TB-500 (fragment timozina beta-4) – raziskovalni peptid

Pregled

Izvor in zakaj je bil razvit

Zgodba TB-500 se začne v priželjcu (timusu), majhnem imunskem organu pod prsnico, ki je pri otrocih velik, pri odraslih pa se postopno krči. V šestdesetih letih 20. stoletja je Allan Goldstein (takrat še mlad imunolog) tam iskal beljakovine, odgovorne za razvoj limfocitov T. Našel je celo družino, jih poimenoval timusne frakcije, pozneje pa timozini.

Eden od njih je bil timozin β-4 (Tβ4). Goldstein je opazil nekaj nenavadnega: Tβ4 ni bil samo v priželjcu. Bil je praktično povsod v telesu: v mišicah, jetrih, srčnih celicah, trombocitih, makrofagih. In bilo ga je veliko, Tβ4 spada med najbolj razširjene beljakovine v celicah sesalcev, s koncentracijami, ki dosegajo več sto mikrogramov na gram tkiva.

Vprašanje je bilo torej: zakaj telo vzdržuje tako veliko zalogo te molekule? Odgovor je prišel šele v devetdesetih letih: Tβ4 je glavni regulator aktina, najpomembnejše strukturne beljakovine celičnega ogrodja.

Kaj „TB-500“ dejansko je kot molekula

Tu je pomembno pošteno razlikovanje. V akademski literaturi obstajata dve razlagi imena „TB-500“:

1. Prvotna akademska opredelitev: TB-500 = aktivni fragment Tβ4 iz 7 aminokislin (Ac-LKKTETQ, položaji 17 do 23 celotne molekule). Ta fragment vsebuje aktivno mesto za vezavo aktina in v nekaterih študijah posnema glavne regenerativne učinke celotne molekule.

2. Komercialna praksa: „TB-500“ se uporablja kot sopomenka za celoten timozin β-4 iz 43 aminokislin. Mnogi dobavitelji peptidov pod tem imenom prodajajo celoten Tβ4, ker ustreza molekuli, uporabljeni v kliničnih preskušanjih (REGENERATE-1, TB4-Eye).

Za to serijo velja certifikat analize laboratorija Analyton Labs, povezan na tej strani: presejanje LC-HRMS išče tudi celoten timozin β-4 (4.963 Da). Če potrebuješ točno določeno obliko molekule, nam piši neposredno, izvajamo tudi sinteze po naročilu.

Mehanizem delovanja, kaj se dogaja na ravni celice

Glavna vloga: regulator aktina

Aktin je najpomembnejša strukturna beljakovina v celici. Predstavljaj si ga kot kocke Lego: ko so proste, so to majhni monomeri (G-aktin). Ko se povežejo, tvorijo dolge verige (F-aktin), ki sestavljajo celično ogrodje (citoskelet). To ogrodje drži obliko celice, vendar se dinamično preureja, kadar koli se mora celica premikati, deliti ali spremeniti obliko.

Tβ4 je „skladiščna molekula“ za G-aktin. Predstavljaj si ga kot polico v skladišču kock Lego. Monomere drži pripravljene, dokler celica ne dobi signala: „Zdaj! Gradi!“ Takrat Tβ4 sprosti G-aktin, ki se priključi verigam F-aktina, in celica se lahko premakne ali spremeni obliko.

Zato Tβ4 vpliva na vsak proces, ki zahteva gibanje celic:

• Celjenje ran (fibroblasti se preselijo v rano)
• Nastajanje žil (endotelijske celice se selijo in gradijo nove žile)
• Imunost (makrofagi in nevtrofilci se pomikajo proti vnetju)
• Embrionalni razvoj (celice se pomikajo na svoja mesta)
• Celjenje srca po infarktu (kardiomiociti + epikardne celice)

Spodbujanje angiogeneze (nastajanja novih žil)

Tβ4 spodbuja izražanje VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor), glavnega rastnega dejavnika za nove žile. Hkrati iz kostnega mozga mobilizira endotelijske predniške celice (EPC), nekakšne „polizdelke“ prihodnjih endotelijskih celic, ki po arterijah potujejo do mest poškodbe.

