Kisspeptin-10

Pārskats

Kisspeptin-10, KP-10, metastīns 45-54: viena un tā pati viela

Pastāv risks sajaukt to ar kisspeptīnu-54, garāko fragmentu, kas minēts tajos pašos pētījumos. Abi ir aktīvi; šeit piedāvātais materiāls ir desmit aminoskābju forma.

Izcelsme un izstrādes iemesls

Kisspeptīna stāsts sākas negaidītā vietā. 1996. gadā pētnieku grupa Heršijā, Pensilvānijā, aprakstīja gēnu, kas nomāca melanomas šūnu metastāzes, un nosauca to par KiSS-1 (šodienas gēna simbols KISS1). Tā peptīda produktu par metastīnu vēlāk, 2001. gadā, nosauca Ohtaki grupa.

Tikai 2003. gadā kļuva skaidrs, ka tā patiesā nozīme ir citur. Divas neatkarīgas grupas, Seminara Bostonā un de Roux Parīzē, pētīja ģimenes ar pubertātes neiestāšanos un abas atrada vienu un to pašu ģenētisko defektu: neaktīvu receptoru GPR54, kura ligands, kā zināms kopš 2001. gada, ir kisspeptīns.

Tā tika identificēts līdz tam nezināms augstāka līmeņa slēdzis reproduktīvajā asī: publicētajos modeļos kisspeptīns darbojas augšpus GnRH.

Darbības mehānisms literatūrā

GPR54 aktivācija. Kisspeptīns-10 saistās ar G proteīnu saistīto receptoru GPR54 hipotalāma GnRH neironos. Aprakstītās sekas ir GnRH atbrīvošanās, kas savukārt izraisa LH un FSH sekrēciju no hipofīzes.

Pulsācija. Literatūrā uzsvērts, ka signalizācija ir pulsējoša. Publicētajos modeļos nepārtraukta iedarbība noved pie receptora desensibilizācijas, un šī shēma ir zināma arī no citām endokrīnajām asīm.

Pētījumu stāvoklis 2026. gadā

Par kisspeptīnu ir plaša literatūra: pētījumi ar cilvēkiem par gonadotropīnu atbrīvošanos (piemēram, Dhillo un kolēģu darbi) un fundamentālie pētījumi par pubertātes regulāciju.

Kā zālēm tirdzniecības atļaujas nav.

Precīza vieta hipotalāma-hipofīzes-dzimumdziedzeru asī

Tas ir galvenais punkts, no kura ir atkarīgs viss pārējais.

Kisspeptīna galvenā darbības vieta nav dzimumdziedzeri. Tas darbojas augstāk, uz hipotalāma GnRH neironiem, kas ekspresē KISS1R. Aprakstītā kaskāde noris šādi:

1. Kisspeptīna neironi, cita starpā arkveida kodolā, atbrīvo peptīdu.
2. Kisspeptīns saistās ar KISS1R uz GnRH neironiem.
3. Šie neironi impulsveidā atbrīvo GnRH.
4. Hipofīze atbild ar LH un FSH sekrēciju.
5. Dzimumdziedzeri atbild uz LH un FSH.

Kisspeptīns-10 salīdzinājumā ar garākajām formām

KISS1 gēns kodē 145 aminoskābju prekursoru, kas tiek sašķelts vairākos aktīvos fragmentos. Nosaukumi vienkārši seko garumam.

Visiem ir kopīgs C-gals, kas nodrošina receptora aktivitāti. Kisspeptīns-10 ir īsākais fragments ar pilnu afinitāti pret KISS1R.

Publicētajos darbos īsākajām formām ir īsāks eliminācijas pusperiods nekā kisspeptīnam-54.

Dokumentētās pētījumu jomas

• Reprodukcijas neiroendokrinoloģija. Ar lielu pārsvaru dominējošā joma. Pubertātes kontrole, GnRH pulsācija, sezonālā regulācija dzīvnieku modeļos.
• Onkoloģija. Vēsturiskā metastāžu nomācēja funkcija joprojām ir aktīva tēma, atsevišķa no reproduktīvās funkcijas.

