NAD+

Visão geral

O que é o NAD+ e porque não é um péptido

Este é um ponto de partida importante, porque o NAD+ é muitas vezes mencionado no contexto dos “péptidos de investigação”, mas quimicamente pertence a uma categoria completamente diferente. O NAD+ não é um péptido, é uma coenzima dinucleotídica, mais parecida com o ATP e com outros nucleótidos do que com as cadeias de aminoácidos.

A molécula de NAD+ é constituída por:

• Nicotinamida (um derivado da vitamina B3, a niacina)
• Adenina (uma base purínica, a mesma que existe no ADN/ARN/ATP)
• Duas riboses (açúcares)
• Uma ponte pirofosfato (dois resíduos de fosfato ligados entre si)

Quimicamente, o NAD+ pertence portanto à família dos dinucleótidos, juntamente com o NADH (a forma reduzida), o NADP+ e o NADPH. No portefólio da Molequa® surge como molécula de investigação não peptídica, à semelhança do MK-677, uma camada que complementa as moléculas peptídicas em determinados contextos de investigação (sobretudo na longevidade).

Papel central no metabolismo celular

O NAD+ é a coenzima mais importante da célula. Não é exagero: sem NAD+ parariam centenas de reações enzimáticas e a célula morreria em poucos minutos. Três papéis principais:

1. Cofator redox no metabolismo energético. O NAD+ e a sua forma reduzida NADH participam em todas as principais vias metabólicas: glicólise, ciclo de Krebs, oxidação dos ácidos gordos. Em cada reação oxidativa da célula, o NAD+ é convertido em NADH, que depois entrega eletrões na mitocôndria para produzir ATP. Sem NAD+ não há ATP. Sem ATP não há vida.

2. Substrato para as sirtuínas (SIRT1 a SIRT7). As sirtuínas são uma família de enzimas que desacetilam proteínas, removendo grupos acetilo das lisinas nas histonas (o que regula a expressão génica) e noutras proteínas (o que regula o metabolismo e a resposta ao stress). As sirtuínas são as “enzimas da longevidade” por excelência: a sua ativação em modelos animais prolonga o tempo de vida. As sirtuínas precisam ABSOLUTAMENTE de NAD+ como substrato; sem NAD+ não funcionam.

3. Substrato para as PARP (poli-ADP-ribose polimerases). As PARP são enzimas de reparação do ADN. A cada evento de dano no ADN (UV, radicais livres, erros de replicação), as PARP “varrem” o ADN e iniciam os processos de reparação. Nesse processo consomem quantidades enormes de NAD+. Em danos mais graves, as PARP podem esgotar por completo a reserva celular de NAD+ e a célula morre (paradoxalmente, por falta de energia).

Declínio do NAD+ com a idade, a hipótese do envelhecimento

Esta é uma das hipóteses mais bem documentadas na área do envelhecimento. Os níveis de NAD+ diminuem com a idade:

• Adultos de 40 anos têm ~50 % dos níveis de NAD+ de adultos de 20 anos
• Adultos de 60 anos têm ~25 % dos níveis de NAD+ mais jovens
• O declínio é visível em todos os tecidos: músculo, fígado, cérebro, pele, sangue

O mecanismo do declínio é multifatorial:

1. Atividade aumentada da CD38, a enzima que degrada o NAD+. A expressão da CD38 sobe com a idade devido à inflamação crónica.
2. Hiperativação das PARP, o dano crónico do ADN com a idade (stress oxidativo, disfunção dos telómeros) esgota o NAD+ através das PARP.
3. Queda da síntese de NAD+, redução da atividade das enzimas NAMPT e NMNAT com a idade.
4. Queda da disponibilidade de precursores, nicotinamida, NMN, NR.

Resultado: uma “crise de NAD+” nas células envelhecidas. As sirtuínas não funcionam corretamente, as reparações do ADN ficam comprometidas, a função mitocondrial diminui. Este é o enquadramento molecular de muitos aspetos do envelhecimento biológico.

Hipótese: repor o NAD+, abrandar o envelhecimento

Daqui nasce uma hipótese terapêutica atrativa: se repusermos o NAD+, é possível reverter ou abrandar alguns aspetos do envelhecimento. Esta é a ideia central da investigação de David Sinclair (Harvard), Shin-ichiro Imai (Washington University) e de outros “apóstolos do NAD+” na área da longevidade.

