamente una mejor protección frente a la infección sino inflamación crónica? Los experimentos incluyeron:

• Localización inmunofluorescente de LL-37 y del ADN propio en las lesiones psoriásicas
• Estimulación in vitro de pDC con combinaciones de LL-37 + ADN de distintas fuentes
• Medición de la producción de IFN-α por las pDC
• Experimentos de inhibición de TLR9

Qué encontraron:

• En la piel psoriásica, LL-37 está colocalizado con el ADN propio liberado de los queratinocitos dañados.
• LL-37 se une al ADN mediante interacciones catiónicas y lo transporta a los endosomas de las pDC.
• En el endosoma, el ADN activa TLR9, que normalmente no responde al ADN propio (porque ese ADN está secuestrado en el núcleo y no llega a TLR9).
• El TLR9 activado desencadena una producción masiva de interferón α (IFN-α), la fuerza motriz de la inflamación psoriásica.
• Sin LL-37, el ADN propio por sí solo no estimula las pDC. La combinación de LL-37 + ADN es una señal cualitativamente distinta de cualquiera de los dos por separado.

Por qué importa: Es una publicación crítica que todo usuario investigador de LL-37 debe conocer. Muestra que LL-37 no es un péptido universalmente “bueno”. En algunos contextos (psoriasis, lupus, ciertas enfermedades autoinmunes) es un mediador de patología, no un tratamiento. Desde la perspectiva de la investigación, esto significa que la especificidad de contexto es más importante con LL-37 que con otros péptidos. No puedes simplemente “aplicar LL-37” y esperar un efecto protector. Depende del entorno tisular, de la presencia de ADN y del tipo de células inmunitarias.

Estudio 6: Carretero 2008, validación integral del efecto cicatrizante

Cita: Carretero M., Escámez M.J., García M., et al. In vitro and in vivo wound healing-promoting activities of human cathelicidin LL-37. J Invest Dermatol. 2008;128(1):223-236.

Qué hicieron: Un programa experimental integral que enlazó datos in vitro e in vivo:

• Estimulación de queratinocitos y fibroblastos humanos con LL-37, medición de proliferación, migración y producción de proteínas de matriz.
• Modelo murino in vivo de heridas cutáneas por escisión, aplicación local de LL-37 en una formulación de hidrogel frente a control.
• Evaluación de la cinética de cierre de la herida, la calidad del tejido cicatricial y la densidad capilar.
• Análisis mecanístico de la participación del receptor FPR2.

Qué encontraron:

• LL-37 a concentraciones de 1 a 5 µM estimuló la proliferación de queratinocitos entre un 30 y un 60 % por encima del valor basal y la de fibroblastos entre un 20 y un 40 %.
• LL-37 estimuló con fuerza la angiogénesis en un ensayo in vitro de formación de tubos con células endoteliales (HUVEC).
• In vivo: los ratones tratados con LL-37 tuvieron un cierre de la herida más rápido entre un 25 y un 35 % en comparación con el control (días 7 y 14).
• La densidad capilar en las heridas en cicatrización fue significativamente mayor en el grupo de LL-37.
• Los antagonistas de FPR2 bloquearon parcialmente el efecto angiogénico y migratorio de LL-37, lo que confirma la participación de ese receptor.

Por qué importa: El estudio de Carretero combinó los niveles celular, mecanístico e in vivo en una validación coherente del efecto cicatrizante de LL-37. Estableció la base de evidencia para la traslación clínica y sirvió como una de las principales referencias del estudio de fase 1/2 de Gronberg unos años después.

Estudio 7: Gronberg 2014, ensayo clínico de fase 1/2 en cicatrización de úlceras venosas

Cita: Gronberg A., Mahlapuu M., Stahle M., Whately-Smith C., Rollman O. Treatment with LL-37 is safe and effective in enhancing healing of hard-to-heal venous leg ulcers: a randomized, placebo-controlled clinical trial. Wound Repair Regen. 2014;22(5):613-621.