Regulatīvais ietvars

Kisspeptīns-10 nav reģistrēts kā zāles nevienā jurisdikcijā.

Kisspeptin-10 iegāde: kam pievērst uzmanību

Ja iegādājies kisspeptīnu-10, izšķirošais faktors nav cena, bet kvalitātes pārbaudāmība. Pētnieciskai vielai izšķiroša ir pārbaudāma partijas kvalitāte. Šie pieci kritēriji atšķir nopietnus piegādātājus no pelēkā tirgus pārdevējiem, jo no ārpuses liofilizētais pulveris izskatās pilnīgi vienādi.

1. HPLC tīrība: pagaidām deklarēta, sertifikāts ar pirmo partiju

HPLC tīrība norāda, kādu hromatogrammas laukuma daļu aizņem galvenā virsotne; piemaisījumi redzami kā atsevišķas virsotnes. Nopietni piegādātāji vērtību dokumentē ar hromatogrammu. Tīrības vērtība bez pievienotas hromatogrammas ir apgalvojums, nevis pierādījums. Molequa® kisspeptīna-10 tīrība ≥ 99 % pašlaik ir deklarēta: Analyton Labs analīzes sertifikāts tiks publicēts kopā ar pirmo partiju, un sertifikāta statuss ir norādīts zemāk sadaļā Testu rezultāti.

2. Analīzes sertifikāts (CoA) katrai partijai

Tas ir svarīgākais dokuments. Partijas CoA attiecas tieši uz to partiju, ko saņem: ar partijas numuru, analīzes datumu un tīrības vērtību, un to izsniedz neatkarīga laboratorija. Praktisks noteikums: pērc tur, kur partijas CoA ir publicēts vai tiks publicēts ar pirmo partiju, nevis tiek izsniegts tikai „pēc pieprasījuma”.

3. Sterilitāte un endotoksīni

Pilnīgs partijas sertifikāts dokumentē arī sterilitāti un baktēriju endotoksīnus.

4. Piegāde no ES noliktavas ar izsekojamību

Piegādātājam ar ES noliktavu un pilnīgu partijas izsekojamību ir priekšrocība salīdzinājumā ar pelēkajiem importiem: īsāki piegādes ceļi, nav muitas riska.

5. Pareizā piegādes forma: liofilizāts

Kvalitatīvs materiāls tiek piegādāts kā liofilizāts, proti, sasaldējot žāvēts pulveris, nevis kā gatavs šķīdums. Sausā formā viela ir daudz stabilāka un tiek rekonstituēta tikai tieši pirms eksperimentālās izmantošanas.

Juridisks brīdinājums: kisspeptīns-10 ir pētniecības materiāls un nav zāles. Tas tiek piegādāts tikai pētnieciskiem nolūkiem (RUO) laboratorijā un nav paredzēts lietošanai cilvēkiem vai dzīvniekiem. Tam nav apstiprināta terapeitiska lietojuma.

Zinātne un pētījumi

Galvenās publikācijas

Lee J.H., Miele M.E., Hicks D.J., Phillips K.K., Trent J.M., Weissman B.E., Welch D.R. (1996). KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst. 88(23):1731–1737. PubMed 8944003 Gēna atklāšana septiņus gadus pirms tā saistīšanas ar reprodukciju (2003).

Ohtaki T., Shintani Y., Honda S. et al. (2001). Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature. 411(6837):613–617. PubMed 11385580 Ligandu un receptora savienojums.

Seminara S.B., Messager S., Chatzidaki E.E. et al. (2003). The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med. 349(17):1614–1627. PubMed 14573733 Cilvēka ģenētika, ko paralēli apstiprināja peļu modelis.

Thompson E.L., Patterson M., Murphy K.G. et al. (2004). Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol. 16(10):850–858. PubMed 15500545 Darbs, kas konkrēti attiecas uz ievadīto kisspeptīnu-10, nevis uz gēnu.

Colledge W.H. (2004). GPR54 and puberty. Trends Endocrinol Metab. 15(9):448–453. PubMed 15519892 Tā laika pārskats par 2003. gada rezultātiem.