Em modelos animais funciona. Ratinhos mais velhos recebem NAD+ (ou o precursor NMN ou NR) e:

• A função mitocondrial melhora
• A força e a resistência musculares são restauradas
• A cognição melhora
• O tempo de vida prolonga-se
• A capacidade fértil é restaurada em ratinhos velhos

Em seres humanos os dados são mais prudentes. Os ensaios de fase 2 com NMN e NR (precursores orais do NAD+) mostraram efeitos bioquímicos (aumento do NAD+ plasmático), mas resultados clínicos mistos. Faltam ainda dados de fase 3.

Administração direta de NAD+ vs precursores (NMN, NR)

Esta é uma pergunta frequente na investigação. Três opções principais:

O NAD+ direto é preferível quando se pretende uma subida rápida da reserva intracelular de NAD+. O NMN e o NR são preferíveis para a manutenção a longo prazo, graças à biodisponibilidade oral.

No contexto da investigação, o NAD+ é frequentemente administrado como infusão IV (250 a 1000 mg) em clínicas que oferecem “terapia com NAD+”. Esta utilização é off-label e não foi formalmente validada, mas um corpo crescente de investigação sugere que pode ser eficaz em algumas indicações.

Mecanismo de ação, várias vias

Metabolismo energético

O NAD+ é cofator na glicólise, no ciclo de Krebs e na β-oxidação. Com níveis mais elevados de NAD+:

• Maior taxa de produção de ATP
• Melhor função mitocondrial
• Oxidação aumentada dos ácidos gordos
• Melhor flexibilidade metabólica

Ativação das sirtuínas

As sirtuínas (SIRT1 a 7) são ativadas com níveis mais elevados de NAD+. Os efeitos mais importantes:

• SIRT1: desacetilação dos fatores de transcrição FOXO → resistência ao stress; desacetilação do PGC-1α → biogénese mitocondrial
• SIRT3 (mitocondrial): desacetilação de enzimas mitocondriais → melhor eficiência da OXPHOS
• SIRT6: estabilização dos telómeros, reparações do ADN
• SIRT2: regulação do metabolismo e do ciclo celular

A ativação das sirtuínas é o principal mecanismo de longevidade associado ao NAD+.

Otimização da reparação do ADN

Com uma reserva suficiente de NAD+, as PARP reparam eficazmente os danos no ADN. Com défice de NAD+ os danos no ADN acumulam-se e conduzem à instabilidade genómica, uma das principais marcas do envelhecimento.

Efeitos anti-inflamatórios pela inibição da CD38

Níveis mais elevados de NAD+ podem inibir a CD38 por retroalimentação e reduzir assim a inflamação crónica (“inflammaging”). É um mecanismo secundário, mas clinicamente relevante.

Efeitos neurológicos

O NAD+ é crítico para a função neuronal. O cérebro tem uma elevada exigência energética e as sirtuínas nos neurónios (sobretudo a SIRT1 e a SIRT3) regulam a neuroproteção, a plasticidade e a cognição. Na doença de Alzheimer, na doença de Parkinson e noutras doenças neurodegenerativas observa-se um défice local de NAD+ nos neurónios afetados.

Aplicações investigadas

Na literatura pré-clínica e clínica publicada, os efeitos do NAD+ (e dos seus precursores) estão documentados nas seguintes áreas:

• Declínio das funções associado à idade, demonstrado de forma robusta em modelos animais
• Disfunções mitocondriais, dados clínicos emergentes
• Doenças neurodegenerativas (Alzheimer, Parkinson), ensaios de fase 2
• Síndrome de fadiga crónica, dados observacionais, terapia com NAD+ IV
• Tratamento da dependência, álcool, opioides (anedótico, alguns estudos)
• Síndrome metabólica e resistência à insulina, dados de fase 2 com NMN
• Função cardiovascular, função endotelial, pressão arterial
• Envelhecimento da pele, investigação cosmética
• Sintomas prolongados pós-COVID, investigação emergente
• Sarcopenia, dados pré-clínicos e de fase 2

Comprar NAD+: a que deve estar atento

Ao comprar NAD+, o critério decisivo não é o preço, mas a verificabilidade da qualidade. Um péptido de investigação nunca vale mais do que o seu certificado de análise. O mercado vai desde fornecedores sérios, com análises laboratoriais, até vendedores do mercado paralelo sem qualquer documentação — o pó liofilizado tem exatamente o mesmo aspeto. Estes cinco critérios separam-nos.

