Přehled
Co je endotoxin a proč to není peptid
Endotoxin je lipopolysacharid, zkráceně LPS. Není to peptid ani bílkovina. Je to velká molekula složená z tukové části (lipid A) a z řetězce cukrů, která tvoří vnější membránu gramnegativních bakterií, například Escherichia coli. Uvolňuje se, když se bakteriální buňka rozpadne.
Právě lipid A je ta část, kterou imunitní systém rozpozná. Váže se na receptor TLR4 společně s pomocnou bílkovinou MD-2 a spustí kaskádu, která v buňce nastartuje zánětlivou odpověď. Díky této vlastnosti se z LPS stal jeden z nejpoužívanějších nástrojů buněčné biologie.
K čemu se endotoxin ve výzkumu používá
V laboratoři má LPS dvě hlavní role.
První je agonista TLR4. Když potřebujete v buněčné kultuře vyvolat řízenou zánětlivou odpověď a sledovat, co se děje dál, LPS je standardní spouštěč. Na tomto principu stojí velká část literatury o vrozené imunitě.
Druhou je referenční standard při stanovení endotoxinů. Test LAL, který měří obsah endotoxinů v surovině, potřebuje známou pozitivní kontrolu, aby se dalo ověřit, že reaguje správně. Touto kontrolou je právě purifikovaný LPS se známou aktivitou vyjádřenou v endotoxinových jednotkách na miligram.
Proč tuto látku nabízí obchod s peptidy
Zní to jako protimluv: u každé šarže peptidů uvádíme hladinu endotoxinů jako parametr kvality a ideálem je co nejnižší hodnota. Tady tutéž látku dodáváme.
Rozpor v tom není. Endotoxin je měřítko i vzorek zároveň. Bez známého standardu se hladina endotoxinů v peptidu změřit nedá, protože test nemá vůči čemu kalibrovat. Laboratoře, které si čistotu ověřují samy, potřebují obojí: materiál s nízkým obsahem endotoxinů a referenční látku, kterou si test zkontrolují.
Manipulace a skladování
LPS je hygroskopický a citlivý na vlhkost. Lyofilizovaný prášek skladujte při 2 až 8 °C, v původním obalu, chráněný před světlem. Zásobní roztoky se připravují podle protokolu konkrétního pracoviště; LPS se silně váže na plasty a sklo, proto se doporučuje pracovat s jednou sérií pomůcek a roztok před použitím důkladně promíchat.
Endotoxin je pyrogenní. Patří výhradně do laboratorního prostředí a do rukou vyškolené obsluhy, která pracuje podle pravidel svého pracoviště.
Dostupnost
Tuto položku průběžně neskladujeme, dodáváme ji na vyžádání. Napište nám požadované množství a určení; cenu, dostupnost a dokumentaci k šarži potvrdíme e-mailem.
Často hledané otázky o endotoxinu (LPS)
Co je endotoxin a proč to není peptid?
Endotoxin je lipopolysacharid (LPS), velká molekula složená z tukové části (lipid A) a z řetězce cukrů, která tvoří vnější membránu gramnegativních bakterií, například Escherichia coli. Není to peptid ani bílkovina. Uvolňuje se tehdy, když se bakteriální buňka rozpadne.
K čemu se endotoxin ve výzkumu používá?
Má dvě hlavní úlohy. Jako agonista TLR4 slouží k vyvolání řízené zánětlivé odpovědi v buněčné kultuře, na čemž stojí velká část literatury o vrozené imunitě. Jako referenční standard je známou pozitivní kontrolou při stanovení endotoxinů, tedy při LAL testu.
Proč endotoxin nabízí obchod s peptidy?
U peptidů se hladina endotoxinů uvádí jako parametr kvality a ideálem je co nejnižší hodnota. Bez známého standardu se však tato hladina nedá změřit, protože test nemá vůči čemu kalibrovat. Laboratoře, které si čistotu ověřují samy, proto potřebují obojí: materiál s nízkým obsahem endotoxinů i referenční látku.
Jak se endotoxin skladuje?
Lyofilizovaný LPS patří při 2 až 8 °C do původního obalu, chráněný před světlem a vlhkostí. Je hygroskopický, proto se vialka před otevřením nechává ohřát na pokojovou teplotu. Zásobní roztok se připravuje a uchovává podle protokolu konkrétního pracoviště.
Jak se dá endotoxin objednat?
Tuto položku neskladujeme průběžně, dodáváme ji na vyžádání. Stačí uvést požadované množství a určení; cenu, dostupnost a dokumentaci k šarži potvrdíme e-mailem. Výhradně pro laboratorní a výzkumné použití.
Výhradně pro laboratorní a výzkumné použití (RUO). Není to lék, doplněk stravy ani kosmetika a není určen k lidské ani zvířecí spotřebě.