Pētījumi sīkāk

▸ 1. pētījums: gēna atklāšana

Atsauce: Lee J.H. et al. KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst, 1996. PubMed 8944003

Ko darīja: grupa meklēja metastāžu nomācošus gēnus, strādājot ar melanomas šūnu hibrīdiem, kas ir klasiska somatiskās ģenētikas pieeja.

Ko atklāja: gēnu, kura ekspresija samazināja melanomas šūnu metastātisko spēju, nosauktu par KiSS-1.

Kāpēc tas ir svarīgi: šeit aprakstītajai funkcijai nav nekāda sakara ar reprodukciju. Tas ir noderīgs atgādinājums, ka peptīdam var būt vairākas bioloģiskas lomas bez acīmredzamas savstarpējas saiknes un ka kisspeptīna onkoloģiskā līnija turpinās.

▸ 2. pētījums: ligands un tā receptors

Atsauce: Ohtaki T. et al. Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature, 2001. PubMed 11385580

Ko darīja: izmantoja deorfanizācijas stratēģiju. GPR54 bija ar G proteīnu saistīts receptors, kura dabiskais ligands nebija zināms. Grupa meklēja endogēno molekulu, kas to aktivizē.

Ko atklāja: KiSS-1 gēns kodē C-galā amidētu 54 aminoskābju peptīdu (metastīnu) no cilvēka placentas, kas ir GPR54 receptora ligands. Īsākas formas (14 un 13 aminoskābes) ar kopīgu C-galu tajā pašā gadā aprakstīja Kotani u. c. (J Biol Chem 2001, PubMed 11457843).

Kāpēc tas ir svarīgi: šis raksts savienoja KiSS-1 gēnu ar receptoru un ir pamats turpmākajiem darbiem ar īsākiem kisspeptīna fragmentiem, ieskaitot kisspeptīnu-10.

▸ 3. pētījums: pierādījums cilvēkā

Atsauce: Seminara S.B. et al. The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med, 2003. PubMed 14573733

Ko darīja: veica ģenētisku izmeklēšanu vienā radniecīgā ģimenē, kurā vairākiem locekļiem bija idiopātisks hipogonadotrops hipogonadisms, proti, pubertātes neiestāšanās bez acīmredzama anatomiska cēloņa, un vienam nesaistītam probandam. Paralēli pētīja peles ar Gpr54 deficītu.

Ko atklāja: GPR54 inaktivējošas mutācijas skartajiem indivīdiem ar fenotipam atbilstošu segregāciju.

Kāpēc tas ir svarīgi: tas ir pierādījums cilvēkā, iegūts ar ģenētiku, nevis ar vielas ievadīšanu, un pētījums to paralēli apstiprināja pelēm ar Gpr54 deficītu. Receptora funkcijas zudums bloķē pubertāti.

▸ 4. pētījums: dekapeptīda ievadīšana

Atsauce: Thompson E.L. et al. Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol, 2004. PubMed 15500545

Ko darīja: pētīja kisspeptīna-10 ievadīšanu pa diviem atšķirīgiem ceļiem, centrālo un perifēro, pieaugušiem žurku tēviņiem, mērot gonadotropīnus.

Ko atklāja: LH palielināšanos pēc abiem ievadīšanas veidiem.

Kāpēc tas ir svarīgi: tas ir darbs, kas tieši pēta pašu dekapeptīdu, atšķirībā no pētījumiem par gēnu vai receptoru.

Uzglabāšana

Liofilizēto pulveri glabā 2–8 °C temperatūrā, sargājot no gaismas, bet ilgstošai uzglabāšanai −20 °C temperatūrā. Šādi uzglabāta, sausā veidā viela saglabājas stabila gadiem. Pēc rekonstitūcijas šķīdums jāuzglabā ledusskapī, sargājot no gaismas, un izlietojams 28 dienu laikā. Izvairies no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas.

Rezervācija

Kisspeptin-10 pašlaik ir pieejams rezervācijai. Rezervē nepieciešamo daudzumu bez saistībām, un mēs pa e-pastu apstiprināsim partiju un piegādes datumu. Rezervācijas brīdī netiek veikts nekāds maksājums.

