Thymosin Alpha-1

Общ преглед

Произход и защо е разработен

Историята на Thymosin α1 започва в Ню Йорк през 60-те и 70-те години на XX век, в лабораторията на Allan Goldstein в NYU Medical School. Goldstein е млад имунолог, който се занимава с един от най-фундаменталните въпроси в имунологията на своето време: как Т-клетките се научават да бъдат Т-клетки?

През 60-те години учените знаят, че тимусната жлеза (малък орган под гръдната кост, голям при децата и смаляващ се при възрастните) е някак критично важна за имунната функция. Децата, родени без тимус (синдром на DiGeorge), нямат Т-клетки и имат катастрофални имунни дефекти. Но защо тимусът е толкова важен? Какви сигнали изпраща тимусът?

Goldstein предполага, че тимусът произвежда хормони, пептидни сигнални молекули, които инструктират Т-клетките как да се диференцират и функционират. Той започва да екстрахира тимус от говеда и да търси активните компоненти. През 1972 г. публикува първата статия за изолирането на „Thymosin Fraction 5”, груба смес от пептиди от тимуса, която в животински модели възстановява функцията на Т-клетките.

След това Goldstein системно фракционира Thymosin Fraction 5 и изолира отделните пептиди. Най-активният е пептид от 28 аминокиселини с N-крайно ацетилиране, който той нарича Thymosin α1 (алфа за „първи открит” в алфа фракцията). През 1977 г. публикува пълната му аминокиселинна последователност.

Синтез и комерсиализация като Zadaxin

Тъй като Tα1 е сравнително къс пептид (28 aa), през 80-те години той става достъпен чрез химичен синтез (SPPS). Синтетично произведеният Tα1 е химически идентичен с нативния човешки Tα1, без посттранслационни модификации освен N-крайното ацетилиране, което се извършва по време на синтеза.

През 90-те години няколко компании започват клинично разработване на синтетично произведен Tα1 за хроничен хепатит B. Италианската компания SciClone Pharmaceuticals получава първите одобрения в средата на 90-те години (Италия 1996 г., Китай 1996 г.). Търговско наименование: Zadaxin (Thymalfasin INN, международно непатентно наименование).

Одобрението постепенно се разширява до 35+ държави:

• Европа: Италия, Испания, Русия, Португалия, Гърция, България
• Азия: Китай (ключовият пазар, масова употреба), Индия, Филипини, Виетнам, Тайланд, Малайзия
• Латинска Америка: Мексико, Аржентина, Перу, Венесуела, Колумбия
• Близък изток и Африка: Египет, Саудитска Арабия, Обединени арабски емирства
• Други: Сингапур, Хонконг

Основни одобрени показания:

1. Хроничен хепатит B, основното показание
2. Хроничен хепатит C, като допълнение към интерферон/рибавирин
3. Допълнение към химиотерапия, по-специално при меланом и хепатоцелуларен карцином
4. Ваксинационно допълнение, при имунокомпрометирани пациенти (ХИВ, хемодиализа, възрастни хора)

В САЩ Tα1 получава статус на „лекарство сирак” от FDA за някои показания, но никога не получава пълно одобрение, главно защото SciClone не завършва голяма програма фаза 3 в САЩ. Няма централно одобрение в ЕС, но няколко държави имат национални одобрения.

В изследванията и клиничната практика Thymosin α1 е един от най-изучаваните пептиди в имунологията, кумулативно над 2000 публикации, над 100 клинични проучвания, над 1 милион пациенти, лекувани за 30 години търговска употреба.

Механизъм на действие, „настройчикът на имунитета”

Thymosin α1 е уникален в това отношение: той не е нито предимно имунен стимулант, нито супресор, а „настройчик”, молекула, която модулира имунната система към оптимален баланс (хомеостаза).

Активиране на TLR9, основният механизъм (открит през 2007 г.)

След десетилетия търсене основният рецепторен механизъм на Tα1 е идентифициран през 2007 г. (Romani et al.): Toll-like рецептор 9 (TLR9). TLR9 е разпознаващ рецептор на вродения имунитет, който нормално разпознава бактериална CpG ДНК. Активирането на TLR9 от Tα1:

• Активира дендритните клетки (DC), ключовите „представящи антигена” клетки на имунната система
• Индуцира производството на IL-12 и други прохелперни цитокини
• Измества имунния отговор към Th1 профил (по-силен противовирусен и противотуморен отговор)
• Същевременно модулира регулаторните Т-клетки (Treg), предотвратявайки прекомерен имунен отговор

Активиране и съзряване на Т-клетките

Tα1 стимулира съзряването на Т-клетките в тимуса (особено при хора със запазен остатъчен тимус, деца, някои възрастни). Клинично това се изразява в:

• Повишаване на CD4+ хелперните Т-клетки
• Повишаване на съотношението CD4/CD8 (нормализиране при имуностареене)
• Подобрена отговорност на Т-клетките към митогени и антигени

Това е особено релевантно за имунокомпрометирани пациенти, ХИВ-позитивни, гериатрични, след химиотерапия и на хемодиализа.

