Prehľad
Čo je endotoxín a prečo nie je peptid
Endotoxín je lipopolysacharid, skrátene LPS. Nie je to peptid ani bielkovina. Je to veľká molekula zložená z tukovej časti (lipid A) a z reťazca cukrov, ktorá tvorí vonkajšiu membránu gramnegatívnych baktérií, napríklad Escherichia coli. Uvoľňuje sa, keď sa bakteriálna bunka rozpadne.
Práve lipid A je tá časť, ktorú imunitný systém rozpozná. Viaže sa na receptor TLR4 spolu s pomocnou bielkovinou MD-2 a spustí kaskádu, ktorá v bunke naštartuje zápalovú odpoveď. Táto vlastnosť z LPS urobila jeden z najpoužívanejších nástrojov bunkovej biológie.
Na čo sa endotoxín vo výskume používa
V laboratóriu má LPS dve hlavné úlohy.
Prvou je agonista TLR4. Keď potrebujete v bunkovej kultúre vyvolať riadenú zápalovú odpoveď a sledovať, čo sa deje ďalej, LPS je štandardný spúšťač. Na tomto princípe stojí veľká časť literatúry o vrodenej imunite.
Druhou je referenčný štandard pri stanovení endotoxínov. Test LAL, ktorý meria obsah endotoxínov v surovine, potrebuje známu pozitívnu kontrolu, aby sa dalo overiť, že reaguje správne. Tou kontrolou je práve purifikovaný LPS so známou aktivitou vyjadrenou v endotoxínových jednotkách na miligram.
Prečo túto látku ponúka obchod s peptidmi
Znie to ako protirečenie: pri každej šarži peptidov uvádzame hladinu endotoxínov ako parameter kvality a ideálom je čo najnižšia hodnota. Tu tú istú látku dodávame.
Nie je v tom rozpor. Endotoxín je meradlo aj vzorka naraz. Bez známeho štandardu sa hladina endotoxínov v peptide nedá zmerať, lebo test nemá voči čomu kalibrovať. Laboratóriá, ktoré si čistotu overujú samy, potrebujú oboje: materiál s nízkym obsahom endotoxínov a referenčnú látku, ktorou si test skontrolujú.
Manipulácia a skladovanie
LPS je hygroskopický a citlivý na vlhkosť. Lyofilizovaný prášok skladujte pri 2 až 8 °C, v pôvodnom obale, chránený pred svetlom. Zásobné roztoky sa pripravujú podľa protokolu konkrétneho pracoviska; LPS sa silne viaže na plasty a sklo, preto sa odporúča pracovať s jednou sériou pomôcok a roztok pred použitím dôkladne premiešať.
Endotoxín je pyrogénny. Patrí výhradne do laboratórneho prostredia a do rúk vyškolenej obsluhy, ktorá pracuje podľa pravidiel svojho pracoviska.
Dostupnosť
Túto položku neskladujeme priebežne, dodávame ju na vyžiadanie. Napíšte nám požadované množstvo a určenie; cenu, dostupnosť a dokumentáciu k šarži potvrdíme e-mailom.
Často hľadané otázky o endotoxíne (LPS)
Čo je endotoxín a prečo to nie je peptid?
Endotoxín je lipopolysacharid (LPS), veľká molekula zložená z tukovej časti (lipid A) a z reťazca cukrov, ktorá tvorí vonkajšiu membránu gramnegatívnych baktérií, napríklad Escherichia coli. Nie je to peptid ani bielkovina. Uvoľňuje sa vtedy, keď sa bakteriálna bunka rozpadne.
Na čo sa endotoxín vo výskume používa?
Má dve hlavné úlohy. Ako agonista TLR4 slúži na vyvolanie riadenej zápalovej odpovede v bunkovej kultúre, na čom stojí veľká časť literatúry o vrodenej imunite. Ako referenčný štandard je známa pozitívna kontrola pri stanovení endotoxínov, teda pri LAL teste.
Prečo endotoxín ponúka obchod s peptidmi?
Pri peptidoch sa hladina endotoxínov uvádza ako parameter kvality a ideálom je čo najnižšia hodnota. Bez známeho štandardu sa však tá hladina nedá zmerať, lebo test nemá voči čomu kalibrovať. Laboratóriá, ktoré si čistotu overujú samy, preto potrebujú oboje: materiál s nízkym obsahom endotoxínov aj referenčnú látku.
Ako sa endotoxín skladuje?
Lyofilizovaný LPS patrí pri 2 až 8 °C do pôvodného obalu, chránený pred svetlom a vlhkosťou. Je hygroskopický, preto sa vialka pred otvorením necháva zohriať na izbovú teplotu. Zásobný roztok sa pripravuje a uchováva podľa protokolu konkrétneho pracoviska.
Ako sa dá endotoxín objednať?
Túto položku neskladujeme priebežne, dodávame ju na vyžiadanie. Stačí uviesť požadované množstvo a určenie; cenu, dostupnosť a dokumentáciu k šarži potvrdíme e-mailom. Výhradne na laboratórne a výskumné použitie.
Výhradne na laboratórne a výskumné použitie (RUO). Nie je to liek, výživový doplnok ani kozmetika a nie je určený na humánnu ani zvieraciu spotrebu.