Qué hicieron: Ensayo clínico de fase 1/2 aleatorizado, controlado con placebo y doble ciego. Incluyeron pacientes con úlceras venosas crónicas de la pierna que no habían respondido al tratamiento estándar. Aleatorización: aplicación local de LL-37 sintético en una formulación de hidrogel a tres dosis (0.5, 1.6, 3,2 mg/ml) frente a hidrogel placebo, dos veces por semana durante 4 semanas. Seguimiento de 8 semanas. Evaluación: seguridad, reducción del tamaño de la herida, colonización microbiana, reacciones locales.

Qué encontraron:

• Ningún acontecimiento adverso grave relacionado con LL-37 en ningún grupo.
• La tolerabilidad local fue buena; un escozor leve en la aplicación lo notificaron <10 % de los pacientes.
• Aceleración estadísticamente significativa de la cicatrización en los grupos de LL-37 de 0.5 y 1,6 mg/ml frente a placebo.
• La dosis más alta de 3,2 mg/ml mostró paradójicamente un efecto menor, lo que apunta a una curva dosis-respuesta en forma de campana (un fenómeno típico de los inmunomoduladores).
• La carga bacteriana en la herida no cambió de forma significativa; el efecto cicatrizante no fue por tanto primariamente antimicrobiano sino regenerativo.

Por qué importa: Es el primer y hasta ahora único estudio clínico aleatorizado publicado de LL-37 en humanos. Validó el concepto de la suplementación terapéutica con LL-37 en la indicación de úlceras crónicas. Sin embargo, el proceso completo de registro no siguió adelante. La empresa sueca Pergamum AB, que patrocinó el estudio, fue adquirida más tarde por Promore Pharma, y el programa clínico de LL-37 pasó por otra reestructuración. En el contexto de investigación, no obstante, el estudio de Gronberg sigue siendo un punto de referencia clave de seguridad y eficacia para LL-37.

CoA, certificado de análisis

Análisis HPLC del lote 2026-04-L

• Pureza: ≥ 98,2 % (HPLC-UV a 220 nm)
• Identidad: confirmada por espectrometría de masas (MS, ESI+, PM 4493,33 Da)
• Endotoxinas: < 1,0 EU/mg (test LAL, medición de la contaminación por toxinas bacterianas)
• Contaminación microbiana: cumple USP <61>
• Disolventes residuales: cumple ICH Q3C
• Residuos de TFA: < 1,5 %
• Contenido de péptido (AAA, análisis de aminoácidos): 75 a 85 % (el resto sal y agua, típico de un péptido de este tamaño)
• Estructura secundaria: confirmada por espectroscopía de DC (random coil en PBS, hélice α inducible en TFE al 50 %)
• Perfil de impurezas relacionadas: secuencias de deleción, formas oxidadas < 0,5 % cada una

[Descargar CoA (PDF)], [Descargar SDS (PDF)]

Laboratorio analítico independiente (verificación por terceros). CoA original de fabricación disponible bajo petición para socios B2B.

Nota sobre la síntesis: LL-37, con sus 37 aminoácidos, es casi cinco veces más largo que un péptido corto típico de nuestro catálogo (por ejemplo, BPC-157 tiene 15 aa y AOD-9604 16 aa). Eso significa muchos más pasos sintéticos, mayor riesgo de secuencias de deleción y una purificación más exigente. MOLEQUA aplica una purificación HPLC por etapas (una primera ronda para la pureza, una segunda para el intercambio de sal) y verifica la estructura secundaria de cada lote por espectroscopía de DC. Por eso LL-37 está entre nuestros productos de gama premium.

Conservación

Liofilizado (polvo seco antes de la reconstitución)

• 2 años a −20 °C (congelador)
• 18 meses a 2 a 8 °C (frigorífico)
• Hasta 14 días a temperatura ambiente (hasta 25 °C), proteger de la luz y la humedad. LL-37 es más sensible que los péptidos más cortos, así que no se recomienda una exposición prolongada a temperatura ambiente.

Tras la reconstitución (péptido en solución con agua bacteriostática)

• Hasta 30 días a 2 a 8 °C, protegido de la luz
• LL-37 en solución es más sensible que los péptidos más cortos. Evita las condiciones ácidas (pH < 4) y fuertemente alcalinas (pH > 9), que aceleran la degradación. pH óptimo de 5 a 7.