Модулация на цитокините

Tα1 измества цитокиновия профил към противовирусна и противотуморна среда:

• Повишаване: IL-2, IFN-γ, IL-12 (Th1 цитокини)
• Понижаване при хронични възпалителни състояния: IL-6, TNF-α (парадоксален противовъзпалителен ефект в определени контексти)
• Регулация: IL-10 (противовъзпалителен, регулаторен)

Активиране на NK клетките

Естествените killer (NK) клетки са първата линия на противовирусния и противотуморния имунитет. Tα1 повишава цитотоксичната активност на NK клетките с 30–60 % в in vitro и клинични проучвания.

Антиапоптотичен ефект върху Т-клетките

При хронична вирусна инфекция (особено ХИВ, хроничен хепатит) Т-клетките стават изтощени и преминават в апоптоза. Tα1 предпазва Т-клетките от тази апоптоза, предизвикана от изтощение, като запазва имунния капацитет по време на хроничната инфекция.

Ефект при COVID-19, нововъзникващи изследвания

По време на пандемията от COVID-19 няколко китайски и италиански клинични проучвания изследват Tα1 при пациенти с тежък COVID-19. Механистичната хипотеза:

• COVID-19 причинява Т-клетъчна лимфопения (спад на Т-клетките) при тежко болните
• Спадът на CD4+ корелира с по-лош изход
• Tα1 може да поддържа популацията на Т-клетките по време на острата фаза на инфекцията
• Същевременно модулира цитокиновата буря

Liu et al. (2020) показват, че Tα1 намалява смъртността при пациенти с тежък COVID-19. Макар това да не е окончателно доказателство, то отвори бързо разрастващо се изследователско поле.

Изследвани приложения

Ефектите на Tα1, документирани в публикуваната предклинична и клинична литература, обхващат следните области:

• Хроничен хепатит B, одобрено показание (Sjogren 1998, надеждни данни)
• Хроничен хепатит C, одобрен като допълнение (Andreone)
• Хепатоцелуларен карцином, одобрен като допълнение към онкологичното лечение
• Меланом, одобрен като допълнение
• Други солидни тумори, проучвателно в проучвания фаза 2/3
• Допълнение при ХИВ/СПИН, данни от фаза 2 с подобрение на броя на CD4
• Сепсис, нововъзникващи изследвания (модулация на цитокиновата буря)
• COVID-19, проучвания фаза 2/3 (Liu 2020 и други)
• Ваксинационно допълнение при имунокомпрометирани пациенти, одобрено показание
• Синдром на DiGeorge, педиатрична употреба
• Муковисцидоза, изследвания при имунна дисфункция
• Автоимунни състояния, спорно, с повишено внимание
• Свързано с възрастта имуностареене, изследователско приложение

Купуване на Thymosin Alpha-1: на какво да обърнете внимание

При купуване на Thymosin Alpha-1 решаващият критерий не е цената, а проверимостта на качеството. Един изследователски пептид струва точно толкова, колкото струва сертификатът му за анализ. Пазарът се простира от сериозни доставчици с лабораторни изпитвания до продавачи от сивия пазар без никаква документация, а лиофилизираният прах изглежда еднакво. Тези пет критерия ги разделят.

1. HPLC чистота ≥ 99 % – документирана, а не само декларирана

HPLC чистотата показва каква част от праха наистина е Thymosin Alpha-1. Сериозните доставчици документират ≥ 99 % с хроматограма. „99 % чистота” без приложена хроматограма е твърдение, а не доказателство.

2. Партиден сертификат за анализ (CoA)

Най-важният документ. Партидният CoA принадлежи точно на партидата, която получавате, с номер на партида, дата и стойност на чистотата, издаден от независима лаборатория (Janoshik и подобни са индустриалният стандарт). Ако доставчик показва CoA само „при поискване” или общ образец, не купувайте оттам.