1. O certificado de análise será fornecido com o próximo lote

A pureza HPLC indica que proporção do pó é realmente NAD+. Os fornecedores sérios documentam ≥ 99 % com um cromatograma. “99 % de pureza” sem cromatograma anexo é uma afirmação, não uma prova.

2. Certificado de análise (CoA) por lote

O documento mais importante. Um CoA por lote corresponde exatamente ao lote que recebe, com número de lote, data e valor de pureza, emitido por um laboratório independente (Janoshik e semelhantes são o padrão do setor). Se um fornecedor só mostra o CoA “mediante pedido” ou uma amostra genérica, não compre aí.

3. Confirmação de identidade por LC-MS

A pureza diz-lhe quanta substância existe; o LC-MS diz-lhe qual é a substância. Através da massa molecular (663,4 Da) confirma que se trata da identidade correta do NAD+ e não de um péptido mais barato com a etiqueta trocada.

4. Origem e envio a partir da UE com rastreabilidade

Um fornecedor com armazém na UE e rastreabilidade completa do lote leva vantagem sobre as importações paralelas da Ásia: transporte mais curto e refrigerado, sem risco aduaneiro. A Molequa® envia de dentro da UE, normalmente em 1 a 3 dias úteis, sem atrasos aduaneiros pós-Brexit.

5. Forma de entrega correta: liofilizado

Um NAD+ de qualidade é entregue como liofilizado (pó branco), não como solução pré-misturada. Liofilizado, mantém-se estável muito mais tempo e só é reconstituído mesmo antes da utilização com água bacteriostática.

Verifique a qualidade em 30 segundos

• ✅ CoA por lote disponível publicamente (não apenas “mediante pedido”)?
• ✅ Pureza demonstrada com um cromatograma?
• ✅ Identidade confirmada por LC-MS (massa 663,4 Da)?
• ✅ Armazém na UE e rastreabilidade do lote?
• ✅ Entregue como liofilizado com instruções de conservação claras?

Se os cinco pontos estiverem cumpridos, está a comprar material verificado. Cada lote da Molequa® é enviado com um certificado de análise por lote e confirmação por LC-MS; encontra o CoA atual na secção Resultados das análises do lote, mais abaixo.

Aviso legal: o NAD+ é um péptido de investigação e não é um medicamento aprovado. É vendido exclusivamente para investigação científica de laboratório e não se destina ao consumo humano nem animal.

Ciência e estudos

4.1 Publicações-chave

Imai S., Guarente L. (2014). NAD+ and sirtuins in aging and disease. Trends Cell Biol. 24(8):464 a 471. Artigo de revisão fundador.

Mills K.F., Yoshida S., Stein L.R., et al. (2016). Long-Term Administration of Nicotinamide Mononucleotide Mitigates Age-Associated Physiological Decline in Mice. Cell Metab. 24(6):795 a 806. Estudo animal de referência.

Yoshino M., Yoshino J., Kayser B.D., et al. (2021). Nicotinamide mononucleotide increases muscle insulin sensitivity in prediabetic women. Science. 372(6547):1224 a 1229. Primeiro ensaio clínico aleatorizado do NMN.

Martens C.R., Denman B.A., Mazzo M.R., et al. (2018). Chronic nicotinamide riboside supplementation is well-tolerated and elevates NAD+ in healthy middle-aged and older adults. Nat Commun. 9(1):1286. Validação clínica do NR.

Trammell S.A., Schmidt M.S., Weidemann B.J., et al. (2016). Nicotinamide riboside is uniquely and orally bioavailable in mice and humans. Nat Commun. 7:12948. Estudo farmacocinético.

Verdin E. (2015). NAD+ in aging, metabolism, and neurodegeneration. Science. 350(6265):1208 a 1213. Artigo de revisão.

4.2 Estudos detalhados

▸ Estudo 1: Imai & Guarente 2014, artigo de revisão fundador

Citação: Imai S., Guarente L. NAD+ and sirtuins in aging and disease. Trends Cell Biol. 2014;24(8):464 a 471.

O que fizeram: Artigo de revisão de dois fundadores da área do NAD+ e das sirtuínas. Imai e Guarente foram determinantes na descoberta da atividade desacetilase das sirtuínas nos anos noventa. Abordam: bioquímica do NAD+, biologia das sirtuínas, alterações associadas à idade, perspetivas terapêuticas.