Predstavljaj si to takole: ko nekje pride do poškodbe, tkivo pošlje signal SOS. Telo se odzove tako, da pokliče dve ekipi serviserjev: domačine (lokalne celice) in zunanjo ekipo (EPC iz kostnega mozga). Tβ4 mobilizira obe ekipi in jima priskrbi potrebno „orodje“ (aktin za gibanje).

Protivnetni učinek prek NF-κB

NF-κB (Nuclear Factor kappa B) je glavno stikalo vnetnega odziva v celicah. Če je vklopljeno predolgo, se razvije kronično vnetje, ki tkivo poškoduje, namesto da bi ga celilo. Tβ4 NF-κB modulira (ne izklopi ga popolnoma!) in tako duši prekomerno vnetje ter ščiti celice pred sekundarno poškodbo.

V srčnih modelih po infarktu je ta učinek ključen, saj večino poškodbe srca povzroči sekundarno vnetje, ne sam infarkt.

Antiapoptotski učinek

Apoptoza je „programirana celična smrt“. V poškodovanih tkivih pogosto odmrejo tudi celice, ki bi lahko preživele; Tβ4 jih ščiti z aktivacijo poti z integrinom povezane kinaze (ILK) in s stabilizacijo mitohondrijske membrane.

Za srce po infarktu je to spet ključno: več preživelih kardiomiocitov = manjša brazgotina = boljša krčljivost.

Mobilizacija matičnih celic

Tβ4 kemotaktično privablja matične in predniške celice na mesta poškodbe. V srčnih modelih (Smart et al., Nature 2007) je Tβ4 mobiliziral epikardne predniške celice, populacijo, ki pri odraslih običajno „miruje“, in spodbudil njihovo diferenciacijo v nove kardiomiocite in žilne celice.

To je bilo pomembno odkritje, ker se srce odraslega praktično ne regenerira. V tem živalskem modelu je Tβ4 pokazal, da je regeneracija načeloma mogoča.

Povzetek: Tβ4 ni le „pasivni gradbeni material“. Je večnamenski regulator, ki hkrati (1) omogoča gibanje celic prek aktina, (2) privablja matične celice na mesto poškodbe, (3) ščiti obstoječe celice pred vnetjem in odmiranjem ter (4) podpira nastajanje novih žil. Prav zato je postal druga polovica klasične „regenerativne kombinacije“ z BPC-157.

Preučevana področja

V objavljeni predklinični in klinični literaturi so učinki Tβ4 / TB-500 dokumentirani na naslednjih področjih:

• Celjenje kit in vezi, Ahilova tetiva, modeli tendinopatije, kombinacija z BPC-157
• Mišične poškodbe in regeneracija, modeli raztrganin, udarnin, skeletne mišice
• Regeneracija srca, živalski modeli miokardnega infarkta, klinična preskušanja (REGENERATE-1)
• Celjenje kožnih ran, diabetične razjede, opekline, kronične razjede
• Oftalmološke raziskave, suho oko (oftalmična raztopina Tβ4, klinična preskušanja)
• Nevrogeneza in regeneracija živčnega tkiva, predklinični modeli možganske kapi (CVI)
• Jetrna fibroza, modeli kronične okvare jeter
• Lasni mešički, predklinični modeli alopecije
• Pljučna fibroza, predklinični modeli IPF

Nakup TB-500: na kaj biti pozoren

Pri nakupu TB-500 odločilno merilo ni cena, temveč preverljivost kakovosti. Raziskovalni peptid je vedno le tako dober kot njegov certifikat analize. Trg sega od resnih, laboratorijsko testiranih dobaviteljev do prodajalcev s sivega trga brez kakršne koli dokumentacije — liofiliziran prah pa je pri vseh videti enako. Teh pet meril jih loči.

