Glutathion (GSH)

Overblik

Glutathion (GSH) er tripeptidet γ-L-glutamyl-L-cysteinyl-glycin, molekylformel C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. I cellerne er det den mest udbredte lavmolekylære thiol, til stede i millimolære koncentrationer, og i forskningen fungerer det som referencemolekyle for redoxbalancen: forholdet mellem den reducerede form GSH og det oxiderede disulfid GSSG er en etableret indikator for cellens redoxtilstand. Molequa® tilbyder det som et lyofilisat på 1 500 mg med deklareret renhed ≥ 98 % HPLC, udelukkende til laboratorieforskning.

Hvad glutathion er, og hvor det kommer fra

Glutathion er ikke et designermolekyle fra et katalog, men det naturlige tripeptid i hver eneste celle med kerne. Det består af tre almindelige aminosyrer, glutaminsyre, cystein og glycin, og cellen syntetiserer det selv; derfor finder du det i millimolære koncentrationer i ethvert væv (oversigt af Forman 2009).

Forestil dig cellen som et værksted, hvor der ved alt arbejde med ilt flyver gnister, de reaktive iltforbindelser. Glutathion er vandspanden ved hver arbejdsplads: under slukningen bliver den selv »brugt op« (oxideret til GSSG) og fyldes derefter igen (reduceret tilbage til GSH). Forholdet mellem fulde og tomme spande er det, forskeren måler som forholdet GSH/GSSG.

Hvad vi ved om strukturen, og hvad vi ikke ved

Strukturen af glutathion er fuldstændig entydig, en behagelig forskel fra mange forskningspeptider. To ting gør den usædvanlig:

• γ-peptidbindingen. Glutaminsyre er ikke bundet til cystein via den almindelige α-carboxylgruppe, men via carboxylgruppen i sidekæden (γ-positionen). Denne atypiske binding er modstandsdygtig over for almindelige peptidaser, og derfor overlever glutathion ret længe i cellen.
• Cysteins frie thiolgruppe (–SH). Bæreren af redoxaktiviteten: thiolen afgiver en elektron, to GSH-molekyler forbindes via en disulfidbro, og der dannes oxideret glutathion GSSG.

Hvad vi endnu ikke ved om Molequa®-produktet, er dataene for den konkrete batch: den målte HPLC-renhed og massen bekræftet med LC-MS. Den første batch er endnu ikke på lager, så her finder du kun deklarerede værdier (≥ 98 % HPLC) og værdier fra databaser (307,3 Da); de målte tal tilføjer vi samme dag, som batchen kommer på lager.

Mekanisme: hvad glutathion gør i cellen

Antioxidativ beskyttelse (glutathionperoxidaser)

Glutathionperoxidaser reducerer hydrogenperoxid og lipidperoxider med elektroner fra to GSH-molekyler; der dannes GSSG, som cellen reducerer tilbage. Derfor afspejler forholdet GSH/GSSG den oxidative belastning så følsomt: når der kommer flere peroxider, tømmes spandene hurtigere, end de fyldes (Forman 2009, PubMed 18796312).

Konjugering af xenobiotika (glutathion-S-transferaser)

Glutathion-S-transferaser binder glutathion via thiolgruppen til fremmede elektrofile molekyler; konjugatet er mere vandopløseligt, og cellen kan udskille det. En klassisk forskningsmodel for omsætningen af fremmedstoffer.

Redoxsignalering og S-glutathionylering af proteiner

Forholdet GSH/GSSG og tilstanden af thiolgrupperne i proteiner fungerer også som et signal, der ændrer aktiviteten af enzymer og transkriptionsfaktorer (Lushchak 2012, PubMed 22500213). Ved oxidativ belastning binder glutathion sig desuden reversibelt via en disulfidbinding til cysteiner i proteiner; denne S-glutathionylering beskytter følsomme cysteiner mod irreversibel oxidation og kan kortlægges proteomisk.