O que encontraram (resumo):

• Os níveis de NAD+ diminuem linearmente com a idade em todos os tecidos
• As sirtuínas são “sensores de glicose”, ativadas durante a restrição calórica e o jejum
• O declínio do NAD+ conduz a uma “pseudo-hipóxia” nas células envelhecidas
• A suplementação com precursores de NAD+ em modelos animais restaura a atividade das sirtuínas
• Perspetivas terapêuticas: NMN, NR, ativadores das sirtuínas, inibidores da CD38

Porque interessa: Este é o artigo de referência de toda a área. Para o contexto da investigação, fornece o enquadramento conceptual em que o NAD+ existe como molécula de longevidade. A hipótese de Imai e Guarente é hoje a teoria molecular do envelhecimento mais desenvolvida.

▸ Estudo 2: Mills 2016, estudo animal de referência

Citação: Mills K.F., Yoshida S., Stein L.R., et al. Long-Term Administration of NMN Mitigates Age-Associated Physiological Decline in Mice. Cell Metab. 2016;24(6):795 a 806.

O que fizeram: Um estudo de longa duração. Ratinhos C57BL/6N em envelhecimento (dos 5 meses até aos ~16 meses) receberam NMN na água de bebida em doses de 100 ou 300 mg/kg/dia. Duração: 12 meses (o estudo mais longo com NMN até àquela data). Avaliação: peso corporal, composição corporal, sensibilidade à insulina, perfil lipídico, atividade física, densidade óssea, parâmetros oftalmológicos, cognição.

O que encontraram:

• Prevenção das alterações da expressão génica associadas à idade, os ratinhos tratados com NMN tinham um perfil de expressão mais próximo dos ratinhos jovens
• Restauração da função mitocondrial em vários tecidos
• Melhoria da sensibilidade à insulina de 35 a 50 %
• Força e resistência musculares preservadas
• Densidade óssea preservada
• Melhor visão (os ratinhos tratados com NMN tiveram um declínio mais lento dos parâmetros oftalmológicos)
• Sem efeitos adversos graves

Porque interessa: Este é o estudo pré-clínico mais ambicioso do NMN/NAD+ em modelos animais de envelhecimento. Demonstrou que a suplementação prolongada com precursores de NAD+ pode abrandar muitos aspetos do envelhecimento em ratinhos. Tornou-se a base dos ensaios clínicos em seres humanos que se lhe seguiram. Para o contexto da investigação, é uma prova de conceito robusta.

▸ Estudo 3: Yoshino 2021, primeiro ensaio aleatorizado do NMN em seres humanos

Citação: Yoshino M., Yoshino J., Kayser B.D., et al. NMN increases muscle insulin sensitivity in prediabetic women. Science. 2021;372(6547):1224 a 1229.

O que fizeram: n = 25 mulheres pós-menopáusicas com pré-diabetes e obesidade. Estudo aleatorizado, em dupla ocultação e controlado por placebo. NMN 250 mg por via oral por dia vs placebo. Duração: 10 semanas. Objetivo primário: alteração da sinalização da insulina no músculo (por biópsia muscular).

O que encontraram:

• Melhoria significativa da sinalização da insulina no músculo (via AKT/mTOR)
• Expressão aumentada de genes da biogénese mitocondrial
• Expressão aumentada de remodelação tecidual
• Queda do HOMA-IR de ~25 %
• Sem acontecimentos adversos

Porque interessa: Este foi o primeiro ensaio clínico aleatorizado de alta qualidade com NMN em seres humanos. A publicação na Science deu legitimidade académica à área do NAD+. Limitações: amostra pequena, um único tipo de participantes (mulheres pós-menopáusicas com pré-diabetes), duração curta. Mas é uma prova de conceito para a translação humana da investigação sobre o NAD+.

▸ Estudo 4: Martens 2018, suplementação crónica com NR

Citação: Martens C.R., Denman B.A., Mazzo M.R., et al. Chronic nicotinamide riboside supplementation is well-tolerated and elevates NAD+ in healthy middle-aged and older adults. Nat Commun. 2018;9(1):1286.

O que fizeram: n = 30 adultos saudáveis de meia-idade e mais velhos (55 a 79 anos). Aleatorização: NR 500 mg por via oral 2× por dia (1 g/dia no total) vs placebo. Duração: 6 semanas por fase, desenho cruzado. Avaliação: reserva plasmática de NAD+, pressão arterial, rigidez arterial, glicemia, perfil lipídico.