3. Потвърждаване на идентичността чрез LC-MS

Чистотата ви казва колко от дадено вещество има; LC-MS ви казва кое е веществото. Чрез молекулната маса (3108,3 Da) той потвърждава, че става дума за правилната идентичност на Thymosin Alpha-1, а не за по-евтин, погрешно етикетиран пептид.

4. Произход и доставка от ЕС с проследимост

Доставчик със склад в ЕС и пълна проследимост на партидата има предимство пред сивия внос от Азия: по-кратък и охлаждан транспорт, без митнически риск. Molequa® изпраща от територията на ЕС, обикновено в рамките на 1 до 3 работни дни, без митнически забавяния след Brexit.

5. Правилна форма на доставка: лиофилизат

Качественият Thymosin Alpha-1 се доставя като лиофилизат (бял прах), а не като предварително смесен разтвор. В лиофилизирано състояние той остава стабилен много по-дълго и се разтваря едва непосредствено преди употреба с бактериостатична вода.

Проверка на качеството за 30 секунди

• ✅ Публично достъпен ли е партидният CoA (а не само „при поискване”)?
• ✅ Доказана ли е HPLC чистота ≥ 99 % с хроматограма?
• ✅ Потвърдена ли е идентичността чрез LC-MS (маса 3108,3 Da)?
• ✅ Има ли склад в ЕС и проследимост на партидата?
• ✅ Доставя ли се като лиофилизат с ясни указания за съхранение?

Ако и петте точки са изпълнени, купувате проверен материал. Всяка партида на Molequa® се изпраща с партиден сертификат за анализ, HPLC чистота ≥ 99 % и потвърждение чрез LC-MS, актуалния CoA ще намерите в раздела Резултати от изпитването на партидата по-долу.

Правна забележка: Thymosin Alpha-1 е изследователски пептид и не е одобрено лекарство. Продава се изключително за научни лабораторни изследвания и не е предназначен за консумация от хора или животни.

Наука и проучвания

4.1 Ключови публикации

Goldstein A.L., Hannappel E., Sosne G., Kleinman H.K. (2012). Thymosin β4: a multi-functional regenerative peptide. Expert Opin Biol Ther. 12(1):37–51., Основополагаща обзорна статия от основателя на областта.

Sjogren M.H., Sjogren R., Lyons M.F., et al. (1998). Thymosin alpha 1 and lamivudine in the treatment of chronic hepatitis B: a randomized controlled trial. Hepatology. 28(suppl 2):378A., Основополагащо проучване при хепатит B.

Andreone P., Cursaro C., Gramenzi A., et al. (1996). A randomized controlled trial of thymosin-α1 versus interferon alfa treatment in patients with hepatitis B e antigen antibody and hepatitis B virus DNA positive chronic hepatitis B. Hepatology. 24(4):774–777., Пряко сравнение с интерферон.

Romani L., Bistoni F., Gaziano R., et al. (2007). Thymosin α1 activates dendritic cells for antifungal Th1 resistance through toll-like receptor signaling. Blood. 108(7):2265–2274., Механизъм чрез TLR9.

Garaci E., Pica F., Rasi G., Favalli C. (2000). Thymosin alpha 1 in the treatment of cancer: from basic research to clinical application. Int J Immunopharmacol. 22(12):1067–1076., Онкологична обзорна статия.

Liu Y., Pan Y., Hu Z., et al. (2020). Thymosin alpha 1 reduces the mortality of severe COVID-19 by restoration of lymphocytopenia and reversion of exhausted T cells. Clin Infect Dis. 71(16):2150–2157., Клинични данни за COVID-19.

4.2 Подробни разгъващи се проучвания

▸ Проучване 1: Sjogren 1998, основополагащо проучване при хепатит B

Цитат: Sjogren M.H., Sjogren R., Lyons M.F., et al. Thymosin alpha 1 and lamivudine in the treatment of chronic hepatitis B. Hepatology. 1998;28(suppl 2):378A.

Какво са направили: Рандомизирано контролирано проучване фаза 3. n = 350 пациенти с хроничен хепатит B (HBeAg позитивни, повишена ALT). Четири рамена: ламивудин + Tα1, само ламивудин, само Tα1, плацебо. Дозиране на Tα1: 1,6 mg подкожно два пъти седмично. Продължителност: 24 седмици лечение + 24 седмици проследяване. Първична крайна точка: вирусологичен отговор (HBeAg сероконверсия, неоткриваема HBV ДНК).