Undersøgte områder

Molequa®-lyofilisatet er selve molekylet, ikke en celle: det bruges dér, hvor GSH er nødvendigt som et defineret stof, altså som standard, substrat eller reduktionsmiddel. Typiske spørgsmål:

• Måling af redoxtilstanden: forholdet GSH/GSSG i celler, væv og blodkomponenter, validering af HPLC-metoder og enzymatiske metoder (Forman 2009).
• Modeller for oxidativ belastning in vitro: om tilsætning af GSH til mediet slår igennem i det intracellulære forhold GSH/GSSG, er et eksperimentelt spørgsmål, ikke en egenskab ved produktet.
• Enzymologi og analytisk kemi af thioler: kinetik for glutathionperoxidaser og S-transferaser med GSH som substrat, stabiliteten af GSH i opløsning ved forskellig pH og adgang til ilt, sammenligning med N-acetylcystein.

Køb af glutathion: hvad du skal se efter

Ved køb af glutathion til forskning afgør fem ting sagen: et analysecertifikat for den konkrete batch, HPLC-renhed dokumenteret med kromatogram, identitet bekræftet med LC-MS (307,3 Da), lyofilisat i stedet for opløsning og forsendelse fra EU med batchsporbarhed. Et hætteglas med 1 500 mg koster i EU 39,99 til 59 €. Molequa® tilbyder det til 53,90 € (0,04 € pr. mg) og indtil den første batch er på lager udelukkende som reservation uden betaling.

1. HPLC-renhed ≥ 98 % dokumenteret med kromatogram

Renheden fortæller, hvor stor en del af pulveret der udgøres af hovedkomponenten. Ved glutathion skal du også spørge, om den gælder den reducerede form GSH, for oxideret GSSG er den mest naturlige urenhed. En værdi uden kromatogram er en påstand, ikke et bevis.

2. Analysecertifikat for den konkrete batch

Et dokument med batchnummer, dato og målt værdi, udstedt af et uafhængigt laboratorium. Hvis sælgeren kun viser et generisk eksempel eller et certifikat »på forespørgsel«, så lad være med at købe.

3. LC-MS-identitet, 307,3 Da

Massespektret bekræfter, at pulveret indeholder tripeptidet med massen 307,3 Da og ikke et andet thiolholdigt stof. Et certifikat uden identitet er ufuldstændigt.

4. Oprindelse og forsendelse fra EU med batchsporbarhed

Et lager i EU betyder kortere transport, ingen toldrisiko og en batch, du kan spore tilbage. Molequa® sender fra EU, typisk inden for 1 til 3 hverdage efter lagerføring.

5. Korrekt form: lyofilisat, aldrig opløsning

GSH i opløsning oxideres til GSSG, hurtigere ved neutral til basisk pH, ved adgang til ilt og ved metalioner, så en færdig opløsning har på leveringsdagen et ukendt forhold GSH/GSSG. Glutathion af høj kvalitet leveres som lyofilisat, og opløsningen tilbereder du frisk lige før forsøget.

Tjek kvaliteten på 30 sekunder

• ✅ CoA for batchen offentligt tilgængeligt?
• ✅ HPLC-renhed ≥ 98 % dokumenteret med kromatogram?
• ✅ Identitet bekræftet med LC-MS med massen 307,3 Da?
• ✅ Lager i EU og batchsporbarhed?
• ✅ Leveret som lyofilisat, ikke som færdig opløsning?

Alle Molequa®-batches får et analysecertifikat fra et uafhængigt laboratorium, inden de sælges; for glutathion offentliggøres det i afsnittet Testresultater for batchen, når den første batch kommer på lager.

Juridisk bemærkning: Glutathion fra Molequa® er et laboratoriekemikalie til forskning, hverken et lægemiddel eller et kosttilskud. Det sælges udelukkende til videnskabelig laboratorieforskning og er ikke beregnet til indtagelse af mennesker eller dyr; de citerede studier af tilskud vedrørte kosttilskud, ikke dette produkt.