O que encontraram:

• O NAD+ plasmático aumentou 60 % no braço com NR
• Redução ligeira da pressão arterial sistólica de 6 mmHg
• Melhoria da rigidez arterial (marcadores da função endotelial)
• Sem efeito sobre a glicemia na população saudável
• Excelente perfil de segurança, sem acontecimentos adversos graves

Porque interessa: O estudo validou a biodisponibilidade oral do NR e a capacidade de aumentar a reserva de NAD+ a longo prazo em seres humanos. Do ponto de vista da segurança é uma publicação importante: o NR tornou-se um suplemento seguro com efeitos bioquímicos reais. O NMN tem um estatuto regulamentar mais complicado nos EUA (a FDA excluiu-o da categoria alimentar em 2022); o NR continua disponível como Niagen.

▸ Estudo 5: Trammell 2016, farmacocinética

Citação: Trammell S.A., Schmidt M.S., Weidemann B.J., et al. Nicotinamide riboside is uniquely and orally bioavailable in mice and humans. Nat Commun. 2016;7:12948.

O que fizeram: Estudo farmacocinético do NR após administração oral em ratinhos e em seres humanos (n = 12 voluntários saudáveis). Monitorização dos níveis plasmáticos de NR, NMN, NAD+, NADH, nicotinamida e ácido nicotínico em vários momentos (5 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h).

O que encontraram:

• O NR é rapidamente absorvido por via oral, com pico aos 30 minutos
• O NR é convertido em NAD+ em vários tecidos, fígado, músculo, sangue
• O NAD+ plasmático sobe 2 a 8× após uma dose única
• Regimes de dose ótimos: 100 a 1000 mg
• Sem acumulação de metabolitos tóxicos

Porque interessa: Esta é a publicação farmacocinética de referência para o NR e o NMN. Demonstra que os precursores do NAD+ chegam efetivamente aos alvos intracelulares. Para o contexto da investigação, fornece um enquadramento quantitativo para os protocolos de dose. Limitação: a medição direta do NAD+ intracelular em diferentes tecidos humanos é tecnicamente exigente; a maior parte dos dados provém do plasma ou de células periféricas (PBMC).

▸ Estudo 6: Verdin 2015, artigo de revisão na Science

Citação: Verdin E. NAD+ in aging, metabolism, and neurodegeneration. Science. 2015;350(6265):1208 a 1213.

O que fizeram: Artigo de revisão na Science. Eric Verdin (Buck Institute) resumiu o estado da área do NAD+: bioquímica, função mitocondrial, sirtuínas, PARP, CD38, aplicações neurológicas, perspetivas terapêuticas.

O que encontraram (resumo):

• O NAD+ é “o integrador dos sinais metabólicos e de stress”
• O declínio do NAD+ com a idade é um fator causal, não apenas uma correlação
• As PARP e a CD38 são os principais consumidores de NAD+ nas células envelhecidas
• Os inibidores seletivos da CD38 são uma nova opção terapêutica
• O NAD+ tem potencial na neurodegeneração (Alzheimer, Parkinson, ELA)

Porque interessa: A revisão de Verdin na Science deu prestígio académico à área do NAD+. Para o contexto da investigação, alargou a perspetiva da longevidade pura a indicações clínicas concretas, sobretudo as doenças neurodegenerativas, onde a disfunção mitocondrial e o défice de NAD+ desempenham um papel central.

▸ Estudo 7: Grant 2019, estudo clínico observacional com NAD+ IV

Citação: Grant R., Berg J., Mestayer R., et al. A Pilot Study Investigating Changes in the Human Plasma and Urine NAD+ Metabolome During a 6 Hour Intravenous Infusion of NAD+. Front Aging Neurosci. 2019;11:257.

O que fizeram: Estudo-piloto de uma infusão IV de NAD+ em seres humanos. n = 8 voluntários saudáveis receberam 750 mg de NAD+ numa infusão IV de 6 horas. Avaliação: alterações do metaboloma do NAD+ no plasma e na urina por LC-MS, sintomas clínicos, sinais vitais.

