Kisspeptin-10

Общ преглед

Kisspeptin-10, KP-10, метастин 45-54: едно и също вещество

Съществува риск от смесване с киспептин-54, по-дългият фрагмент от същите изследвания. И двата са активни; предлаганият тук материал е формата от десет аминокиселини.

Произход и защо е разработен

Историята на киспептина започва на неочаквано място. През 1996 г. група в Хърши, Пенсилвания, описва ген, който потиска метастазирането на меланомни клетки. Наричат го KISS1, а продукта на гена метастин.

Едва през 2003 г. става ясно, че истинското значение е другаде. Две независими групи, Семинара в Бостън и дьо Ру в Париж, изследват семейства с липсващ пубертет и и двете откриват един и същ генетичен дефект: неактивен рецептор, GPR54. Съответният лиганд се оказва киспептинът.

С това е идентифициран дотогава непознат надреден превключвател на репродуктивната ос. В публикуваните модели киспептинът действа над GnRH, което го прави един от малкото случаи, в които ендокринологията открива изцяло ново регулаторно ниво.

Механизъм на действие според литературата

Активиране на GPR54. Kisspeptin-10 се свързва със свързания с G-белтък рецептор GPR54 върху GnRH невроните в хипоталамуса. Описаната последица е освобождаване на GnRH, което на свой ред задейства секрецията на LH и FSH от хипофизата.

Пулсативност. Литературата подчертава, че сигнализирането е пулсативно. В публикуваните модели непрекъснатата експозиция води до десенсибилизация на рецептора, познат модел от други оси в ендокринологията.

Състояние на изследванията през 2026 г.

Киспептинът е сред най-добре проучените пептиди в този списък. Съществуват изследвания върху хора за освобождаването на гонадотропини, например от Дило и сътрудници, както и обширна фундаментална литература за регулацията на пубертета.

В изследванията веществото се разглежда, наред с другото, като диагностичен инструмент за функцията на оста хипоталамус-хипофиза. Разрешение като лекарствен продукт не съществува.

От раков ген до регулатор на пубертета

Историята на киспептина е сред най-неочакваните в новата ендокринология и обяснява името му.

През 1996 г. група в Пенсилвания търси гени, потискащи метастазирането при меланом. Открива един и го нарича KiSS-1. Алюзията е местна: Hershey Kisses се произвеждат в Хърши, Пенсилвания. Пептидът значи носи името си заради лакомство, а не заради размножаването.

Пет години KiSS-1 остава ген, потискащ метастазите. После, през 2001 г., групата на Отаки показва, че генът всъщност кодира лиганда на един дотогава сирачески свързан с G-белтък рецептор, GPR54, оттогава наричан KISS1R.

Обратът идва през 2003 г. Семинара и сътрудници описват в New England Journal of Medicine семейства с инактивиращи мутации в GPR54. Тези пациенти имат хипогонадотропен хипогонадизъм, тоест липсващ пубертет. Ген, изследван за онкологията, се оказва ключова точка на половото развитие.

Точното място в оста хипоталамус-хипофиза-гонади

Това е точката, която повечето изложения пропускат, а тя определя всичко останало.

Киспептинът не действа върху гонадите. Действа по-нагоре, върху GnRH невроните на хипоталамуса, които експресират KISS1R. Описаната каскада протича така:

1. Киспептинергичните неврони, между другото в нуклеус аркуатус, освобождават пептида.
2. Киспептинът се свързва с KISS1R върху GnRH невроните.
3. Тези неврони освобождават GnRH пулсативно.
4. Хипофизата отговаря със секреция на LH и FSH.
5. Гонадите реагират на LH и FSH.

Практическата последица е съществена: киспептинът стои в началото на каскадата, там където физиологичната регулация остава непокътната. Това го отличава от екзогенното приложение на гонадотропини, което прескача контролните стъпала.

Kisspeptin-10 в сравнение с по-дългите форми

Генът KISS1 кодира прекурсор от 145 аминокиселини, който се разцепва на няколко активни фрагмента. Означението следва просто дължината.

