Przegląd
Czym jest endotoksyna i dlaczego nie jest peptydem
Endotoksyna to lipopolisacharyd, w skrócie LPS. Nie jest ani peptydem, ani białkiem. To duża cząsteczka złożona z części lipidowej (lipid A) i łańcucha cukrów, tworząca błonę zewnętrzną bakterii gram-ujemnych, takich jak Escherichia coli. Uwalnia się, gdy komórka bakteryjna ulega rozpadowi.
To właśnie lipid A rozpoznaje układ odpornościowy. Wiąże się z receptorem TLR4 wraz z białkiem pomocniczym MD-2 i uruchamia kaskadę, która w komórce rozpoczyna odpowiedź zapalną. Ta właściwość uczyniła z LPS jedno z najczęściej używanych narzędzi biologii komórki.
Do czego endotoksyna służy w badaniach
W laboratorium LPS pełni dwie główne role.
Pierwsza to agonista TLR4. Gdy w hodowli komórkowej trzeba wywołać kontrolowaną odpowiedź zapalną i śledzić jej przebieg, LPS jest standardowym czynnikiem wyzwalającym. Na tej zasadzie opiera się znaczna część piśmiennictwa o odporności wrodzonej.
Druga to wzorzec referencyjny przy oznaczaniu endotoksyn. Test LAL, który mierzy zawartość endotoksyn w materiale, potrzebuje znanej kontroli dodatniej, aby potwierdzić, że reaguje prawidłowo. Tą kontrolą jest oczyszczony LPS o znanej aktywności wyrażonej w jednostkach endotoksyn na miligram.
Dlaczego sklep z peptydami oferuje tę substancję
Brzmi to jak sprzeczność: przy każdej serii peptydów podajemy poziom endotoksyn jako parametr jakości, a celem jest wartość możliwie najniższa. Tutaj dostarczamy dokładnie tę samą substancję.
Sprzeczności nie ma. Endotoksyna jest jednocześnie miarą i próbką. Bez znanego wzorca poziomu endotoksyn w peptydzie w ogóle nie da się zmierzyć, bo test nie ma do czego się odnieść. Laboratoria, które same weryfikują czystość, potrzebują obu rzeczy: materiału o niskiej zawartości endotoksyn oraz substancji referencyjnej do sprawdzenia testu.
Postępowanie i przechowywanie
LPS jest higroskopijny i wrażliwy na wilgoć. Proszek liofilizowany przechowuj w temperaturze 2 do 8 °C, w oryginalnym opakowaniu, chroniony przed światłem. Roztwory podstawowe przygotowuje się zgodnie z protokołem danej placówki; LPS silnie wiąże się z tworzywami sztucznymi i szkłem, dlatego zaleca się pracę na jednej serii materiałów zużywalnych i dokładne wymieszanie roztworu przed użyciem.
Endotoksyna jest pirogenna. Jej miejsce jest wyłącznie w środowisku laboratoryjnym, w rękach przeszkolonego personelu pracującego według zasad własnej placówki.
Dostępność
Tej pozycji nie utrzymujemy w stałym magazynie, dostarczamy ją na zamówienie. Napisz nam, jaka ilość i jakie przeznaczenie; cenę, dostępność i dokumentację serii potwierdzimy e-mailem.
Najczęściej zadawane pytania o endotoksynę (LPS)
Czym jest endotoksyna i dlaczego nie jest peptydem?
Endotoksyna to lipopolisacharyd (LPS), duża cząsteczka złożona z części tłuszczowej (lipid A) i łańcucha cukrów, która tworzy zewnętrzną błonę bakterii Gram-ujemnych, na przykład Escherichia coli. Nie jest to ani peptyd, ani białko. Uwalnia się, gdy komórka bakteryjna ulega rozpadowi.
Do czego endotoksyna służy w badaniach?
Pełni dwie główne role. Jako agonista TLR4 wywołuje kontrolowaną odpowiedź zapalną w hodowli komórkowej, na czym opiera się znaczna część literatury o odporności wrodzonej. Jako wzorzec odniesienia jest znaną kontrolą dodatnią w oznaczaniu endotoksyn, czyli w teście LAL.
Dlaczego endotoksynę oferuje sklep z peptydami?
W przypadku peptydów poziom endotoksyn podaje się jako parametr jakości i im niższy, tym lepiej. Bez znanego wzorca nie da się go jednak zmierzyć, ponieważ test nie ma do czego się kalibrować. Laboratoria, które same weryfikują czystość, potrzebują więc obu rzeczy: materiału o niskiej zawartości endotoksyn oraz substancji odniesienia.
Jak przechowywać endotoksynę?
Liofilizowany LPS przechowuje się w temperaturze 2 do 8 °C w oryginalnym opakowaniu, chroniony przed światłem i wilgocią. Jest higroskopijny, dlatego przed otwarciem fiolkę pozostawia się do ogrzania w temperaturze pokojowej. Roztwór podstawowy przygotowuje się i przechowuje zgodnie z protokołem danej pracowni.
Jak zamówić endotoksynę?
Tej pozycji nie trzymamy stale na stanie, dostarczamy ją na zamówienie. Wystarczy podać żądaną ilość i przeznaczenie; cenę, dostępność i dokumentację serii potwierdzamy e-mailem. Wyłącznie do zastosowań laboratoryjnych i badawczych.
Wyłącznie do zastosowań laboratoryjnych i badawczych (RUO). Nie jest lekiem, suplementem diety ani kosmetykiem i nie jest przeznaczona do spożycia przez ludzi ani zwierzęta.