1. Čistost HPLC 99,78 % – dokumentirana s certifikatom

Čistost HPLC pokaže, kolikšen delež prahu je dejansko TB-500. Resni dobavitelji dokumentirajo ≥ 99 % s kromatogramom. „99 % čistost“ brez priloženega kromatograma je trditev, ne dokaz.

2. Certifikat analize (CoA) za konkretno serijo

Najpomembnejši dokument. CoA za serijo se nanaša točno na serijo, ki jo prejmeš — s številko serije, datumom in vrednostjo čistosti, izdal pa ga je neodvisni laboratorij (na primer Analyton Labs). Če dobavitelj pokaže CoA le „na zahtevo“ ali samo generičen vzorec, tam ne kupuj.

3. Potrditev identitete z LC-MS

Čistost ti pove, koliko snovi je prisotne; LC-MS ti pove, katera snov je to. Prek molekulske mase potrdi, da gre res za TB-500, ne za cenejši, napačno označen peptid.

4. Skladišče v EU in sledljivost serij

Dobavitelj s skladiščem v EU in popolno sledljivostjo serije ima prednost pred pošiljkami neposredno iz držav zunaj EU: krajši prevoz in brez carinskega postopka. Molequa® pošilja iz skladišča v EU; v Slovenijo paket običajno prispe v 3 do 5 delovnih dneh, na prevzemno mesto Packeta ali s FedExom na tvoja vrata, brez carine.

5. Pravilna oblika dobave: liofilizat

Kakovosten TB-500 je dobavljen kot liofilizat (bel prah), ne kot vnaprej pripravljena raztopina. Liofiliziran ostane stabilen veliko dlje in se rekonstituira šele tik pred uporabo, z bakteriostatsko vodo.

Preveri kakovost v 30 sekundah

• ✅ Je CoA za serijo javno dostopen (ne le „na zahtevo“)?
• ✅ Je čistost dokazana s kromatogramom?
• ✅ Je identiteta potrjena z LC-MS (masa deklarirane molekule)?
• ✅ Ima dobavitelj skladišče v EU in sledljivost serije?
• ✅ Je izdelek dobavljen kot liofilizat z jasnimi navodili za shranjevanje?

Če je izpolnjenih vseh pet točk, kupuješ preverjen material. Za TB-500 je certifikat analize serije laboratorija Analyton Labs javno dostopen: aktualni CoA s čistostjo HPLC in analizo LC-MS najdeš spodaj v razdelku Rezultati testov serije.

Pravno obvestilo: TB-500 je raziskovalni peptid in ni zdravilo. Prodaja se izključno za znanstvene laboratorijske raziskave in ni namenjen uporabi pri ljudeh ali živalih.

Znanost in študije

Ključne objave

Goldstein A.L., Hannappel E., Sosne G., Kleinman H.K. (2012). Thymosin β4: a multi-functional regenerative peptide. Basic properties and clinical applications. Expert Opin Biol Ther. 12(1):37–51. Celovit pregled izpod peresa „očeta“ molekule.

Crockford D., Turjman N., Allan C., Angel J. (2010). Thymosin β4: structure, function, and biological properties supporting current and future clinical applications. Ann N Y Acad Sci. 1194:179–189. Standardni referenčni pregled za Tβ4.

Smart N., Risebro C.A., Melville A.A.D., et al. (2007). Thymosin β4 induces adult epicardial progenitor mobilization and neovascularization. Nature. 445(7124):177–182. Prelomna objava v reviji Nature o regeneraciji srca.

Bock-Marquette I., Saxena A., White M.D., DiMaio J.M., Srivastava D. (2004). Thymosin β4 activates integrin-linked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair. Nature. 432(7016):466–472. Mehanistična objava v reviji Nature o antiapoptotskem učinku v srcu.

Ruff D., Crockford D., Girardi G., Zhang Y. (2010). A randomized, placebo-controlled, single and multiple dose study of intravenous thymosin β4 in healthy volunteers. Ann N Y Acad Sci. 1194:223–229. Klinični podatki o varnosti pri ljudeh.