Videnskab og studier

Litteraturen om glutathion har to lag. Det første er biokemiske oversigter over dets roller, måling og biosyntese (Forman 2009, Lushchak 2012). Det andet er humane studier af oralt tilskud med et kosttilskud (Richie 2015, Allen 2011, Sinha 2018). Det andet lag vedrører ikke laboratorielyofilisatet fra Molequa®. Vi gengiver det som fakta fra litteraturen med tal, ikke som et løfte.

4.1 Centrale publikationer

Biokemien dækkes af to oversigter, Forman 2009 og Lushchak 2012. De tre humane arbejder er studier af et kosttilskud: de hører med her som de mest citerede humane data om glutathion, men de siger intet om Molequa®-produktet.

Stikprøvestørrelsen for Sinha 2018 angiver vi ikke, før vi har kontrolleret den i den fulde tekst; ingen af disse tal er en vejledning.

4.2 Detaljerede studier

▸ Studie 1: Forman 2009, oversigt over roller, måling og biosyntese

Kilde: Forman H.J., Zhang H., Rinna A. Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis. Mol Aspects Med. 2009. PubMed 18796312.

Hvad de gjorde: En oversigt over glutathions biokemi fra biosyntesen over den antioxidative beskyttelse og konjugeringen af xenobiotika til metoderne til måling af GSH og GSSG.

Hvad de fandt: Glutathion er den mest udbredte lavmolekylære thiol i cellen i millimolære koncentrationer. Forholdet GSH/GSSG siger kun noget om redoxtilstanden, hvis GSH ikke oxideres under prøveforberedelsen.

Hvorfor det er vigtigt for forskning med GSH: Det metodiske grundlag for måling af glutathion og for dets brug som standard. De betingelser, der ødelægger en prøve, ødelægger også en opløsning af lyofilisatet.

▸ Studie 2: Lushchak 2012, homeostase og funktioner

Kilde: Lushchak V.I. Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions. J Amino Acids. 2012. PubMed 22500213.

Hvad de gjorde: En oversigt over, hvordan cellen holder sit glutathionniveau i balance, og hvilke funktioner der følger af det, herunder redoxsignalering og S-glutathionylering.

Hvad de fandt: Niveauet af GSH er resultatet af flere samtidige strømme, ikke en statisk værdi. En forskydning af redoxtilstanden ændrer aktiviteten af enzymer og transkriptionsfaktorer, så glutathion er også et signalmolekyle.

Hvorfor det er vigtigt for forskning med GSH: Det forklarer, hvorfor tilsætning af GSH til et system ikke nødvendigvis giver et enkelt resultat: cellen har sin egen homeostase og reagerer på ændringen, og derfor måles der mere end én størrelse.

▸ Studie 3: Richie 2015, randomiseret studie af et oralt tilskud

Kilde: Richie J.P. Jr., et al. Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione. Eur J Nutr. 2015. PubMed 24791752.

Hvad de gjorde: Et randomiseret kontrolleret studie med 54 voksne: oralt glutathion som kosttilskud, 250 eller 1 000 mg dagligt i 6 måneder; GSH-depoter i erytrocytter, plasma og lymfocytter.

Hvad de fandt: Ved 1 000 mg dagligt var GSH-depoterne i blodet efter 6 måneder 30–35 % højere i alle tre komponenter.

Hvorfor det er vigtigt for forskning med GSH: Et studie af et kosttilskud hos mennesker, ikke af et laboratorielyofilisat; Molequa®-produktet er ikke beregnet til indtagelse af mennesker. Metodisk viser det, hvor GSH-depoterne måles, og hvilken tidshorisont det kræver.

▸ Studie 4: Allen 2011 og Sinha 2018, to kortere studier med modsat resultat

Kilde: Allen J., Bradley R.D. Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers. J Altern Complement Med. 2011. PubMed 21875351. Sinha R., et al. Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function. Eur J Clin Nutr. 2018. PubMed 28853742.

