Накратко
NAD+ (никотинамид аденин динуклеотид) е коензим, който присъства във всяка жива клетка и пренася електрони в окислително-редукционните реакции на метаболизма. Химически не е пептид, а динуклеотид с молекулна маса около 663,4 Da. Най-важното в няколко реда:
- Идентичност: динуклеотид, CAS 53-84-9, окислената форма на редокс двойката NAD+/NADH
- Консуматори: сиртуините, PARP и CD38 използват NAD+ като субстрат
- Възраст: в кожа на 49 души нивото на NAD+ корелира отрицателно с възрастта (2012)
- Хора: контролираните проучвания използват прекурсорите NR и NMN, с 12 до 40 участници
- Сертификати: публикуваните сертификати на Molequa® се издават от независимата лаборатория Analyton Labs
Всичко по-долу описва публикувани данни. NAD+ от Molequa® е предназначен единствено за лабораторни изследвания (RUO).
Какво е NAD+?
NAD+ е окислената форма на никотинамид аденин динуклеотид, коензим, без който гликолизата, цикълът на Кребс и окисляването на мастните киселини не протичат. При окислителните реакции NAD+ приема хидриден йон и става NADH, а NADH отдава електроните си в дихателната верига на митохондриите.
Молекулата е описана през 1906 г. от Harden и Young като фактор от дрождеви екстракти, необходим за ферментацията. Днес литературата ѝ приписва и втора роля: NAD+ е косубстрат на сиртуините и PARP, които го разграждат, за да модифицират белтъци (Verdin 2015, Science). Нивото му се покачва и спада според приема на храна, физическото натоварване и времето от денонощието (Rajman 2018, Cell Metab).
В каталога на Molequa® NAD+ стои до пептидите, но химически е нуклеотид, по-близък до ATP, отколкото до верига от аминокиселини.
Как клетката произвежда NAD+ и какво са NR и NMN?
Клетката получава NAD+ по три пътя: синтез de novo от триптофан, пътя на Preiss-Handler от никотинова киселина и пътя на рециклиране от никотинамид. NR (никотинамид рибозид) и NMN (никотинамид мононуклеотид) са прекурсори, които влизат в пътя на рециклиране една или две стъпки преди крайния NAD+.
В пътя на рециклиране ензимът NAMPT превръща никотинамида в NMN, а ензимите NMNAT превръщат NMN в NAD+. NR първо се фосфорилира до NMN от киназите NRK (Covarrubias 2021, Nat Rev Mol Cell Biol).
Повечето изследвания работят с прекурсори, а не със самия NAD+. Фармакокинетиката на NR при хора е описана през 2016 г. в кръстосано проучване с 12 здрави доброволци: единичните приеми повишават NAD+ метаболома в кръвта дозозависимо, а NAAD се оказва чувствителен биомаркер за това повишаване (Trammell 2016, Nat Commun).
Какво измерва литературата за NAD+ с възрастта?
Литературата описва три групи ензими, които изразходват NAD+: сиртуините, PARP и NAD-азата CD38. Хипотезата е, че с възрастта консумацията нараства, а нивото на NAD+ в тъканите спада. При хора това е измерено като корелация в малки извадки, а механизмите са изследвани предимно при мишки.
- Сиртуини. Imai и колеги показаха през 2000 г., че протеинът Sir2 при дрожди и мишки е NAD-зависима хистонова деацетилаза (Imai 2000, Nature). Бозайниците имат седем сиртуина (SIRT1 до SIRT7).
- PARP. PARP-1 участва в поправката на ДНК и е основен консуматор на NAD+. При мишки без гена за PARP-1 съдържанието на NAD+ и активността на SIRT1 в мускула и кафявата мастна тъкан са по-високи (Bai 2011, Cell Metab).
- CD38. При мишки експресията и активността на CD38 нарастват с възрастта и CD38 е необходим за свързания с възрастта спад на NAD+ (Camacho-Pereira 2016, Cell Metab).
Най-цитираните данни при хора са от проби от кожа на 49 души на възраст от 0 до 77 години: нивото на NAD+ корелира отрицателно с възрастта при мъжете (r = -0,71) и при жените (r = -0,54) (Massudi 2012, PLoS One). Това е корелация в една тъкан, не доказателство за причинно-следствена връзка.
Какво е публикувано от контролирани проучвания при хора?