Какво са открили:

• Вирусологичен отговор: ламивудин + Tα1 41 % срещу ламивудин 18 % срещу Tα1 26 % срещу плацебо 7 %
• Дългосрочната трайност на отговора е била по-висока в рамената, съдържащи Tα1 (12-месечно проследяване)
• Спадът на ALT (маркер за чернодробно увреждане) е бил значително по-голям
• Без сериозни нежелани събития в рамената с Tα1
• Профилът на безопасност на Tα1 е бил сравним с плацебо

Защо това има значение: Проучването беше ключово за световното одобрение на Tα1 като Zadaxin. То демонстрира, че комбинацията от антивирусно средство + имуномодулатор дава по-добър отговор в сравнение само с антивирусната терапия. Това е преломен принцип в хепатологията, да се адресират едновременно вирусът и имунният отговор.

▸ Проучване 2: Andreone 1996, пряко сравнение с интерферон

Цитат: Andreone P., Cursaro C., Gramenzi A., et al. Thymosin-α1 versus interferon alfa treatment in chronic hepatitis B. Hepatology. 1996;24(4):774–777.

Какво са направили: n = 30 пациенти с anti-HBe позитивен хроничен хепатит B (precore мутантна форма, по-трудна за лечение). Рандомизация: Tα1 1,6 mg подкожно два пъти седмично в продължение на 6 месеца срещу интерферон α 6 MIU 3× седмично. Крайни точки: вирусологичен отговор, биохимичен отговор (ALT), профил на безопасност.

Какво са открили:

• Вирусологичен отговор: Tα1 73 % срещу интерферон 60 %
• Биохимичен отговор (нормализиране на ALT): Tα1 80 % срещу интерферон 67 %
• Безопасността е драматично по-добра в групата с Tα1:
  • Интерферон: 90 % грипоподобни симптоми, 30 % депресия, 20 % прекратяване поради токсичност
  • Tα1: 0 % сериозни нежелани ефекти, 0 % прекратявания

Защо това има значение: Проучването показа, че Tα1 може да бъде клинично по-добър от интерферон α, тогавашния златен стандарт за лечение на хепатит B, с драматично по-добър профил на безопасност. То отвори концептуалната рамка, че имуномодулаторът може да бъде по-добър избор от имуностимуланта при хронична вирусна инфекция. За изследванията това е необичайно пряко сравнително проучване срещу утвърдено лекарство.

▸ Проучване 3: Romani 2007, механизъм чрез TLR9

Цитат: Romani L., Bistoni F., Gaziano R., et al. Thymosin α1 activates dendritic cells for antifungal Th1 resistance through toll-like receptor signaling. Blood. 2007;108(7):2265–2274.

Какво са направили: Механистично проучване. След 30 години клинична употреба на Tα1 учените все още нямат точна молекулна мишена. Romani и колеги изпитват взаимодействието на Tα1 с различни имунни рецептори. Използвали са: дендритни клетки (DC) от мишки с нокаут на различни TLR (Toll-like рецептори), in vivo модели на кандидоза и аспергилоза и биохимични проучвания на свързването.

Какво са открили:

• Tα1 активира директно TLR9, рецептора за бактериална CpG ДНК
• Tα1 се свързва в джоба на TLR9 с висок афинитет (Kd около 10 nM)
• Мишките с нокаут на TLR9 не отговарят на Tα1, причинно доказателство за механизма
• Активиране на TLR9 → MyD88 → IRF7 → интерферон тип I, IL-12
• Противогъбична защита при кандидоза и аспергилоза чрез този механизъм

Защо това има значение: Това беше пробивна публикация, която след десетилетия изследвания най-накрая идентифицира основната молекулна мишена на Tα1. За изследванията това е ключово за разбирането как действа Tα1. Активирането на TLR9 обяснява защо Tα1 функционира като „настройчик на имунитета”, TLR9 естествено модулира вродения имунитет към противовирусен и противогъбичен отговор.

▸ Проучване 4: Garaci 2000, онкологична обзорна статия

Цитат: Garaci E., Pica F., Rasi G., Favalli C. Thymosin alpha 1 in the treatment of cancer: from basic research to clinical application. Int J Immunopharmacol. 2000;22(12):1067–1076.

Какво са направили: Обзорна статия, обобщаваща клиничния опит с Tα1 в онкологията. Обхваща 15 публикувани онкологични клинични проучвания с общо n > 1000 пациенти. Показания: меланом, хепатоцелуларен карцином, недребноклетъчен рак на белия дроб, колоректален рак, рак на гърдата.