Kombinācijas: tās pašas jomas vielas

Kisspeptīns-10 ieņem īpašu vietu: tas darbojas endokrīnās kaskādes augšgalā. Tāpēc pētniecībā jēgpilnas atsauces pārsvarā ir salīdzinājumi, nevis kombinācijas.

GnRH

Kisspeptīns un GnRH iedarbojas uz vienu un to pašu kaskādi dažādos līmeņos; literatūrā kisspeptīnu salīdzina ar GnRH.

Vielmaiņas pētniecība

Publicētu datu par kisspeptīna-10 kombinācijām ar citiem kataloga peptīdiem nav.

Metodoloģiska piezīme

Vairāku peptīdu, kas iedarbojas uz vienu un to pašu asi, publicētu datu par kombinācijām nav, tāpēc rezultātu interpretācija ir ierobežota.

Galvenie zinātniskie dati un atsauces

„GPR54 mutācijas izraisa autosomāli recesīvu idiopātisku hipogonadotropu hipogonadismu cilvēkiem un pelēm, tātad šis receptors ir nepieciešams normālai GnRH fizioloģijai un pubertātei.” Pēc Seminara S.B. et al. (2003), New England Journal of Medicine 349(17):1614–1627 PubMed 14573733

Būtiskākie dati no literatūras

• KiSS-1 gēna atklāšana: 1996, Lee un kolēģi, melanomas kontekstā
• GPR54 liganda identificēšana: 2001, Ohtaki un kolēģi, Nature
• Lomas pierādījums cilvēka pubertātē: 2003, Seminara un kolēģi, NEJM
• KISS1 kodētā prekursora garums: 145 aminoskābes
• Aprakstītie aktīvie fragmenti: kisspeptīns 54, 14, 13 un 10
• Receptors: KISS1R, agrāk GPR54, ar G proteīnu saistīts receptors
• Darbības vieta: hipotalāma GnRH neironi
• Nosaukuma izcelsme: Hershey’s Kisses Heršijā, Pensilvānijā

Dati no citētajiem pētījumiem

• Gēna atklāšana (Lee 1996, J Natl Cancer Inst 88(23):1731–1737): cilvēka 6. hromosomas pārnese melanomas līnijās C8161 un MelJuSo nomāca to spēju metastazēt vismaz par 95 %, neietekmējot tumorigenitāti. Tieši no šīm šūnām tika izolēta cDNS, kas nosaukta par KiSS-1
• Peptīda identificēšana (Ohtaki 2001, Nature 411(6837):613–617): KiSS-1 kodē 54 aminoskābju peptīdu, amidētu C-galā, izolētu no cilvēka placentas un nosauktu par metastīnu. Tas ir orfānā receptora hOT7T175, tagad KISS1R, endogēnais ligands
• Pubertātes ģenētika (Seminara 2003, NEJM 349(17):1614–1627): radniecīgā ģimenē konstatēta homozigota L148S mutācija GPR54 un nesaistītam probandam R331X un X399R. COS-7 šūnu transfekcija ar mutantiem konstruktiem radīja ievērojami mazāku inozitola fosfāta uzkrāšanos
• Kur peptīds darbojas (Thompson 2004, J Neuroendocrinol 16(10):850–858): pieaugušiem žurku tēviņiem 3 nmol kisspeptīna-10 i.c.v. devas paaugstināja plazmas LH 10., 20. un 60. minūtē, FSH 60. minūtē un kopējo testosteronu 20. un 60. minūtē
• Tajā pašā darbā 100–1000 nM kisspeptīna-10 koncentrācijas neietekmēja LH vai FSH atbrīvošanos no hipofīzes priekšējās daivas fragmentiem in vitro. Darbība tātad, visticamāk, ir hipotalāma, nevis hipofīzes.
• Peles bez GPR54 (Colledge 2004, Trends Endocrinol Metab 15(9):448–453): pubertāte neiestājas, tām ir nenobrieduši reproduktīvie orgāni un zemi dzimumsteroīdi, bet normāls hipotalāma GnRH līmenis
• Kā zālēm tirdzniecības atļaujas nav