Рандомизираните, плацебо-контролирани проучвания при хора са малки и кратки, с до 40 участници и до 12 седмици. Те последователно показват, че прекурсорите NR и NMN повишават NAD+ или негови метаболити, а функционалните показатели дават смесени резултати. Нито едно от проучванията по-долу не изследва самия NAD+.
| Проучване | Прекурсор | Участници | Продължителност | Какво е измерено |
|---|---|---|---|---|
| Martens 2018, Nat Commun | NR | 24 души, 55 до 79 години | 2 × 6 седмици, кръстосан | NAD+ в мононуклеарни клетки с около 60 % над плацебо; кръвното налягане само като тенденция |
| Dollerup 2018, Am J Clin Nutr | NR | 40 мъже със затлъстяване | 12 седмици | инсулиновата чувствителност и телесният състав без подобрение |
| Elhassan 2019, Cell Rep | NR | 12 мъже, медиана 75 години | 21 дни, кръстосан | NAAD в мускула нараства, NAD+ в мускула не; митохондриалното дишане без разлика |
| Yoshino 2021, Science | NMN | 25 жени с преддиабет | 10 седмици | NAD+ в мононуклеарни клетки нараства, в мускула не; мускулната инсулинова чувствителност се повишава |
При NR биомаркерите се покачват, а функционалните показатели не се отличават от плацебо. Единствено Yoshino отчита положителен основен функционален показател, но без промяна в телесния състав, кръвното налягане и липидите.
Какво не е публикувано? Цитираните проучвания не свързват повишаването на NAD+ с клинично значим резултат, а данните за прекурсори не се пренасят автоматично върху самия NAD+.
Как се съхранява и проверява NAD+ лиофилизат?
NAD+ се доставя като бял лиофилизат, защото в сухо състояние е много по-стабилен, отколкото в разтвор. Прахът е хигроскопичен и се съхранява при 2 до 8 °C, защитен от светлина. Партидата се проверява чрез HPLC чистота с хроматограма и мас-спектрометрия, която потвърждава маса около 663,4 Da.
В разтвор стабилността зависи от pH: класическа работа от 1961 г. описва, че окислените пиридинови нуклеотиди като NAD+ се разграждат в алкална среда, а редуцираните като NADH в кисела (Lowry 1961, J Biol Chem). Основните продукти от разграждането на NAD+, никотинамид и ADP-рибоза, се виждат в хроматограмата като отделни пикове.
Аденинът поглъща при 260 nm, затова HPLC детекцията обикновено е при тази дължина на вълната. NADH има и максимум при 340 nm, който NAD+ няма, така че поглъщане при 340 nm издава примес от редуцираната форма.
Сертификатът за анализ трябва да съдържа номер на партидата, дата, хроматограма и маса от мас-спектрометрия. Публикуваните сертификати на Molequa® се издават от независимата лаборатория Analyton Labs и са в регистъра на сертификатите. За NAD+ наличността и състоянието на сертификата са посочени на продуктовата страница.
Къде да купите NAD+ за изследвания в България
Molequa® предлага NAD+ като референтен материал за лабораторни изследвания, в лиофилизирана форма, с експедиция от склад в Европейския съюз. Пратката до България не напуска единния пазар и не минава през митнически формалности. Наличността и документацията на партидата се проверяват на продуктовата страница.
Ако искате да купите NAD+, на продуктовата страница ще намерите разфасовките от 5 и 10 mg и актуалната наличност. В съседни изследователски теми се срещат MOTS-c, 5-Amino-1MQ, инхибитор на ензима NNMT, който метилира никотинамида, и епиталон. Останалите молекули са в каталога на Molequa®, а общото въведение е в статията какво са пептидите.
Често задавани въпроси
Какво е NAD+? Никотинамид аденин динуклеотид, коензим с маса около 663,4 Da, който пренася електрони в метаболизма и е субстрат на сиртуините, PARP и CD38. Химически е динуклеотид, не пептид.
Каква е разликата между NAD+ и NADH? NAD+ е окислената форма, която приема електрони, а NADH е редуцираната, която ги отдава. Аналитично ги различава поглъщането при 340 nm, което има само NADH.
Каква е разликата между NAD+, NR и NMN? NR и NMN са прекурсори, които клетката превръща в NAD+ по пътя на рециклиране. Контролираните проучвания при хора използват предимно тях.
Спада ли NAD+ с възрастта? В кожа на 49 души нивото на NAD+ корелира отрицателно с възрастта (Massudi 2012), а при мишки спадът е свързан с CD38 (Camacho-Pereira 2016). Това са корелации и животински данни, не доказателство при хора.
Как се съхранява NAD+ лиофилизат? При 2 до 8 °C, защитен от светлина и влага, защото прахът е хигроскопичен. В разтвор е по-малко стабилен, особено в алкална среда.
Може ли NAD+ от Molequa® да се използва при хора? Не. Това е реактив за лабораторни изследвания (RUO), не е лекарство, хранителна добавка, нито козметика, затова Molequa® не публикува схеми на приложение.
Правно уведомление: NAD+ от Molequa® е предназначен изключително за научни лабораторни изследвания (RUO), не за консумация от хора или животни, и не е лекарство, хранителна добавка, нито козметичен продукт. Статията не представлява медицински съвет.