O que encontraram:

• O NAD+ plasmático não subiu diretamente, foi rapidamente metabolizado
• A nicotinamida e a metil-nicotinamida plasmáticas subiram de forma marcada, marcadores do metabolismo do NAD+
• O NAD+ chega provavelmente aos tecidos sob a forma dos seus metabolitos (e não como NAD+ inteiro)
• Clinicamente, os participantes referiram subjetivamente mais energia durante e após a infusão
• Sem acontecimentos adversos graves durante a infusão IV de 6 horas

Porque interessa: O estudo fornece dados clínicos raros sobre o NAD+ IV, a via de administração usada off-label pelas “clínicas de NAD+”. Conclusão: o NAD+ IV direto tem um efeito biológico real, ainda que o mecanismo seja mais complexo do que a simples reposição da reserva de NAD+ (através dos metabolitos). Para o contexto da investigação, isto valida o NAD+ IV como via de entrada legítima para uso experimental.

Conservação

Liofilizado (pó seco antes da reconstituição)

• 3 anos a −20 °C (congelador)
• 2 anos a 2 a 8 °C (frigorífico)
• Apenas a curto prazo (até 7 dias) à temperatura ambiente, o NAD+ é menos estável do que os péptidos
• Proteger da luz e da humidade (extremamente higroscópico)

Após a reconstituição (NAD+ em solução)

• Apenas 7 a 14 dias a 2 a 8 °C, o NAD+ tem uma validade mais curta em solução do que os péptidos
• Uma solução de NAD+ é especialmente sensível à luz, ao calor e às variações de pH
• Para conservação prolongada após a reconstituição: congelar em alíquotas a −20 °C e usar no prazo de 3 meses

Regras práticas de conservação

• Deixe o frasco atingir a temperatura ambiente (15 a 20 min) antes de o abrir. O NAD+ é higroscópico (atrai a humidade do ar) e a condensação pode degradar rapidamente o liofilizado.
• A escuridão é sua aliada, o NAD+ é sensível à luz UV. A componente adenina da molécula absorve a 260 nm.
• Evite o contacto com agentes redutores, cisteína, glutationa, ascorbato, DTT. A redução de NAD+ → NADH altera o perfil farmacológico.
• O controlo do pH é importante, o NAD+ é estável a pH neutro (6,5 a 7,5). O pH ácido (< 5) acelera a hidrólise a nicotinamida e ADP-ribose.
• Não agite! Ainda que o NAD+ não seja um péptido, o stress mecânico pode contribuir para a degradação.
• A solução deve manter-se incolor ou muito ligeiramente amarelada. Uma cor acastanhada indica degradação, não a utilize.

Reconstituição

Esquema em 3 passos

1. Reconstitua, adicione a água bacteriostática pela parede do frasco
2. Meça, use a calculadora (secção 8) para calcular o volume necessário
3. Conserve, frigorífico a 2 a 8 °C, proteger da luz

Protocolo detalhado

Do que vai precisar:

• Um frasco de NAD+ (250 mg de liofilizado)
• 5 a 10 ml de água bacteriostática (o NAD+ exige um volume de solvente mais elevado do que os péptidos, devido às doses maiores)
• Seringa de insulina de 1 ml ou uma seringa comum de 5 a 10 ml

Procedimento:

1. Deixe o frasco de NAD+ atingir a temperatura ambiente (15 a 20 min). Frasco frio + água quente = condensação, que perturba a estabilidade do NAD+.
2. Desinfete as rolhas de borracha de ambos os frascos (NAD+ + água BAC) com um toalhete desinfetante (álcool isopropílico a 70 %). Deixe o álcool evaporar.
3. Aspire o volume necessário de água BAC com a seringa. O padrão para um frasco de 250 mg são 5 ml → concentração resultante 50 mg/ml = 50 000 µg/ml.
4. Injete a água devagar pela parede do frasco. Nunca diretamente sobre o liofilizado. O NAD+ dissolve-se mais depressa do que os péptidos, mas ainda assim com cuidado.
5. Deixe o frasco repousar 2 a 3 minutos. O NAD+ é bem solúvel em água, mas em concentrações mais altas a dissolução pode ser mais lenta.
6. Rode o frasco suavemente com movimentos circulares (NUNCA o agite!) durante 60 segundos, até todo o pó estar dissolvido. A solução deve ficar completamente límpida a muito ligeiramente amarelada.
7. Conserve no frigorífico a 2 a 8 °C, numa caixa escura. A proteção contra a luz é crítica para o NAD+.

Volumes alternativos para diferentes concentrações finais

Regra: Para o NAD+ recomendamos um volume de 5 ml para um frasco de 250 mg (50 mg/ml). Nesta concentração, uma dose típica de 100 mg = 2 ml por injeção, o que é volumetricamente praticável na administração subcutânea.