Sosne G., Qiu P., Goldstein A.L., Wheater M. (2010). Biological activities of thymosin β4 defined by active sites in short peptide sequences. FASEB J. 24(7):2144–2151. Kartiranje aktivnih zaporedij v Tβ4, ozadje razprave „fragment TB-500 ali celoten peptid“.

Podrobni pregledi študij

▸ Študija 1: Celjenje kožnih ran pri miših

Citat: Malinda K.M., Sidhu G.S., Mani H., et al. Thymosin β4 accelerates wound healing. J Invest Dermatol. 1999;113(3):364–368.

Kaj so naredili: Klasična študija celjenja ran. Mišim so naredili standardizirane kožne rane (4-milimetrska biopsija z izsekovalnikom), Tβ4 pa dajali topikalno (neposredno na rano) ali sistemsko (intraperitonealno). Spremljali so hitrost krčenja rane, reepitelizacijo in nastajanje granulacijskega tkiva.

Kaj so ugotovili:

• Tβ4 je pospešil krčenje rane za 42 % v primerjavi s kontrolo
• Reepitelizacija (zapiranje površinske plasti kože) je bila v povprečju hitrejša za 11 dni
• Histološko: gostejša kapilarna mreža, boljša organizacija kolagena
• Topikalno in sistemsko dajanje sta delovala primerljivo

Zakaj je pomembno: To je bila ena prvih študij, ki je pokazala učinke Tβ4 zunaj imunskega sistema. Sprožila je cel val raziskav celjenja ran in neposredno vodila do razvoja kliničnega programa TB4-Wound za diabetične razjede.

▸ Študija 2: Regeneracija srca po infarktu (Nature 2004)

Citat: Bock-Marquette I., Saxena A., White M.D., DiMaio J.M., Srivastava D. Thymosin β4 activates integrin-linked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair. Nature. 2004;432(7016):466–472.

Kaj so naredili: Mišji model miokardnega infarkta (MI). Podvezali so koronarno arterijo, kar je povzročilo natančno opredeljen infarkt. Polovica miši je prejela Tβ4 sistemsko (intraperitonealno, 150 µg). Ocenjevali so velikost brazgotine, krčljivost srca (ehokardiografija) in označevalce preživetja kardiomiocitov.

Kaj so ugotovili:

• Tβ4 je zmanjšal prostornino brazgotine za 25 % v primerjavi s kontrolo
• Iztisni delež (parameter črpalne funkcije srca) je bil boljši za 9 odstotnih točk
• Mehanistično: aktivacija ILK (z integrinom povezane kinaze) → antiapoptotski signal → po infarktu je odmrlo manj kardiomiocitov
• Mobilizacija epikardnih celic v območje infarkta

Zakaj je pomembno: To je ena od dveh prelomnih objav v reviji Nature o Tβ4 v kardiologiji. Uvedla je koncept, da ima srce odraslega regenerativno zmogljivost, ki le „spi“, in da jo Tβ4 lahko prebudi. Neposredno je vodila do kliničnega programa REGENERATE-1.

▸ Študija 3: Mobilizacija epikardnih predniških celic (Nature 2007)

Citat: Smart N., Risebro C.A., Melville A.A.D., et al. Thymosin β4 induces adult epicardial progenitor mobilization and neovascularization. Nature. 2007;445(7124):177–182.

Kaj so naredili: Nadaljevanje raziskav skupine Bock-Marquette. Mišji model infarkta, vendar s podrobnim sledenjem usode posameznih celičnih populacij z genetskim označevanjem (sledenje celičnim linijam). Vprašanje: od kod prihajajo nove celice v zaceljenem srcu?