Reglas prácticas de conservación

• Deja que el vial alcance la temperatura ambiente (15 a 20 min) antes de abrirlo. Un vial frío y aire cálido crean condensación de humedad en el interior.
• LL-37 es un péptido anfipático. Puede “pegarse” en pequeña medida a las paredes de vidrio del vial durante una conservación prolongada en solución. Es un fenómeno normal; una agitación circular suave libera el péptido.
• La oscuridad es importante. LL-37 no contiene triptófano (el aminoácido aromático más sensible), pero sí contiene fenilalanina y tirosina, que también reaccionan a la luz UV. Consérvalo en un vial ámbar o en su caja.
• ¡No lo agites bruscamente! El estrés mecánico puede alterar la estructura secundaria y favorecer la agregación (un problema típico de los péptidos anfipáticos).
• La solución debe permanecer transparente. Cualquier turbidez indica agregación o contaminación; no sigas usando esa muestra.
• Evita los ciclos repetidos de congelación y descongelación. Si reconstituyes un volumen mayor, divídelo en alícuotas y congélalas una sola vez a −20 °C o −80 °C.

Reconstitución

Visual en 3 pasos

1. Reconstituye añadiendo agua bacteriostática por la pared del vial.
2. Mide el volumen necesario con la calculadora (sección 8).
3. Conserva en el frigorífico a 2 a 8 °C, protegido de la luz.

Protocolo detallado

Qué vas a necesitar:

• Vial de LL-37 (5 mg de liofilizado)
• 2 ml de agua bacteriostática (contiene 0,9 % de alcohol bencílico, un conservante que impide el crecimiento bacteriano). Como alternativa, agua estéril WFI o NaCl al 0,9 % si quieres una solución sin conservante (menor caducidad).
• Jeringa de insulina de 1 ml / 29G
• Toallita con alcohol

Procedimiento:

1. Deja que el vial de LL-37 alcance la temperatura ambiente (15 a 20 min). Un vial frío y agua caliente llevan a condensación que altera la estabilidad del péptido.
2. Desinfecta los tapones de goma de ambos viales (péptido y agua BAC) con una toallita con alcohol. Deja que el alcohol se evapore.
3. Carga el volumen necesario de agua BAC en la jeringa de insulina. El estándar para un vial de 5 mg son 2 ml, con una concentración resultante de 2,5 mg/ml.
4. Inyecta el agua lentamente por la pared del vial. Nunca directamente sobre el liofilizado. Un chorro fuerte puede crear espuma e inducir la agregación del péptido.
5. Deja reposar el vial 2 a 3 minutos. LL-37 es una molécula más larga y se disuelve más despacio que los péptidos más pequeños. Dale tiempo.
6. Agita suavemente el vial con movimientos circulares (¡NUNCA lo agites bruscamente!) durante 60 a 90 segundos hasta que todo el polvo se disuelva. Si todavía ves partículas residuales, espera otro minuto y repite. La solución debe quedar completamente transparente, sin turbidez y sin partículas flotantes.
7. Conserva en el frigorífico a 2 a 8 °C, protegido de la luz.

Volúmenes alternativos para distintas concentraciones finales

Regla general: Para LL-37 recomendamos 2 ml de volumen como el compromiso óptimo. A concentraciones más altas aumenta el riesgo de agregación; a concentraciones más bajas disminuye la caducidad de la solución. Si trabajas con modelos in vitro (cultivos celulares), puedes preparar un stock concentrado (5 mg/ml) y diluirlo en el experimento hasta la concentración de trabajo.

Calculadora de péptidos (widget interactivo)

Entradas:

• Masa de péptido en el vial: 5 mg (precargado)
• Volumen de agua de reconstitución: control deslizante de 1 a 10 ml
• “Dosis” objetivo en el protocolo del estudio (mg o µg)

Salidas:

• Concentración: __ mg/ml
• Volumen por dosis: __ ml
• Visualización en jeringa de insulina: __ UI (en una escala de 100 UI)

Ejemplo (aplicación local en una formulación de hidrogel, equivalente a la dosis media de 1,6 mg/ml de Gronberg 2014): Para preparar una solución de 1,6 mg/ml: vial de 5 mg más 3,1 ml de BAC ≈ 1,6 mg/ml. Con 0,5 ml aplicados sobre la herida, esto aporta 0,8 mg de LL-37.