Всички споделят един и същ C-краен участък, който носи активността върху рецептора. Kisspeptin-10 е най-късият фрагмент с пълен афинитет към KISS1R.

В публикуваните работи късите форми имат по-кратък полуживот от киспептин-54, което има преки последици за дизайна на експерименталния протокол.

Документирани изследователски полета

• Репродуктивна невроендокринология. Доминиращото поле с голяма преднина. Контрол на пубертета, пулсативност на GnRH, сезонна регулация при животински модели.
• Онкология. Историческата функция като супресор на метастазите остава активна тема, отделна от репродуктивната функция.
• Метаболизъм. По-нови работи описват ефекти върху ентероендокринни клетки и панкреасни острови при миши модели.
• Аквакултура и животновъдство. Употребата при рибни модели за фоликулно узряване е активно поле, обикновено пренебрегвано в изложенията, съсредоточени върху човека.

Регулаторно класифициране

Kisspeptin-10 не е разрешен като лекарствен продукт в нито една юрисдикция. За въпроси, свързани с лекарствата в България, е компетентна ИАЛ.

Купуване на kisspeptin-10: на какво да обърнете внимание

При купуване на kisspeptin-10 не решава цената, а проверимостта на качеството. Един изследователски пептид винаги струва толкова, колкото струва неговият сертификат за анализ. Тези пет критерия разделят сериозните доставчици от продавачите от сивия пазар, защото отвън лиофилизираният прах изглежда точно по същия начин.

1. HPLC чистота, документирана а не твърдяна

HPLC чистотата казва каква част от праха действително е kisspeptin-10, а не страничен продукт от синтеза. Сериозните доставчици документират стойността с хроматограма. Число за чистота без приложена хроматограма е твърдение, а не доказателство.

2. Сертификат за анализ към партида (CoA)

Най-важният документ. партиден CoA принадлежи точно на партидата, която получавате: с номер на партида, дата на анализа и стойност на чистотата, издаден от независима лаборатория. Практическо правило: ако доставчикът не може веднага да покаже CoA за конкретната партида, не купувайте там.

3. Потвърждение на идентичността чрез LC-MS

Чистотата казва колко от едно вещество е налично. LC-MS казва кое е веществото. Чрез молекулната маса се потвърждава правилната идентичност и се изключва изпращането на по-евтин, погрешно етикетиран материал.

4. Произход и изпращане от ЕС с проследимост

Доставчик със склад в ЕС и пълна проследимост по партиди има предимство пред паралелния внос: по-къси транспортни маршрути, без митнически риск, документиран път от синтеза до флакона.

5. Правилна форма на доставка: лиофилизат

Качественият материал се доставя като лиофилизат, изсушен чрез замразяване прах, а не като готов разтвор. В суха форма веществото е значително по-стабилно и се реконституира едва непосредствено преди употреба.

Правно указание: Kisspeptin-10 е изследователски материал и не е разрешен лекарствен продукт. Доставя се изключително за научни изследвания в лаборатория и не е предназначен за консумация от хора или животни. Одобрено терапевтично приложение не съществува.

Наука и изследвания

Централни публикации

Lee J.H., Miele M.E., Hicks D.J., Phillips K.K., Trent J.M., Weissman B.E., Welch D.R. (1996). KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst. 88(23):1731 до 1737. PubMed 8944003 Откриването на гена, пет години преди някой да го свърже с размножаването.

Ohtaki T., Shintani Y., Honda S. et al. (2001). Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature. 411(6837):613 до 617. PubMed 11385580 Свързването на лиганд и рецептор. Повратната точка на цялата история.

Seminara S.B., Messager S., Chatzidaki E.E. et al. (2003). The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med. 349(17):1614 до 1627. PubMed 14573733 Публикацията, която направи киспептина тема на ендокринологията. Човешка генетика, а не животински модел.

Thompson E.L., Patterson M., Murphy K.G. et al. (2004). Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol. 16(10):850 до 858. PubMed 15500545 Работата, която се занимава изрично с приложения kisspeptin-10, а не с гена.