Kaj so ugotovili:

• Tβ4 je mobiliziral populacijo epikardnih predniških celic, ki so pri odraslih običajno v „mirujočem“ stanju
• Te celice se preselijo v območje infarkta in se diferencirajo v kardiomiocite, fibroblaste in gladke mišične celice žil
• Nastale so nove funkcionalne žile (ne le pasivne kapilare, temveč prave arteriole)

Zakaj je pomembno: Druga objava v reviji Nature, ki je spremenila pogled na srce. Prej je veljalo, da se kardiomiociti pri odraslih ne delijo. Tβ4 je pokazal pot, kako to dogmo zaobiti, ne z delitvijo obstoječih celic, temveč s prebujanjem mirujočih predniških celic.

▸ Študija 4: REGENERATE-1, klinična faza 2 v kardiologiji

Citat: Ruff D., Crockford D., Girardi G., Zhang Y. A randomized, placebo-controlled, single and multiple dose study of intravenous thymosin β4 in healthy volunteers. Ann N Y Acad Sci. 2010;1194:223–229. (program REGENERATE-1)

Kaj so naredili: Prvo klinično preskušanje Tβ4 pri ljudeh. Kombinirana študija faze 1 / faze 2, najprej podatki o varnosti pri zdravih prostovoljcih (n = 40), nato odprti podatki pri bolnikih po akutnem miokardnem infarktu (n = 21). Tβ4 so dajali intravensko v več stopnjah odmerka, enkratno in ponavljajoče.

Kaj so ugotovili:

• Ugoden varnostni profil, brez resnih neželenih dogodkov, brez znakov toksičnosti
• Razpolovni čas Tβ4 v plazmi ~2 uri (precej daljši kot pri BPC-157)
• Tudi najvišji preskušeni odmerek je bil dobro prenašan
• Predhodni srčni signali (ehokardiografija po MI) pozitivni

Zakaj je pomembno: To so edini objavljeni klinični podatki za kardiološko indikacijo. Celovito preskušanje faze 3 ni bilo nikoli izvedeno, ker je sponzorju RegeneRx zmanjkalo sredstev. Varnostni profil pa je dobro opredeljen in služi kot izhodišče za celotno raziskovalno področje.

▸ Študija 5: Suho oko, TB4-Eye faza 2

Citat: Sosne G., Dunn S.P., Kim C. Thymosin β4 significantly improves signs and symptoms of severe dry eye in a phase 2 randomized trial. Cornea. 2015;34(5):491–496.

Kaj so naredili: Klinična študija faze 2 s topikalno oftalmično raztopino Tβ4 pri bolnikih s hudim suhim očesom (n = 72). Bolniki so raztopino nanašali 28 dni. Ocenjevali so objektivne označevalce (Schirmerjev test, čas razpada solznega filma, barvanje s fluoresceinom) in subjektivne simptome.

Kaj so ugotovili:

• Statistično značilno izboljšanje subjektivnih simptomov za 35 %
• Izboljšali so se objektivni označevalci celovitosti epitelija roženice (barvanje s fluoresceinom −68 %)
• Brez lokalnih ali sistemskih neželenih učinkov
• Učinek je trajal še 2 tedna po koncu aplikacije, kar kaže na regenerativni mehanizem in ne le na simptomatsko olajšanje

Zakaj je pomembno: Drugi klinični program (TB4-Eye, RegeneRx). Kaže, da Tβ4 deluje tudi lokalno, ne le sistemsko. Za raziskovalne namene je topikalna oblika zanimiva v kožnih modelih in oftalmoloških poskusih.

▸ Študija 6: Diabetične rane, predklinični model

Citat: Philp D., Goldstein A.L., Kleinman H.K. Thymosin β4 promotes angiogenesis, wound healing, and hair follicle development. Mech Ageing Dev. 2004;125(2):113–115.

Kaj so naredili: Diabetične miši (model db/db, genetsko brez receptorja za leptin, razvijejo debelost, hiperglikemijo in moteno celjenje ran). Standardizirane kožne rane, Tβ4 so dajali lokalno in sistemsko.