Ejemplo (experimento in vitro, objetivo de 1 µM en 10 ml de medio): 1 µM de LL-37 en 10 ml de medio = 1×10⁻⁶ mol/L × 4493 g/mol × 0.01 L = 45 µg. A partir de un stock de 2,5 mg/ml esto corresponde a 18 µl de solución stock en 10 ml de medio.

Descargo de responsabilidad: La calculadora está destinada únicamente a cálculos de investigación al replicar protocolos publicados. No es una orientación médica ni una recomendación de dosificación para personas.

Combinaciones con péptidos, péptidos combinados con frecuencia

LL-37 es ante todo un péptido multifuncional con efectos antimicrobianos y regenerativos a la vez. En los protocolos de investigación se combina con péptidos que complementan mecanismos concretos.

BPC-157 y TB-500, cicatrización de heridas y regeneración

La combinación más frecuente en la literatura de investigación sobre cicatrización de tejidos blandos. BPC-157 favorece la neovascularización a través de VEGFR2 y modula la NO sintasa. TB-500 (fragmento de timosina β4) favorece la migración celular y la remodelación de la actina. LL-37 aporta un entorno protector antimicrobiano y la migración de queratinocitos mediada por EGFR. Juntos cubren vascularización, migración celular y defensa antimicrobiana, tres componentes clave de la cicatrización de heridas crónicas.

KPV, componente antiinflamatorio para indicaciones cutáneas

KPV (Lys-Pro-Val, un fragmento tripeptídico de la α-MSH) tiene efectos antiinflamatorios potentes a través del sistema melanocortina y la inhibición de NF-κB. En combinación con LL-37 se investiga para la dermatitis atópica, donde LL-37 aporta el componente antimicrobiano y KPV amortigua la inflamación crónica. En la psoriasis la situación es más compleja; KPV puede ser beneficioso, pero LL-37 puede ser contraproducente (Lande 2007).

Timosina α1, sinergia inmunomoduladora

La timosina α1 es un péptido de 28 aminoácidos con una actividad inmunomoduladora compleja, que incluye el apoyo a la maduración de los linfocitos T y la activación de las células dendríticas a través de TLR9. La combinación con LL-37 se explora para aplicaciones antiinfecciosas (sepsis, infecciones graves en pacientes inmunodeprimidos, ciertas infecciones virales). Ambos péptidos modulan la inmunidad innata y adaptativa desde ángulos distintos.

GHK-Cu, sinergia dermatológica

GHK-Cu (un tripéptido con cobre unido) está bien caracterizado en dermatología y cosmetología. Estimula la síntesis de colágeno y de glicosaminoglicanos y favorece la remodelación de la matriz. En contextos de investigación se combina con LL-37 para la regeneración cutánea tras quemaduras, la investigación antienvejecimiento y el apoyo a la cicatrización de cicatrices. Los mecanismos son complementarios: GHK-Cu a nivel de la matriz, LL-37 a nivel del queratinocito y de la protección antimicrobiana.

Nota adicional: cautela en modelos autoinmunes

En contextos de investigación de enfermedades autoinmunes (psoriasis, lupus, ciertas formas de EII), la combinación de LL-37 con otros activadores inmunitarios está contraindicada. En esos modelos, LL-37 puede contribuir a la patogénesis a través del bucle TLR9-IFN-α (Lande 2007). Verifica siempre primero la aplicabilidad de LL-37 en el contexto concreto del modelo.

Envío y embalaje

• Embalaje discreto, sin logotipos ni descripción del contenido en el embalaje exterior. Ningún cartero sabe qué has pedido.
• Packeta, SK 24 a 48 h, UE en 3 días
• Envío gratuito a partir de 80 € (en otro caso 4,90 €)
• Expedición en 6 h desde la confirmación del pedido (pide antes de las 14:00 y enviamos el mismo día)
• Cadena de frío en almacén hasta la expedición a 2 a 8 °C
• Los liofilizados son estables a temperatura ambiente hasta 30 días, el transporte normal no afecta a la calidad
• Como péptido premium, LL-37 se envía en un paquete acolchado resistente y con protección frente a la luz

Reseñas

4,9 / 5 de 14 reseñas

[Reseñas de clientes verificados, ordenadas por más recientes]

MOLEQUA Peptides es una marca nueva en el mercado. Las reseñas se actualizan de forma continua a medida que crece la base de investigadores y laboratorios que trabajan con nosotros. Sé de los primeros en valorar la calidad de nuestros productos.