Colledge W.H. (2004). GPR54 and puberty. Trends Endocrinol Metab. 15(9):448 до 453. PubMed 15519892 Съвременен обзор на находките от 2003 г., полезен за общата картина.

Изследванията в детайли

▸ Изследване 1: откриването на гена

Цитат: Lee J.H. et al. KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst, 1996. PubMed 8944003

Какво са направили: групата търси гени, потискащи метастазите, и работи с клетъчни хибриди от меланом, класически подход на соматичната генетика.

Какво са открили: ген, чиято експресия намалява метастатичната способност на меланомните клетки, означен като KiSS-1.

Защо това е важно: защото описаната тук функция няма нищо общо с размножаването. Това е полезно напомняне, че един пептид може да има няколко биологични роли без разпознаваема връзка и че онкологичното поле на киспептина продължава да съществува.

▸ Изследване 2: лигандът и неговият рецептор

Цитат: Ohtaki T. et al. Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature, 2001. PubMed 11385580

Какво са направили: стратегия за деорфанизиране. GPR54 е свързан с G-белтък рецептор, чийто естествен лиганд е неизвестен. Групата търси ендогенната молекула, която го активира.

Какво са открили: продуктът на гена KiSS-1 се свързва с висок афинитет с GPR54. C-крайният фрагмент е достатъчен за активирането, което обосновава самото съществуване на kisspeptin-10.

Защо това е важно: тази статия е причината kisspeptin-10 изобщо да бъде релевантен. Без нея не би се знаело, че C-крайният декапептид е действащата част.

▸ Изследване 3: доказателството при човека

Цитат: Seminara S.B. et al. The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med, 2003. PubMed 14573733

Какво са направили: генетично изследване на родствено свързани семейства, в които няколко членове имат идиопатичен хипогонадотропен хипогонадизъм, тоест липсващ пубертет без разпознаваема анатомична причина.

Какво са открили: инактивиращи мутации в GPR54 при засегнатите, със сегрегация, съответстваща на фенотипа.

Защо това е важно: това е доказателство при човека, дадено от генетиката, а не от приложението на вещество. Загубата на функция на рецептора блокира пубертета. Това ниво на доказателственост стои ясно над средното за пептидното поле.

▸ Изследване 4: приложението на декапептида

Цитат: Thompson E.L. et al. Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol, 2004. PubMed 15500545

Какво са направили: приложение на kisspeptin-10 по два отделни пътя, централен и периферен, в животински модел, с измерване на гонадотропините.

Какво са открили: стимулиране на оста по двата пътя, с покачване на LH. Че периферният път работи, беше забележителният резултат, тъй като за пептид, действащ върху хипоталамични неврони, това не беше гарантирано.

Защо това е важно: това е най-пряко относимата работа за протокол с kisspeptin-10, за разлика от изследванията върху гена или рецептора.

Съхранение

Съхранявайте лиофилизирания прах при 2 до 8 °C защитен от светлина, за дълготрайно съхранение при −20 °C. В суха форма веществото остава стабилно години наред. След реконституцията разтворът трябва да отиде в хладилник, защитен от светлина, и според литературата да се използва в рамките на 28 дни. Избягвайте многократно замразяване и размразяване, което разгражда пептидите по измерим начин.

Реконституция

Оставете първо лиофилизата и бактериостатичната вода да достигнат стайна температура. Оставете разтворителя да се стече бавно по вътрешната стена на флакона, наклонен под 45°, никога не го инжектирайте директно върху праха. Не разклащайте, а въртете внимателно, докато всичко се разтвори. Образуването на пяна показва денатурация.

Точният обем за вашата целева концентрация се изчислява с калкулатора за пептиди. Подходящ разтворител е бактериостатичната вода с 0,9 % бензилов алкохол, която позволява вземане на проби в продължение на няколко седмици след първото пробиване.

Обеми за различни крайни концентрации

Една специфична за kisspeptin-10 бележка

Kisspeptin-10 е къс декапептид без стабилизираща модификация. От това следват две практически последици.