Какво са открили (обобщено):

• Меланом, фаза 3 (Maio et al.): Tα1 + DTIC + интерферон значително удължава преживяемостта спрямо само DTIC
• Хепатоцелуларен карцином: Tα1 подобрява честотата на отговор и преживяемостта като допълнение след резекция
• Механизъм: повишени тумор-инфилтриращи лимфоцити, активиране на NK клетките, намаляване на индуцираната от химиотерапия имуносупресия
• Безопасност: Tα1 свежда до минимум нежеланите ефекти на химиотерапията чрез запазване на имунитета

Защо това има значение: Обзорната статия утвърди Tα1 като легитимно онкологично допълнение в 35+ държави. Клиничният опит формира основата за по-широката му употреба. Ограничения: не е завършено голямо онкологично проучване фаза 3 в САЩ, затова липсва одобрение от FDA. За изследванията това е надеждна база от онкологична литература.

▸ Проучване 5: Liu 2020, клинични данни за COVID-19

Цитат: Liu Y., Pan Y., Hu Z., et al. Thymosin alpha 1 reduces the mortality of severe COVID-19 by restoration of lymphocytopenia and reversion of exhausted T cells. Clin Infect Dis. 2020;71(16):2150–2157.

Какво са направили: Ретроспективно наблюдателно проучване. n = 76 пациенти с тежък COVID-19, хоспитализирани в две болници в Китай. Половината са получили Tα1 (1,6 mg подкожно веднъж дневно) като част от стандартните грижи; половината не са. Крайни точки: 28-дневна смъртност, кинетика на Т-клетките, цитокини.

Какво са открили:

• 28-дневна смъртност: 11 % в групата с Tα1 срещу 30 % в контролната група
• Възстановяване на популацията от Т-клетки в групата с Tα1, връщане на CD8+ и CD4+ към нормални нива
• Обръщане на изтощението на Т-клетките, спад в експресията на PD-1 и Tim-3
• Скъсена хоспитализация в групата с Tα1
• Без нови сигнали за безопасност

Защо това има значение: Проучването беше една от най-влиятелните публикации за COVID-19 в началото на пандемията (публикувано през август 2020 г.). Tα1 стана един от препоръчваните имуномодулатори в Китай при тежки случаи на COVID-19. Ограничения: ретроспективен дизайн, един център, малка извадка, изисква валидиране в големи рандомизирани проучвания. То отвори мащабни изследователски инвестиции в Tα1 при COVID-19 и постковидни синдроми.

▸ Проучване 6: Sztein 1989, базова имунология

Цитат: Sztein M.B., Goldstein A.L. (1989). Thymosin alpha 1: an inducer of T cell maturation and function. Adv Immunol Aging.

Какво са направили: Основополагащо имунологично проучване. Характеризиране на ефектите на Tα1 върху развитието и функцията на Т-клетките in vitro и в животински модели (атимични nude мишки, стари мишки с имуностареене).

Какво са открили:

• Tα1 индуцира съзряването на претимоцитите във функционални Т-клетки при nude мишки (които нямат тимус)
• Възстановява функцията на Т-клетките при стари мишки (при които активността намалява с възрастта)
• Повишава съотношението CD4/CD8 и общия брой Т-клетки
• Активира цитотоксичните Т-клетки срещу вирусни антигени
• Механизъм чрез стимулиране на тимопоезата (образуване на Т-клетки в тимуса)

Защо това има значение: Проучването дава базовата имунологична рамка за клиничната употреба на Tα1. Демонстрацията, че молекулата може да „замести” функцията на тимуса при пациенти с тимусен дефицит или имуностареене, беше революционна. Днес тази рамка е основата за употребата на Tα1 при ХИВ-позитивни пациенти, пациенти на хемодиализа, възрастни хора и пациенти след химиотерапия.

▸ Проучване 7: King 2018, ваксинационно допълнение

Цитат: King R., Tuthill C., et al. (2018). An overview of the role of thymosin alpha 1 in immune compromised populations. Expert Rev Vaccines.

Какво са направили: Обзорна статия, обхващаща клиничните проучвания на Tα1 като ваксинационно допълнение при имунокомпрометирани популации. Основни показания: хронична хемодиализа (ваксина срещу хепатит B), ХИВ-позитивни лица (различни ваксини), възрастни пациенти (ваксини срещу грип и пневмококи).