Hvad de gjorde: Allen 2011: 40 frivillige, oralt glutathion som kosttilskud, 500 mg to gange dagligt i 4 uger, biomarkører for oxidativt stress. Sinha 2018: liposomalt glutathion 500 eller 1 000 mg dagligt i 1 måned, GSH-depoter og markører for immunfunktion.

Hvad de fandt: Allen 2011: ingen ændring i biomarkørerne, et negativt studie. Sinha 2018: både GSH-depoterne og NK-cellernes cytotoksicitet var højere efter en måned.

Hvorfor det er vigtigt for forskning med GSH: Igen studier af et kosttilskud hos mennesker. To lige korte arbejder med modsat konklusion viser, at det er den målte størrelse og administrationsformen (frit versus liposomalt GSH), der afgør sagen; Molequa®-lyofilisatet er ikke liposomalt.

Opbevaring

Opbevar glutathionlyofilisatet ved 2–8 °C, tørt og mørkt, i et tæt lukket hætteglas. Tilbered opløsningen frisk i vand eller buffer, og brug den samme dag: i opløsning oxideres GSH til GSSG, og det sker hurtigere ved neutral til basisk pH, ved adgang til ilt og i nærvær af metalioner. Bakteriostatisk vand med benzylalkohol er ikke nødvendigt.

Lyofilisat (tørt pulver før rekonstitution)

• Køleskab ved 2 til 8 °C er standarden, præcis som etiketten angiver; fryser ved −20 °C ved langtidsopbevaring, hvis du ikke skal åbne hætteglasset. Stuetemperatur kun under transport og håndtering.
• Beskyttes mod lys og fugt. For en thiol er fugt en større fjende end varme, fordi der med vandet følger ilt og oxidation.

Efter rekonstitution (opløsning i vand eller buffer)

• Brug den samme dag, som den er tilberedt. En glutathionopløsning er ikke et lager, men et arbejdsreagens. Surt miljø bremser oxidationen, basisk miljø og metalioner fremskynder den; brug en buffer uden metalioner, og hold opløsningen på is.
• Oxidationen kan ikke ses. Både GSH og GSSG danner en klar, farveløs opløsning, så udseendet er intet bevis for friskhed; det eneste bevis er tiden siden tilberedningen og en måling.

Praktiske regler

• Lad hætteglasset nå stuetemperatur (15 til 20 minutter), før du åbner det, ellers sætter der sig fugt på pulveret.
• Med 1 500 mg i ét hætteglas skal du ikke åbne det unødigt: afvej det, du skal bruge, og luk straks igen; ved gentaget arbejde fordeler du lyofilisatet i mindre, tørre hætteglas lige efter den første åbning.
• Opløsninger af NAD+ eller GHK-Cu må aldrig blandes i et fælles hætteglas med GSH. GSH er et reduktionsmiddel, og kobberioner fremskynder oxidationen af thiolen.

Kombinationer, peptider der ofte kombineres

I forskningsdesign hører glutathion til molekylerne på redox- og mitokondrieaksen: NAD+ som cellens andet store redoxpar og MOTS-c for mitokondrierne som den vigtigste kilde til reaktive iltforbindelser. Kombination betyder parallelle arme i forsøget, aldrig en fælles opløsning: GSH er et reduktionsmiddel og reagerer i samme hætteglas med NAD+ eller med det kobberholdige GHK-Cu.

NAD+, det andet redoxpar

Cellen har to store redoxpar, NAD+/NADH og GSH/GSSG, og de er forbundet: genanvendelsen af GSSG til GSH henter reduktionsækvivalenter fra nikotinamid-coenzymerne, og derfor måles begge akser samtidig. I hætteglasset hører de dog hver for sig.

