Áttekintés
Mi az endotoxin, és miért nem peptid
Az endotoxin egy lipopoliszacharid, rövidítve LPS. Nem peptid és nem fehérje. Nagy molekula, amely egy zsírrészből (lipid A) és egy cukorláncból áll, és a Gram-negatív baktériumok, például az Escherichia coli külső membránját alkotja. Akkor szabadul fel, amikor a baktériumsejt szétesik.
Éppen a lipid A az a rész, amelyet az immunrendszer felismer. A TLR4 receptorhoz kötődik az MD-2 segédfehérjével együtt, és olyan kaszkádot indít el, amely a sejten belül beindítja a gyulladásos választ. Ez a tulajdonság tette az LPS-t a sejtbiológia egyik legtöbbet használt eszközévé.
Mire használják az endotoxint a kutatásban
A laboratóriumban az LPS két fő szerepet tölt be.
Az első a TLR4-agonista szerep. Amikor sejtkultúrában kontrollált gyulladásos választ kell kiváltani, és nyomon követni, mi történik utána, az LPS a bevett kiváltó anyag. A veleszületett immunitásról szóló irodalom nagy része ezen az elven nyugszik.
A második a referenciaszabvány szerepe az endotoxin-meghatározásban. A LAL-teszt, amely egy alapanyag endotoxin-tartalmát méri, ismert pozitív kontrollt igényel ahhoz, hogy igazolható legyen: helyesen reagál. Ez a kontroll pontosan ez a tisztított LPS, ismert, milligrammonkénti endotoxinegységben kifejezett aktivitással.
Miért kínál egy peptidbolt ilyen anyagot
Ellentmondásnak hangzik: minden peptidtételnél minőségi paraméterként tüntetjük fel az endotoxinszintet, és a lehető legalacsonyabb érték az ideális. Itt pedig ugyanezt az anyagot szállítjuk.
Ellentmondás mégsincs. Az endotoxin egyszerre mérce és minta. Ismert szabvány nélkül egy peptid endotoxinszintje nem mérhető, mert a tesztnek nincs mihez kalibrálnia. Azok a laboratóriumok, amelyek maguk ellenőrzik a tisztaságot, mindkettőre szükségük van: alacsony endotoxin-tartalmú anyagra és referenciaanyagra, amellyel a tesztet leellenőrzik.
Kezelés és tárolás
Az LPS higroszkópos és nedvességre érzékeny. A liofilizált port 2–8 °C között, eredeti csomagolásában, fénytől védve tárolja. A törzsoldatokat az adott munkahely protokollja szerint kell elkészíteni; az LPS erősen tapad a műanyaghoz és az üveghez, ezért célszerű egyetlen eszközsorozattal dolgozni, és az oldatot használat előtt alaposan elkeverni.
Az endotoxin pirogén. Kizárólag laboratóriumi környezetbe és képzett kezelő kezébe való, aki a munkahelye szabályai szerint dolgozik.
Elérhetőség
Ezt a tételt nem tartjuk folyamatosan raktáron, kérésre szállítjuk. Írja meg a szükséges mennyiséget és a felhasználás célját; az árat, az elérhetőséget és a tételdokumentációt e-mailben visszaigazoljuk.
Gyakori kérdések az endotoxinról (LPS)
Mi az endotoxin, és miért nem peptid?
Az endotoxin lipopoliszacharid (LPS), vagyis nagy molekula, amely egy zsírrészből (lipid A) és cukorláncból áll, és a Gram-negatív baktériumok, például az Escherichia coli külső membránját alkotja. Nem peptid és nem fehérje. Akkor szabadul fel, amikor a baktériumsejt szétesik.
Mire használják az endotoxint a kutatásban?
Két fő szerepe van. TLR4-agonistaként szabályozott gyulladásos választ vált ki sejtkultúrában, amin a veleszületett immunitásról szóló szakirodalom jelentős része alapul. Referenciastandardként az endotoxin-meghatározás, vagyis a LAL-teszt ismert pozitív kontrollja.
Miért kínál endotoxint egy peptidekkel foglalkozó bolt?
A peptideknél az endotoxinszint minőségi paraméterként szerepel, és minél alacsonyabb, annál jobb. Ismert standard nélkül azonban ez a szint nem mérhető, mert a tesztnek nincs mihez kalibrálnia. Azoknak a laboratóriumoknak tehát, amelyek maguk ellenőrzik a tisztaságot, mindkettőre szükségük van: alacsony endotoxintartalmú anyagra és referenciaanyagra is.
Hogyan kell az endotoxint tárolni?
A liofilizált LPS helye 2–8 °C között, az eredeti csomagolásban, fénytől és nedvességtől védve van. Higroszkópos, ezért a fiolát felnyitás előtt szobahőmérsékletre kell hagyni melegedni. A törzsoldat elkészítését és tárolását az adott laboratórium protokollja határozza meg.
Hogyan lehet endotoxint rendelni?
Ezt a tételt nem tartjuk folyamatosan raktáron, igény szerint szállítjuk. Elég megadni a kívánt mennyiséget és a felhasználás célját; az árat, az elérhetőséget és a tételdokumentációt e-mailben erősítjük meg. Kizárólag laboratóriumi és kutatási célra.
Kizárólag laboratóriumi és kutatási felhasználásra (RUO). Nem gyógyszer, nem étrend-kiegészítő és nem kozmetikum, emberi vagy állati fogyasztásra nem alkalmas.