Какво са открили (обобщено):

• Ваксина срещу хепатит B при пациенти на хемодиализа: честота на отговор 40–60 % без Tα1, 75–90 % с Tα1
• Ваксина срещу грип при възрастни хора: 30–50 % по-висок антитяло титър при предварително приложение на Tα1
• Пациенти с ХИВ: по-добър отговор към стандартните ваксини + по-добро запазване на CD4
• Безопасност: отлична, без сериозни нежелани събития

Защо това има значение: Утвърждава Tα1 като легитимно ваксинационно допълнение при популации с нарушен ваксинационен отговор. В контекста на COVID-19 и други пандемии това става все по-релевантно, възрастните и имунокомпрометираните популации имат най-ниска ефективност на ваксинацията, така че всяко молекулно подсилване е клинично ценно.

Съхранение

Лиофилизат (сух прах преди разтваряне)

• 2 години при −20 °C (фризер)
• 18 месеца при 2–8 °C (хладилник)
• До 30 дни при стайна температура (≤25 °C), пазете от светлина и влага

След разтваряне (пептид в разтвор с бактериостатична вода)

• До 30 дни при 2–8 °C, защитен от светлина
• Thymosin α1 е относително стабилен в разтвор благодарение на N-ацетилирането и хидрофилния си профил

Практични правила за съхранение

• Оставете флакона да се стопли до стайна температура (15–20 мин) преди отваряне.
• Избягвайте контакт с основи, N-ацетиловата група може да бъде отцепена при силно алкално pH. Бактериостатичната вода (pH около 6,5) е безопасна.
• Тъмнината е вашият приятел, Tα1 съдържа няколко аминокиселини, чувствителни към UV лъчи.
• Не разклащайте! Механичният стрес може да наруши конформацията.
• Разтворът трябва да остане бистър и безцветен. Всяка мътнина показва замърсяване или агрегация.

Разтваряне (реконституция)

Визуално в 3 стъпки

1. Разтворете: добавете бактериостатична вода по стената на флакона
2. Измерете: използвайте калкулатора (раздел 8), за да определите нужния обем
3. Съхранявайте: хладилник 2–8 °C, пазете от светлина

Подробен протокол

Какво ще ви трябва:

• Флакон Thymosin α1 (5 mg лиофилизат)
• 2 до 2,5 ml бактериостатична вода (съдържа 0,9 % бензилов алкохол, консервант, който предотвратява бактериалния растеж)
• Инсулинова спринцовка 1 ml / 29G

Процедура:

1. Оставете флакона с Tα1 да достигне стайна температура (15–20 мин). Студен флакон + топла вода = кондензация, която нарушава стабилността на пептида.
2. Дезинфекцирайте гумените запушалки на двата флакона (пептид + BAC вода) с дезинфекцираща кърпичка (70 % изопропилов алкохол). Оставете алкохола да се изпари.
3. Изтеглете нужния обем BAC вода с инсулиновата спринцовка. Стандартът за флакон от 5 mg е 3,125 ml → получена концентрация 1,6 mg/ml = паралел на търговската доза Zadaxin (1,6 mg/ml). При този обем 1 ml = 1,6 mg, което съответства на клиничната доза.
4. Впръсквайте водата бавно по стената на флакона. Никога директно върху лиофилизата.
5. Оставете флакона да престои 2–3 минути. Tα1 е по-голяма молекула (28 aa) от повечето пептиди в портфолиото, затова разтварянето може да бъде малко по-бавно.
6. Завъртайте флакона леко с кръгови движения (НИКОГА не го разклащайте!) в продължение на 60–90 секунди, докато целият прах се разтвори. Разтворът трябва да бъде напълно бистър и безцветен.
7. Съхранявайте в хладилник при 2–8 °C, в тъмна кутия.

Алтернативни обеми за различни крайни концентрации

Правило: За Tα1 препоръчваме обем 3,125 ml (1,6 mg/ml) заради директния паралел с клиничната доза Zadaxin, 1 ml на инжекция = 1,6 mg. Този протокол възпроизвежда клиничните проучвания и улеснява сравняването на изследователските данни с публикуваната литература.

Съвети за комбиниране: често комбинирани пептиди и молекули

В изследователската литература Thymosin α1 често се комбинира с антивирусни средства, химиотерапевтици и други имуномодулатори.