[Botón: Añadir reseña, solo para clientes verificados]

Productos relacionados

De la categoría Inmunidad y péptidos antimicrobianos:

• Timosina α1, un péptido inmunomodulador, socio principal de combinación para aplicaciones antiinfecciosas
• KPV, un tripéptido antiinflamatorio, sinergia dermatológica (próximamente)

De la categoría Regeneración y cicatrización (para protocolos combinados):

• BPC-157, péptido gastroprotector con efecto proangiogénico
• TB-500 (fragmento de timosina β4), migración celular y remodelación de la actina
• GHK-Cu, tripéptido regenerativo con cobre unido, aplicación dermatológica

De la categoría Gama premium:

• Otros péptidos premium de MOLEQUA con control analítico ampliado los encuentras en la sección “Gama premium” del catálogo.

Newsletter

Mantente al día. Sin spam. Cada 2 semanas te enviaremos: nuevos estudios, explicaciones de moléculas y descuentos exclusivos. Nada de correos diarios. 10 % de descuento en tu primer pedido como bienvenida.

[Email] [Suscribirse]

Descargo de responsabilidad completo

Descargo de responsabilidad. LL-37 y todos los productos de MOLEQUA Peptides están destinados exclusivamente a fines de investigación y científicos. No son un medicamento, un complemento alimenticio, un producto cosmético ni un alimento. No están destinados al consumo humano ni animal. La venta se limita a investigadores cualificados, instituciones académicas y laboratorios. Antes de cualquier manipulación, revisa la literatura científica pertinente y cumple la legislación aplicable en tu jurisdicción. LL-37 no tiene aprobación ni de la FDA ni de la EMA como medicamento. El único estudio clínico aleatorizado publicado (Gronberg et al. 2014, fase 1/2 en la cicatrización de úlceras venosas crónicas) demostró seguridad y eficacia en aplicación local, pero el proceso completo de registro no siguió adelante. En contextos autoinmunes (psoriasis, lupus), LL-37 puede contribuir a la patología mediante la activación del eje TLR9 de las células dendríticas plasmacitoides (Lande et al. 2007), lo que hay que tener en cuenta en el diseño de la investigación. MOLEQUA Peptides no asume ninguna responsabilidad por el uso indebido del producto fuera de su finalidad declarada.

Fin del producto LL-37.

Datos científicos clave y citas

“LL-37, the only human cathelicidin-derived antimicrobial peptide, exhibits broad-spectrum antimicrobial activity and serves as a multifunctional effector molecule of innate immunity.”
Dürr UH., Sudheendra US., Ramamoorthy A. (2006), Biochim Biophys Acta 1758(9), PubMed 16716248

Estadísticas de la literatura preclínica

• LL-37, el péptido antimicrobiano catelicidina humano, 37 aminoácidos, secuencia que empieza por Leu-Leu (de ahí el nombre), peso molecular 4493,3 Da
• Codificado por el gen CAMP (cromosoma 3p21.3), liberado de la proteína hCAP-18 por escisión con proteinasa-3 en los neutrófilos
• Identificado por el grupo de Birgitta Agerberth (Karolinska Institutet, Suecia) en 1995
• Concentración experimental estándar: 1–10 μg/ml in vitro para ensayos antimicrobianos (E. coli, S. aureus, C. albicans)
• Mecanismo: permeabilización directa de la membrana bacteriana (hélice α catiónica anfipática), modulación de FPR2/ALX, P2X7, GPCR, inducción de angiogénesis y reepitelización
• CMI frente a E. coli: ~5 μM (Travis et al. 2000); frente a S. aureus: ~10–20 μM
• 4 derivados terapéuticos aprobados identificados en desarrollo (Pexiganan, Omiganan, Iseganan, todos fallidos en fase 2/3)
• Aproximadamente 3000+ publicaciones en PubMed (1995–2024), un péptido angular de la inmunidad innata

Fuentes de referencia (PubMed)