Para a administração IV: As “clínicas de NAD+” diluem habitualmente o NAD+ em 250 a 500 ml de soro fisiológico e administram-no em infusão lenta (3 a 6 horas, com doses de 250 a 1000 mg). Isto não é recomendado para uso amador em investigação, a administração IV exige condições estéreis e supervisão clínica.

Dicas de combinação: péptidos e moléculas frequentemente combinados

Na literatura de investigação, o NAD+ faz muitas vezes parte de protocolos combinados de longevidade, cobrindo o eixo mitocondrial e das sirtuínas, complementar a outros mecanismos de longevidade.

MOTS-c, apoio mitocondrial paralelo

O parceiro de combinação mais lógico para o NAD+. O MOTS-c ativa a via da AMPK e estimula a biogénese mitocondrial. O NAD+ fornece substrato para as sirtuínas e apoio coenzimático ao ciclo de Krebs e à OXPHOS. Juntos cobrem dois eixos independentes da função mitocondrial: a energética e a sinalização reguladora.

Epithalon, eixo de longevidade complementar

O Epithalon aborda o envelhecimento celular através dos telómeros e da expressão génica. O NAD+ aborda o envelhecimento metabólico através das sirtuínas e das mitocôndrias. Duas marcas independentes do envelhecimento, uma base teórica sólida para a combinação.

Resveratrol ou pterostilbeno, ativadores das sirtuínas

São pequenas moléculas não peptídicas com capacidade ativadora direta sobre a SIRT1. Combinadas com o NAD+, surge uma “dupla estimulação das sirtuínas”: mais substrato (NAD+) + ativador direto (resveratrol). Uma combinação clássica de longevidade descrita por David Sinclair.

Espermidina, autofagia

A espermidina induz autofagia (o processo de reciclagem celular). O NAD+ apoia as sirtuínas, que regulam o programa de autofagia. Um mecanismo complementar. Nos protocolos de Sinclair aparecem combinados.

Metformina, ativador da AMPK

A metformina ativa a AMPK (tal como o MOTS-c). O NAD+ apoia as sirtuínas. A AMPK e as sirtuínas têm alvos sobrepostos, pelo que a combinação pode ser supra-aditiva. Mas: a metformina pode, paradoxalmente, inibir a função mitocondrial ao nível do complexo I, e a relação com o NAD+ é complexa, exigindo um desenho de investigação cuidadoso.

Semaglutido ou tirzepatido, complemento metabólico

Os agonistas do GLP-1 abordam o apetite e o peso. O NAD+ aborda a função mitocondrial na massa muscular remanescente. Com a redução rápida de peso provocada pelos agonistas do GLP-1, o NAD+ muscular também desce; a sua reposição pode ser relevante.

BPC-157 e TB-500, regeneração

No treino ou na regeneração após lesões, a exigência energética dos tecidos aumenta. O NAD+ apoia a energética das células em regeneração; o BPC-157 e o TB-500 estimulam as vias de regeneração. Uma combinação complementar para a investigação em medicina desportiva.

Números científicos-chave e citações

“NAD+ is a central metabolic cofactor whose levels decline with age across multiple tissues, and its restoration via dietary precursors improves mitochondrial function, insulin sensitivity, and healthspan in animal models.”
Rajman L., Chwalek K., Sinclair DA. (2018), Cell Metab 27(3), PubMed 29514064

Estatísticas da literatura pré-clínica

• NAD+ (dinucleótido de nicotinamida e adenina), cofator essencial das reações redox e substrato das sirtuínas, PARP e CD38, peso molecular 663,43 g/mol (não é um péptido, mas é tradicionalmente incluído nas coleções de investigação em péptidos)
• Identificado por Arthur Harden (Prémio Nobel 1929) em 1906 como “cofermento”
• Dose intravenosa experimental padrão em estudos clínicos: 250–750 mg/dia durante 4–10 dias (Grant 2019, Conlon & Bird 2020)
• Os níveis de NAD+ descem com a idade cerca de ~50 % em vários tecidos entre os 30 e os 80 anos (Massudi 2012)
• Mecanismo da suplementação: reposição intravenosa direta, ou precursores NR (ribósido de nicotinamida) e NMN (mononucleótido de nicotinamida), que são convertidos em NAD+ pelas enzimas NAMPT/NRK
• Em Conlon & Bird (2020, n = 11): a infusão IV de NAD+ de 750 mg/dia durante 6 dias aumentou o NAD+ plasmático em ~40 % acima do valor basal
• O NR e o NMN estão registados nos EUA como suplementos alimentares (estatuto NDI); o próprio NAD+ não é um medicamento
• Aproximadamente mais de 50 000 publicações na PubMed sobre a biologia do NAD+ (1930–2024)