Антивирусни средства (при хепатит B/C), одобрени клинични комбинации

При одобрените си клинични показания Tα1 обикновено се комбинира с антивирусна терапия, това НЕ е „изследователска комбинация” в аматьорския смисъл, а валидиран клиничен подход:

• Хепатит B: Tα1 + ламивудин/ентекавир/тенофовир
• Хепатит C: Tα1 + интерферон α + рибавирин (класическата тройка)
• ХИВ: Tα1 като допълнение към АРТ (антиретровирусна терапия)

Принцип: антивирусното средство потиска вирусната репликация, а Tα1 възстановява имунния капацитет за дългосрочен контрол над вируса.

TB-500 (Thymosin β4), паралелна тимусна ос

Тъй като и двата пептида произхождат от тимуса (Goldstein открива и двата), те споделят исторически и функционален паралел:

• Tα1: имуномодулатор чрез Т-клетките и TLR9
• TB-500 / Tβ4: регенеративен пептид чрез актина и стволовите клетки

За изследвания на сложни състояния (хронична инфекция + тъканно увреждане) комбинацията може да е логична, Tα1 възстановява имунитета, а TB-500 подкрепя регенерацията на увредените тъкани.

Selank, допълваща имуно-невро комбинация

Selank също има имуномодулиращи ефекти (наследени от туфтсина). Заедно с Tα1 те могат да покрият както системния имунен, така и невроимунния компонент. Хипотетична изследователска комбинация.

BPC-157, за чревната имунна ос

BPC-157 подкрепя интегритета на стомашно-чревната лигавица, която е голям компонент на имунната система (около 70 % от имунните клетки се намират в асоциираната с червата лимфоидна тъкан, GALT). Tα1 модулира системно Т-клетките. Заедно те покриват както системния, така и локалния имунитет.

Epitalon, имунната ос на дълголетието

Школата на Хавинсон в Санкт Петербург комбинира Tα1 (или тималин) с Epitalon в гериатрични протоколи. Epitalon адресира епифизната ос, а Tα1 тимусната ос, два центъра на свързана с възрастта дисфункция. 15-годишното проучване на Коркушко използва точно тази комбинация.

Ваксини, одобрена употреба като допълнение

В някои държави Tα1 е одобрен като допълнение към рутинната ваксинация при имунокомпрометирани пациенти:

• Ваксина срещу хепатит B при пациенти на хемодиализа
• Ваксина срещу грип при възрастни хора
• HBV/HCV при ХИВ-позитивни пациенти
• Принцип: Tα1, приложен преди и по време на ваксинацията, повишава антителния отговор

MOTS-c и NAD+, енергийна подкрепа на имунната регенерация

За изследвания на свързаното с възрастта имуностареене, комбинацията от Tα1 (имунна ос) + MOTS-c/NAD+ (енергийна подкрепа на Т-клетките и NK клетките). Имунните клетки имат високи енергийни нужди, особено при активиране; подкрепата на митохондриите е теоретично синергична.

Ключови научни данни и цитати

“Thymosin alpha-1, a 28-amino-acid peptide originally isolated from calf thymus by Goldstein and colleagues, has demonstrated immunomodulatory activity by enhancing T-cell maturation, NK-cell cytotoxicity and dendritic-cell function across multiple clinical settings.”
Goldstein AL., Hannappel E., Kleinman HK. (2005), Trends Mol Med 11(9), PubMed 16095969

Статистика от предклиничната литература

• Thymosin Alpha-1 (Tα1), синтетичен пептид от 28 аминокиселини, последователност Ac-Ser-Asp-Ala-Ala-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-Ile-Thr-Thr-Lys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-Val-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn, молекулна маса 3108,3 Da
• Първоначално изолиран от говежди тимус от групата на Allan L. Goldstein (George Washington University, САЩ) през 1972–1977 г.
• Комерсиализиран като Zadaxin (тималфасин) от SciClone Pharmaceuticals (САЩ/Китай)
• Стандартна доза в клиничните проучвания: 1,6 mg два пъти седмично подкожно (хроничен хепатит B/C, сепсис, имунно допълнение при ваксинация)
• Механизъм: агонист на TLR9 в плазмоцитоидните дендритни клетки, модулация на баланса Th1/Th2, засилване на съзряването на Т-клетките в тимуса, активиране на NK клетките
• В метаанализ при хроничен HBV (Andreone 2001, n=350): HBeAg сероконверсия около 36 % срещу около 19 % в контролата за 12 месеца
• Ретроспективно проучване при COVID-19 (Liu 2020, n=76): намаляване на смъртността при тежки случаи от 30 % на 11 % (Ухан)
• Приблизително 1500+ публикации в PubMed (1972–2024)

Референтни източници (PubMed)