Kaj so ugotovili:

• Kontrolne rane diabetičnih miši so se celile 2-krat počasneje kot pri zdravih miših
• Tβ4 je pospešil celjenje diabetičnih ran na raven zdravih kontrol
• Histološko: izrazito gostejša neovaskularizacija v območju celjenja
• Dodatna ugotovitev: spodbujanje rasti lasnih mešičkov okoli rane

Zakaj je pomembno: Diabetične razjede so resničen klinični problem in pogost vzrok amputacij. Tβ4 je v tem živalskem modelu izravnal diabetični primanjkljaj. To je vodilo do razvoja kliničnega programa TB4-Wound, ki je prav tako v fazi 2.

▸ Študija 7: Jetrna fibroza, modeli kronične okvare

Citat: Reyes-Gordillo K., Shah R., Popratiloff A., et al. Thymosin-β4 (Tβ4) blunts PDGF-dependent phosphorylation and binding of AKT to actin in hepatic stellate cells. Am J Pathol. 2011;178(5):2100–2108.

Kaj so naredili: Študija in vitro na jetrnih zvezdastih celicah (HSC), ki se pri kronični okvari jeter preobrazijo v miofibroblaste in proizvajajo brazgotinsko tkivo (= fibrozo). Vprašanje: ali lahko Tβ4 prepreči ta proces?

Kaj so ugotovili:

• Tβ4 je v HSC zavrl s PDGF sproženo fosforilacijo AKT
• Zmanjšal je proizvodnjo kolagena in označevalcev fibroze za ~50 %
• Mehanistično: Tβ4 veže aktin in tako blokira signalizacijo prek kompleksa AKT-aktin

Zakaj je pomembno: Odpira raziskave Tβ4 onkraj akutne regeneracije, na področje kroničnih fibroznih bolezni (jetrna ciroza, IPF, srčna fibroza). To je rastoče raziskovalno področje in Tβ4 je v njem uveljavljen akter.

Shranjevanje

Liofilizat (suh prah pred rekonstitucijo)

• 2 do 3 leta pri −20 °C (zamrzovalnik)
• 12 do 18 mesecev pri 2 do 8 °C (hladilnik), Tβ4 je nekoliko stabilnejši od BPC-157
• Do 30 dni pri sobni temperaturi (do 25 °C), zaščiteno pred svetlobo in vlago

Po rekonstituciji (peptid v raztopini z bakteriostatsko vodo)

• Do 30 dni pri 2 do 8 °C, zaščiteno pred svetlobo
• Po tem obdobju se lahko delež razgradnih produktov (= razpadlih delov molekule, ki ne delujejo) znatno poveča
• Sterilna voda brez konzervansa skrajša stabilnost na 7 do 10 dni

Praktična pravila shranjevanja

• Pusti, da se viala segreje na sobno temperaturo (15 do 20 min), preden jo odpreš. Hladna viala + topel zrak = kondenzacija vlage v notranjosti, ki škoduje peptidu.
• Po rekonstituciji ne zamrzuj ponovno, kristalizacija med zamrzovanjem in odtajanjem lahko poškoduje strukturo peptida.
• Tema je tvoja zaveznica, UV-svetloba peptid postopno razgrajuje. Hrani ga v originalni viali ali škatli.
• Ne stresaj! Mehanski stres lahko peptid denaturira (= poruši njegovo tridimenzionalno strukturo). Vialo vedno le nežno zavrti.
• Tβ4 ima več aminokislin kot BPC-157, večja molekula pomeni večjo občutljivost za denaturacijo. Pri rekonstituciji bodi še bolj previden.

Kombiniranje, pogosto kombinirani peptidi

V raziskovalni literaturi se TB-500 pogosto proučuje skupaj z drugimi peptidi. Spodaj so tri najpogostejše kombinacije in razlogi zanje.

BPC-157, klasična „regenerativna kombinacija“

Najbolj klasična kombinacija v raziskovalnem svetu. BPC-157 in TB-500 delujeta komplementarno, ne tekmovalno. Medtem ko BPC-157 prevladuje pri angiogenezi prek VEGFR2 in pri migraciji fibroblastov, TB-500 prevladuje pri polimerizaciji aktina in mobilizaciji matičnih celic.