Първо, описаният за късите форми полуживот е кратък в сравнение с киспептин-54. Протокол, проектиран за дългата форма, не може да се пренесе без промени.

Второ, както при всеки къс немодифициран пептид, повтарящите се цикли на замразяване и размразяване са най-важният фактор на разграждане, който може да бъде избегнат. Разделянето на аликвоти за еднократна употреба веднага след реконституцията решава проблема веднъж завинаги.

Реконституираният разтвор остава бистър. Всяка мътност или видима утайка сочи проблем с разтворителя или със съхранението и разтворът не бива да се използва за количествена работа.

Предварителна поръчка

Kisspeptin-10 в момента се предлага чрез предварителна поръчка. Резервирате желаното количество без ангажимент, а ние потвърждаваме партидата и срока на доставка по имейл. При резервацията не се плаща нищо.

Съвети за комбиниране: вещества от същото поле

Kisspeptin-10 заема особено положение: действа в началото на една ендокринна каскада. Смислените препратки в изследванията затова са предимно сравнения, а не потенцирания.

Гонадотропини и GnRH

В публикуваните протоколи киспептинът по-често се сравнява с GnRH, отколкото да се комбинира с него. Логиката е ясна: и двата действат в една и съща каскада на различни нива, а едновременното приложение затруднява оценката.

Метаболитни пептиди

По-новите работи върху ентероендокринни клетки и панкреасни острови преместват киспептина в метаболитно поле, далеч от историческото му репродуктивно поле. Препратките към агонисти на GLP-1 рецептора принадлежат на това поле, което е младо и чиято база от данни остава ограничена.

Методологична бележка

Комбинирането на няколко пептида, действащи в една и съща ос, почти винаги прави резултата невъзможен за оценяване. За киспептина, чийто интерес се крие именно в положението му нагоре по каскадата, това важи в особена степен.

Ключови научни числа и цитати

„Мутациите в гена GPR54 се асоциират с идиопатичен хипогонадотропен хипогонадизъм, което посочва този сигнален път като регулатор на пубертета.” Според Seminara S.B. et al. (2003), New England Journal of Medicine 349(17):1614 до 1627 PubMed 14573733

Основни данни от литературата

• Откриване на гена KiSS-1: 1996 г., Лий и сътрудници, в полето на меланома
• Идентифициране на лиганда на GPR54: 2001 г., Отаки и сътрудници, Nature
• Доказателство за ролята при човешкия пубертет: 2003 г., Семинара и сътрудници, NEJM
• Дължина на прекурсора, кодиран от KISS1: 145 аминокиселини
• Описани активни фрагменти: киспептин 54, 14, 13 и 10
• Рецептор: KISS1R, по-рано GPR54, свързан с G-белтък рецептор
• Място на действие: GnRH невроните на хипоталамуса
• Произход на името: Hershey Kisses от Хърши, Пенсилвания
• Забранителен списък на WADA: понастоящем не е включен

Числа от цитираните изследвания

• Откриване на гена (Lee 1996, J Natl Cancer Inst 88(23):1731 до 1737): преносът на човешката хромозома 6 в меланомните линии C8161 и MelJuSo потисна способността за метастазиране с поне 95 %, без да засегне туморообразуването. Точно в тези клетки беше намерена кДНК, наречена KiSS-1
• Идентифициране на пептида (Ohtaki 2001, Nature 411(6837):613 до 617): KiSS-1 кодира амидиран в C-края пептид от 54 аминокиселини, изолиран от човешка плацента и наречен метастин. Той е ендогенният лиганд на сирачния рецептор hOT7T175, днес KISS1R
• Генетика на пубертета (Seminara 2003, NEJM 349(17):1614 до 1627): в кръвнородствено семейство беше открита хомозиготна мутация L148S в GPR54, а при несроден пациент мутациите R331X и X399R. Трансфекцията на COS-7 клетки с мутантните конструкти даде значимо по-ниско натрупване на инозитол фосфат
• Къде действа пептидът (Thompson 2004, J Neuroendocrinol 16(10):850 до 858): при възрастни мъжки плъхове i.c.v. доза от 3 nmol kisspeptin-10 повиши плазмения LH на 10-ата, 20-ата и 60-ата минута, FSH на 60-ата минута и общия тестостерон на 20-ата и 60-ата минута
• В същата работа концентрации от 100 до 1000 nM kisspeptin-10 не повлияха освобождаването на LH или FSH от хипофизни фрагменти in vitro. Действието следователно е хипоталамично, а не хипофизно, и точно в това е разликата спрямо прилагането на гонадотропини
• Мишките без GPR54 (Colledge 2004, Trends Endocrinol Metab 15(9):448 до 453) не преминават през пубертет и имат незрели полови органи и ниски полови стероиди, но нормални нива на GnRH в хипоталамуса. Разрешение за употреба като лекарство: няма