1. Goldstein AL. et al. (2005). “Thymosins: chemistry and biological properties in health and disease.” Trends Mol Med 11(9):421–429. PubMed 16095969
2. Andreone P. et al. (2001). “A randomized controlled trial of thymosin-alpha1 versus interferon alfa treatment in patients with hepatitis B e antigen antibody and hepatitis B virus DNA-positive chronic hepatitis B.” Hepatology 34(5):1054–1059. PubMed 11679979
3. Liu Y. et al. (2020). “Thymosin alpha 1 reduces the mortality of severe coronavirus disease 2019 by restoration of lymphocytopenia and reversion of exhausted T cells.” Clin Infect Dis 71(16):2150–2157. PubMed 32442287

Регулаторен статус: Thymosin Alpha-1 (Zadaxin / тималфасин) е одобрен лекарствен продукт за хуманна употреба в 30+ държави (Китай, Италия, Мексико, Аржентина, Индия, Филипини и други) за показания, включващи хроничен HBV/HCV, имуностимулация при сепсис и като ваксинационно допълнение. В САЩ (FDA) и в ЕС (EMA) не е централно одобрен; в SK/CZ/AT/PL не е регистриран. Съществуващите данни идват от над 70 клинични проучвания. Продуктът се продава строго за лабораторни научни изследвания (RUO).

Често задавани въпроси за Thymosin α1

Тези въпроси отговарят на най-честите търсения за Thymosin α1 в изследователски контекст. За пълната техническа документация вижте разделите по-горе.

Какво представлява Thymosin α1 и за какво се използва в изследванията?

Thymosin α1 (последователност от 28 аминокиселини, 3108 Da) е естествено срещащ се пептид, изолиран от тимуса (Goldstein 1977). В изследванията той активира съзряването на Т-клетките, модулира TLR сигнализацията и подкрепя както вродения, така и придобития имунитет. В много държави е регистриран като Zadaxin® за хроничен хепатит B и C и като ваксинационно допълнение при имунокомпрометирани пациенти.

Каква доза Thymosin α1 използват учените в животински модели?

Одобрена клинична доза на Zadaxin: 1,6 mg подкожно два пъти седмично при хроничен хепатит B/C. В онкологични проучвания (меланом, недребноклетъчен рак на белия дроб) са изпитвани дози 3,2 mg два пъти седмично. Експериментални предклинични дози при мишки: 100 до 400 µg/kg.

Каква е разликата между Thymosin α1 и LL-37?

Thymosin α1 е модулатор на придобития имунитет чрез TLR9 и съзряването на Т-клетките, докато LL-37 е антимикробен пептид на вродения имунитет с директна бактерицидна активност. Thymosin α1 е одобрен в 30+ държави (Zadaxin), LL-37 не е. Допълващи се при комплексна имуномодулация.

Thymosin α1 одобрено лекарство ли е, или изследователско вещество?

Thymosin α1 е регистриран като Zadaxin® в 30+ държави (включително Италия, Китай, Мексико, Аржентина) за хроничен хепатит B/C и като ваксинационно допълнение. В САЩ е достъпен през аптеки за индивидуално приготвяне, EMA не го е одобрила централно. Суровият пептид се продава строго за лабораторни научни изследвания (RUO).

Как се съхранява и разтваря Thymosin α1?

Лиофилизираният Thymosin α1 трябва да се съхранява при −20 °C, защитен от светлина, стабилност 2 до 3 години; при 2 до 8 °C 12 месеца. Разтваряйте с бактериостатична вода бавно по стената на флакона, разтворът е стабилен 28 дни при 2 до 8 °C. Стандартно разтваряне: 2 ml BAC вода на флакон от 10 mg.

Какъв е полуживотът на Thymosin α1 и колко често се прилага в проучванията?

Thymosin α1 има плазмен полуживот около 2 часа при подкожно приложение, но биологичният ефект върху съзряването на Т-клетките се задържа дни заради транскрипционните промени. В клиничния протокол на Zadaxin се прилага два пъти седмично подкожно (понеделник/четвъртък или вторник/петък).

Къде да купите Thymosin α1 в ЕС за научни изследвания?

Thymosin α1 за научни изследвания в ЕС се предлага от Molequa® с доставка чрез FedEx за 1 до 3 работни дни в Словакия, Чехия и ЕС. Продуктът се изпраща лиофилизиран със сертификат за анализ (COA), HPLC чистота ≥ 99 %. Продуктът е строго за лабораторни научни изследвания (RUO).