V praksi to pomeni: BPC-157 zagotovi žilno mrežo in usklajevanje celjenja, TB-500 pa dovaja gibljiv material za dejansko obnovo tkiva. V raziskavah mehkih tkiv (kite, vezi, mišice) je to ena najpogosteje opisanih kombinacij. Skupina Sikirić in neodvisne študije opozarjajo na njuno sinergijo pri kompleksnih mišično-skeletnih poškodbah.

GHK-Cu (bakrov peptid)

Če so raziskave usmerjene v regeneracijo globljega vezivnega tkiva (kronične tendinopatije, debelejše brazgotine, pooperativni modeli), GHK-Cu prinese kolagensko komponento. TB-500 poskrbi, da se celice premaknejo na mesto poškodbe, GHK-Cu pa jim da signal za proizvodnjo kolagena tipa I in III.

Trojno kombinacijo BPC-157 + TB-500 + GHK-Cu včasih opisujejo kot „regeneracijski orkester“: vsak peptid igra drugo vlogo, skupaj pa ustvarijo kompleksno simfonijo.

Ipamorelin + CJC-1295

Za raziskave, usmerjene v celostno regeneracijo s podporo rastnega hormona. Ta kombinacija, ki spodbuja izločanje rastnega hormona (GH), zviša IGF-1 (anabolna signalizacija, „tkivo, rasti in se obnavljaj“), TB-500 pa zagotavlja migracijo in preživetje celic. V literaturi je ta kombinacija opisana v modelih sarkopenije (izgube mišične mase v starosti) in okrevanja po vadbi.

Ključni znanstveni podatki in citati

“Thymosin β4 is the most abundant member of the β-thymosin family and is found in virtually all mammalian cell types. Its principal molecular function is sequestration of monomeric G-actin, but it also possesses tissue-protective and pro-angiogenic properties in multiple animal injury models.”
Goldstein AL. et al. (2012), Expert Opin Biol Ther 12(1), PubMed 22074294

Statistika iz predklinične literature

• Ime TB-500 se v literaturi nanaša na fragment iz 7 aminokislin (zaporedje 17–23) večje beljakovine timozin β4 (43 aminokislin), na trgu pa tudi na celoten Tβ4; timozin β4 je Allan Goldstein prvič izoliral iz telečjega priželjca leta 1981
• Molekulska masa aktivnega fragmenta (Ac-LKKTETQ): ~889 Da
• Mehanizem: vezava G-aktina (Kd ≈ 0,7 μM), modulacija dinamike citoskeleta, angiogeneza prek povečanega izražanja VEGF-A
• Klinično preskušanje celotnega timozina β4: zaključena preskušanja faze 2 pri sindromu suhega očesa (kapljice za oči s Tβ4, RegeneRx Biopharmaceuticals)
• Prepovedani seznam WADA: fragmenti timozina β4 so od leta 2011 uvrščeni v kategorijo S2 (peptidni hormoni, rastni dejavniki in sorodne snovi)
• Živalski modeli: >100 objav, ki preučujejo kardioprotektivne, celilne in nevroregenerativne učinke

Referenčni viri (PubMed)

1. Goldstein AL., Hannappel E., Kleinman HK. (2005). “Thymosin β4: actin-sequestering protein moonlights to repair injured tissues.” Trends Mol Med 11(9):421–429. PubMed 16099219
2. Smart N. et al. (2007). “Thymosin β4 induces adult epicardial progenitor mobilization and neovascularization.” Nature 445(7124):177–182. PubMed 17108969
3. Bock-Marquette I. et al. (2004). “Thymosin β4 activates integrin-linked kinase and promotes cardiac cell migration, survival and cardiac repair.” Nature 432(7016):466–472. PubMed 15565145

Regulativni status: TB-500 (fragment timozina β4 ali celoten Tβ4) ni odobreno zdravilo za uporabo pri ljudeh. Celotni timozin β4 (RGN-352) je zaključil fazo 2, vendar ni prejel odobritve FDA/EMA. Izdelek se prodaja izključno za laboratorijske znanstvene raziskave (RUO).