Референтни източници (PubMed)

1. Lee J.H. et al. (1996). KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst 88(23):1731 до 1737. PubMed 8944003
2. Ohtaki T. et al. (2001). Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature 411(6837):613 до 617. PubMed 11385580
3. Seminara S.B. et al. (2003). The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med 349(17):1614 до 1627. PubMed 14573733
4. Thompson E.L. et al. (2004). Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol 16(10):850 до 858. PubMed 15500545
5. Colledge W.H. (2004). GPR54 and puberty. Trends Endocrinol Metab 15(9):448 до 453. PubMed 15519892

Регулаторен статус: Kisspeptin-10 не е разрешен като лекарствен продукт в нито една юрисдикция. Той е обект на клинични изследвания в репродуктивната ендокринология, което не е равнозначно на разрешение. За въпроси, свързани с лекарствата в България, е компетентна ИАЛ. Предлаганият тук продукт е реактив, предназначен изключително за научни изследвания в лаборатория (RUO).

Често задавани въпроси за kisspeptin-10

Какво е kisspeptin-10?

Kisspeptin-10 е най-късият напълно активен фрагмент на пептидния хормон киспептин, кодиран от гена KISS1. Обхваща аминокиселини 45 до 54 от прекурсора и се свързва с рецептора GPR54, наричан още KISS1R.

Защо се нарича киспептин?

Името води началото си от мястото на откриването: генът KISS1 е описан през 1996 г. в Хърши, Пенсилвания, като ген, потискащ метастазите, и е кръстен на произвежданите там Hershey’s Kisses. Първоначалното означение метастин идва от този контекст.

Каква роля играе киспептинът в изследванията?

Работите на Семинара и дьо Ру от 2003 г. показват, че дефекти в рецептора GPR54 водят до липсващ пубертет. С това киспептинът е идентифициран като надреден превключвател на гонадотропната ос, над GnRH.

Разрешен ли е kisspeptin-10?

Не. Kisspeptin-10 не е разрешен лекарствен продукт и се доставя изключително като изследователски материал за лаборатория.

По какво се различават kisspeptin-10 и киспептин-54?

Това са два фрагмента от един и същ прекурсор с един и същ активен C-краен участък. Киспептин-54, също метастин, е първоначално изолираната дълга форма. Kisspeptin-10 е по-късият фрагмент със запазен афинитет към рецептора. Описаните полуживоти се различават, което има значение за дизайна на протокола.

Защо този пептид има толкова особено име?

Защото генът е открит в Хърши, Пенсилвания, където се произвеждат Hershey Kisses. Името няма никаква връзка с биологичната функция.

Действа ли киспептинът върху гонадите?

Не, не пряко. Действа върху GnRH невроните на хипоталамуса, тоест в началото на каскадата. Гонадите после реагират на гонадотропините от хипофизата.

Какво е GPR54?

По-старото име на рецептора на киспептина, днес KISS1R. До 2001 г. той беше сирачески рецептор, чийто естествен лиганд беше неизвестен.

Солидно ли е нивото на доказателственост?

За ролята при пубертета то е необичайно солидно за това поле: почива върху човешка генетика, с мутации със загуба на функция и ясен фенотип. Това обаче не казва нищо за ефекта от екзогенно приложение при здрав човек, за което доказателствата са значително по-тънки.