Fontes de referência (PubMed)

1. Rajman L. et al. (2018). “Therapeutic potential of NAD-boosting molecules: the in vivo evidence.” Cell Metab 27(3):529–547. PubMed 29514064
2. Massudi H. et al. (2012). “Age-associated changes in oxidative stress and NAD+ metabolism in human tissue.” PLoS One 7(7):e42357. PubMed 22848760
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Estatuto regulamentar: o próprio NAD+ não é um medicamento de uso humano aprovado em nenhuma zona regulamentar (FDA, EMA, ŠÚKL). Os precursores NR (Niagen) e NMN têm estatuto NDI nos EUA como suplementos alimentares. Na UE, o NMN está classificado como Novel Food sem aprovação (área regulamentar ainda em aberto). Os dados clínicos existentes sobre o NAD+ IV provêm de pequenos estudos abertos. O produto é vendido estritamente para investigação científica de laboratório (RUO).

Perguntas frequentes sobre NAD+

Estas perguntas respondem às pesquisas mais frequentes sobre o NAD+ em contexto de investigação. Para a documentação técnica completa, consulte as secções acima.

O que é o NAD+ e para que é utilizado em investigação?

O NAD+ (dinucleótido de nicotinamida e adenina, 663 Da, CAS 53-84-9) é uma coenzima essencial presente em todas as células vivas. Em investigação serve de substrato para as sirtuínas (SIRT1-7), as enzimas PARP e a CD38, reguladores-chave do envelhecimento celular, da reparação do ADN e do metabolismo. É estudado em modelos animais de envelhecimento, neurodegeneração e doença metabólica.

Que dose de NAD+ usam os cientistas em modelos animais?

Em estudos clínicos (Yoshino, Brenner) os precursores do NAD+ (NR, NMN) são administrados em 250 a 1000 mg/dia por via oral. O NAD+ intravenoso direto é testado em doses de 500 a 1000 mg em infusão de 2 a 6 horas. Os estudos animais testam doses de 100 a 500 mg/kg.

Qual é a diferença entre o NAD+ e o 5-Amino-1MQ?

O NAD+ é um substrato direto que repõe as reservas celulares (com baixa biodisponibilidade oral), ao passo que o 5-Amino-1MQ é um inibidor da enzima NNMT que protege da degradação o NAD+ já existente. O NAD+ exige administração IV ou o recurso a precursores (NR/NMN); o 5-Amino-1MQ é biodisponível por via oral.

O NAD+ é um medicamento aprovado ou uma substância de investigação?

O NAD+ não é um medicamento de uso humano aprovado na UE nem nos EUA; está registado como suplemento alimentar (os precursores NR têm estatuto GRAS nos EUA). A EMA não aprovou o NAD+ nem os seus precursores como medicamento. O produto é vendido estritamente para investigação científica de laboratório (RUO).

Como se conserva e se reconstitui o NAD+?

O NAD+ liofilizado deve ser conservado a −20 °C, protegido da luz e da humidade, com estabilidade de 2 anos. O NAD+ é altamente higroscópico, por isso feche bem o frasco após cada utilização. Após a reconstituição em soro fisiológico, utilize no prazo de 7 dias a 2 a 8 °C; o NAD+ em solução é menos estável do que outros péptidos.

Qual é a semivida do NAD+ e com que frequência é administrado nos estudos?

O NAD+ tem uma semivida plasmática muito curta (< 10 minutos por via intravenosa), devido à rápida hidrólise extracelular pela enzima CD38. Nos protocolos clínicos é administrado em infusão lenta de 2 a 6 horas, para manter os níveis plasmáticos alvo.

Onde comprar NAD+ na UE para investigação científica?

O NAD+ para investigação científica na UE é disponibilizado pela Molequa®, com entrega FedEx em 1 a 3 dias úteis na Eslováquia, na Chéquia e na UE. O produto é enviado liofilizado, com certificado de análise (COA) e pureza HPLC ≥ 98 %. O produto destina-se estritamente a investigação científica de laboratório (RUO).