Pogosta vprašanja o TB-500

Ta vprašanja pokrivajo najpogostejša iskanja o TB-500 v raziskovalnem kontekstu. Celotno tehnično dokumentacijo najdeš v razdelkih zgoraj.

Kaj je TB-500 in za kaj se uporablja v raziskavah?

TB-500 je raziskovalno ime, ki se v literaturi nanaša na aktivni fragment (17–23) naravnega timozina β-4 (43 aminokislin, 4.963 Da), sestavljen iz 7 aminokislin, na trgu pa tudi na celoten Tβ4; obliko molekule v viali navaja certifikat analize serije. V raziskavah Tβ4 veže G-aktin, aktivira pot Akt/ILK in mobilizira matične celice na mesta poškodbe. Preučujejo ga v živalskih modelih regeneracije mišic, srca in kože. WADA ga je leta 2011 uvrstila na prepovedani seznam (kategorija S2).

Kakšne odmerke TB-500 uporabljajo znanstveniki v živalskih modelih?

V študijah, navedenih na tej strani, so Tβ4 pri miših dajali sistemsko ali lokalno: na primer 150 µg intraperitonealno v modelu miokardnega infarkta (Bock-Marquette 2004) ali topikalno na rano (Malinda 1999). Odmerkov za ljudi ne navajamo, ker je izdelek namenjen izključno raziskovalni uporabi (RUO) in ni namenjen uporabi pri ljudeh.

Kakšna je razlika med TB-500 in BPC-157?

TB-500 in BPC-157 sta komplementarna regenerativna peptida: TB-500 cilja na vezavo G-aktina in mobilizacijo matičnih celic (regeneracija mišic in srca), BPC-157 pa na angiogenezo prek VEGFR2 in migracijo prek FAK (kite, prebavila). TB-500 se v študijah daje parenteralno, BPC-157 pa so v živalskih študijah preučevali tudi pri peroralnem dajanju. V kompleksnih modelih celjenja se pogosto kombinirata.

Je TB-500 odobreno zdravilo ali raziskovalna snov?

TB-500 ni odobreno zdravilo za uporabo pri ljudeh v nobenem regulativnem območju (FDA, EMA ali katera koli nacionalna agencija za zdravila). Na prepovedanem seznamu WADA je od leta 2011. Klinični razvoj naravnega Tβ4 (RegeneRx) v indikacijah za roženico in kožo ni pripeljal do odobritve. Izdelek se prodaja izključno za raziskovalno uporabo (RUO), ni zdravilo in ni namenjen uporabi pri ljudeh.

Kako se TB-500 shranjuje?

Liofiliziran TB-500 shranjuj pri −20 °C, zaščiten pred svetlobo; tako je stabilen 2 do 3 leta, pri 2 do 8 °C pa 12 do 18 mesecev; pri sobni temperaturi do 30 dni. Po rekonstituciji je raztopina stabilna do 30 dni pri 2 do 8 °C.

Kakšen je razpolovni čas TB-500 in kako so ga dajali v študijah?

TB-500 ima daljši razpolovni čas v plazmi kot BPC-157 (~2 uri po subkutani uporabi), učinek vezave G-aktina pa zaradi stabilne vezave traja več dni. Protokole dajanja v predkliničnih modelih določa posamezna študija in so opisani v metodah citiranih člankov; Molequa® ne navaja shem dajanja.

Kje kupiti TB-500 v EU za znanstvene raziskave?

TB-500 za znanstvene raziskave v Sloveniji ponuja Molequa® iz skladišča v EU: dostava na prevzemno mesto Packeta ali s FedExom na dom v 3 do 5 delovnih dneh, brez carine. Izdelek je poslan liofiliziran; certifikat analize (CoA) serije s čistostjo HPLC 99,78 % je javno dostopen. Izdelek je izključno za raziskovalno uporabo (RUO) in ni namenjen uporabi pri ljudeh.