Atsauču avoti (PubMed)

1. Lee J.H. et al. (1996). KiSS-1, a novel human malignant melanoma metastasis-suppressor gene. J Natl Cancer Inst 88(23):1731–1737. PubMed 8944003
2. Ohtaki T. et al. (2001). Metastasis suppressor gene KiSS-1 encodes peptide ligand of a G-protein-coupled receptor. Nature 411(6837):613–617. PubMed 11385580
3. Seminara S.B. et al. (2003). The GPR54 gene as a regulator of puberty. N Engl J Med 349(17):1614–1627. PubMed 14573733
4. Thompson E.L. et al. (2004). Central and peripheral administration of kisspeptin-10 stimulates the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. J Neuroendocrinol 16(10):850–858. PubMed 15500545
5. Colledge W.H. (2004). GPR54 and puberty. Trends Endocrinol Metab 15(9):448–453. PubMed 15519892

Regulatīvais statuss: kisspeptīns-10 nav reģistrēts kā zāles nevienā jurisdikcijā. Šeit piedāvātais produkts ir reaģents, kas paredzēts tikai zinātniskiem pētījumiem laboratorijā (RUO).

Biežāk uzdotie jautājumi par Kisspeptin-10

Kas ir kisspeptīns-10?

Kisspeptīns-10 ir īsākais pilnībā aktīvais peptīdhormona kisspeptīna fragments, ko kodē KISS1 gēns. Tas atbilst metastīna (kisspeptīna-54) 45.–54. aminoskābēm, tas ir, 145 aminoskābju prekursora 112.–121. aminoskābēm, un saistās ar receptoru GPR54, ko sauc arī par KISS1R.

Kāpēc to sauc par kisspeptīnu?

Nosaukums cēlies no atklāšanas vietas: KISS1 gēns tika aprakstīts 1996. gadā Heršijā, Pensilvānijā, kā metastāžu nomācošs gēns un nosaukts pēc tur ražotajām Hershey’s Kisses konfektēm. Nosaukumu metastīns peptīdam 2001. gadā deva Ohtaki grupa.

Kāda ir kisspeptīna loma pētniecībā?

Seminara un de Roux 2003. gada darbi parādīja, ka GPR54 receptora defekti izraisa pubertātes neiestāšanos. Tādējādi kisspeptīns tika identificēts kā gonadotropīnu ass augstāka līmeņa slēdzis, augšpus GnRH.

Vai kisspeptīns-10 ir reģistrēts?

Nē. Kisspeptīns-10 nav reģistrētas zāles, un tas tiek piegādāts tikai kā materiāls pētījumiem laboratorijā.

Ar ko atšķiras kisspeptīns-10 un kisspeptīns-54?

Tie ir divi viena prekursora fragmenti ar vienu un to pašu aktīvo C-galu. Kisspeptīns-54, saukts arī par metastīnu, ir garā forma, kas izolēta pirmā. Kisspeptīns-10 ir īsākais fragments, kas saglabā afinitāti pret receptoru. Aprakstītie eliminācijas pusperiodi ir atšķirīgi, un tam ir nozīme eksperimentāla protokola plānošanā.

Vai kisspeptīns darbojas uz dzimumdziedzeriem?

Pārsvarā ne tieši. Aprakstītajos modeļos tas darbojas uz hipotalāma GnRH neironiem, tas ir, kaskādes augšgalā. Dzimumdziedzeri pēc tam atbild uz hipofīzes gonadotropīniem.

Kas ir GPR54?

Tas ir kisspeptīna receptora vecais nosaukums, tagad KISS1R. Līdz 2001. gadam tas bija orfānais receptors, kura dabiskais ligands nebija zināms.

Vai pierādījumu līmenis ir stabils?

Lomai pubertātē pierādījumi balstās uz cilvēka ģenētiku, ar funkcijas zuduma mutācijām un skaidru fenotipu. Tomēr šie ģenētiskie dati nav dati par eksogēna kisspeptīna-10 iedarbību; produkts paredzēts tikai laboratorijas pētījumiem (RUO).