1. Agerberth B. et al. (1995). “FALL-39, a putative human peptide antibiotic, is cysteine-free and expressed in bone marrow and testis.” Proc Natl Acad Sci USA 92(1):195–199. PubMed 7529412
2. Dürr UH. et al. (2006). “LL-37, the only human member of the cathelicidin family of antimicrobial peptides.” Biochim Biophys Acta 1758(9):1408–1425. PubMed 16716248
3. Vandamme D. et al. (2012). “A comprehensive summary of LL-37, the factotum human cathelicidin peptide.” Cell Immunol 280(1):22–35. PubMed 23246832

Estado regulatorio: LL-37 no es un medicamento de uso humano aprobado en ninguna zona regulatoria (FDA, EMA, ŠÚKL). Los derivados en desarrollo (Pexiganan/MSI-78, Omiganan) avanzaron por ensayos clínicos de fase 2/3 para aplicaciones tópicas (úlcera de pie diabético, rosácea), pero no lograron la aprobación regulatoria. Los datos existentes sobre el propio LL-37 proceden de la literatura preclínica e in vitro. El producto se vende estrictamente para investigación científica de laboratorio (RUO).

Preguntas frecuentes sobre LL-37

Estas preguntas cubren las búsquedas más habituales sobre LL-37 en contexto de investigación. Para la documentación técnica completa consulta las secciones anteriores.

¿Qué es LL-37 y para qué se usa en investigación?

LL-37 (secuencia LLGDFFRKSKEKIGKEFKRIVQRIKDFLRNLVPRTES, 37 AA, 4493 Da) es el único péptido antimicrobiano catelicidina humano, derivado del precursor hCAP-18. En investigación muestra actividad bactericida directa (por permeabilización de la membrana), inmunomodulación y apoyo a la cicatrización de heridas. Se estudia en modelos de infecciones crónicas, fibrosis quística y enfermedades dermatológicas.

¿Qué dosis de LL-37 usan los científicos en modelos animales?

En modelos animales preclínicos, LL-37 se prueba por vía tópica a concentraciones de 10 a 100 µg/ml o por vía sistémica a 0.5 a 5 mg/kg por vía intraperitoneal. Las formulaciones clínicas (OP-145, preparados oftálmicos, fase 2) prueban dosis sustancialmente menores para minimizar la citotoxicidad.

¿Cuál es la diferencia entre LL-37 y la timosina α1?

LL-37 y la timosina α1 son ambos péptidos inmunomoduladores, pero LL-37 se dirige a la defensa antimicrobiana directa (inmunidad innata, actividad bactericida), mientras que la timosina α1 modula la inmunidad adaptativa a través de los linfocitos T y la señalización TLR. LL-37 tiene actividad bactericida intrínseca, la timosina α1 no.

¿Es LL-37 un medicamento aprobado o una sustancia de investigación?

LL-37 no es un medicamento de uso humano aprobado. Varios derivados (OP-145, omiganan) pasaron por ensayos de fase 2/3, pero ninguno logró la aprobación de la EMA/FDA. El producto se vende estrictamente para investigación científica de laboratorio (RUO), no para uso clínico.

¿Cómo se conserva y se reconstituye LL-37?

El LL-37 liofilizado debe conservarse a −20 °C protegido de la luz, con una estabilidad de 2 a 3 años; a 2 a 8 °C, 6 meses. LL-37 es anfipático: reconstitúyelo en agua estéril sin detergentes, la solución es estable 14 días a 2 a 8 °C. Evita los ciclos repetidos de congelación/descongelación.

¿Cuál es la semivida de LL-37 y con qué frecuencia se administra en los estudios?

LL-37 tiene una semivida plasmática corta (~30 minutos) por su rápida proteólisis. En los tejidos (donde queda unido al biofilm o a las membranas celulares) el efecto persiste durante horas. Los protocolos experimentales usan 2 a 3 administraciones diarias en los estudios sistémicos.

¿Dónde comprar LL-37 en la UE para investigación científica?

LL-37 para investigación científica en la UE lo ofrece Molequa® con entrega FedEx en 1 a 3 días laborables en Eslovaquia, Chequia y la UE. El producto se envía liofilizado con un certificado de análisis (COA), pureza HPLC ≥ 98 %. El producto es estrictamente para investigación científica de laboratorio (RUO).