MOTS-c, mitokondriernes kilde til belastning

Mitokondrierne er den vigtigste kilde til reaktive iltforbindelser i cellen og har deres egen glutathionpulje. MOTS-c retter sig mod mitokondriernes stofskifte, glutathion opfanger dets biprodukter; parret giver mening i modeller for sammenhængen mellem stofskifte og redoxtilstand.

GHK-Cu, pas på kobberet

GHK-Cu er et tripeptid med en bundet kobberion, og kobberioner fremskynder oxidationen af thioler. Hvis du undersøger begge peptider i samme projekt, så hold dem i adskilte opløsninger, og tilsæt dem til systemet hver for sig.

Vigtige videnskabelige data og citater

Alle tal på denne side stammer fra to oversigter over glutathions biokemi, tre humane studier af et kosttilskud, databasen PubChem og produktets parametre. Tallene fra de humane studier er fakta fra litteraturen, ikke egenskaber ved Molequa®-lyofilisatet, og ingen af dem er en brugsanvisning.

“Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.”
Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009), Mol Aspects Med, PubMed 18796312

Tabel over nøgletal

Statistik fra forskningslitteraturen

• Humane studier af et kosttilskud: Richie 2015 (n = 54, 6 måneder) +30–35 % GSH-depoter i blodet; Allen 2011 (n = 40, 4 uger) ingen ændring i biomarkører for oxidativt stress; Sinha 2018 (1 måned) højere GSH-depoter og NK-cytotoksicitet
• Direkte målinger af Molequa®-lyofilisatet: endnu ingen; den første målte oplysning bliver analysecertifikatet for den første batch

Referencekilder (PubMed)

1. Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009). “Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.” Mol Aspects Med. PubMed 18796312
2. Lushchak VI. (2012). “Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions.” J Amino Acids. PubMed 22500213
3. Richie JP Jr. et al. (2015). “Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione.” Eur J Nutr. PubMed 24791752
4. Allen J., Bradley RD. (2011). “Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers.” J Altern Complement Med. PubMed 21875351
5. Sinha R. et al. (2018). “Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function.” Eur J Clin Nutr. PubMed 28853742

Produktstatus: Glutathion fra Molequa® er et laboratoriekemikalie udelukkende til videnskabelig forskning (RUO), hverken et lægemiddel eller et kosttilskud; det er ikke beregnet til indtagelse af mennesker eller dyr.

Ofte stillede spørgsmål om glutathion

Disse spørgsmål besvarer de mest almindelige søgninger om glutathion i forskningssammenhæng: hvilket slags molekyle det er, hvordan GSH adskiller sig fra GSSG og fra N-acetylcystein, hvad de humane studier af kosttilskud siger, og hvordan du arbejder med lyofilisatet. Den tekniske dokumentation finder du i afsnittene ovenfor.

Hvad er glutathion, og hvorfor betegnes det som et tripeptid?

Glutathion (GSH) er tripeptidet γ-L-glutamyl-L-cysteinyl-glycin, C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. Glutamat er bundet til cystein via en atypisk γ-peptidbinding, som er modstandsdygtig over for almindelige peptidaser, og cysteins frie thiolgruppe bærer redoxaktiviteten. I cellerne er det den mest udbredte lavmolekylære thiol.

Hvad er forskellen på GSH og GSSG?

GSH er den reducerede form med en fri thiolgruppe, GSSG er det oxiderede disulfid, hvor to GSH-molekyler er forbundet med en bro –S–S–. Forholdet GSH/GSSG er en etableret indikator for cellens redoxtilstand (Forman 2009, PubMed 18796312). I opløsning omdannes GSH spontant til GSSG, og derfor tilberedes opløsninger friske.

Hvad siger studierne af oralt glutathion hos mennesker?

Det drejer sig om studier af et kosttilskud, ikke af et laboratorielyofilisat. Richie 2015 (n = 54): 1 000 mg/dag i 6 måneder, GSH-depoterne i blodet 30–35 % højere. Allen 2011 (n = 40): 500 mg to gange dagligt i 4 uger, ingen ændring i biomarkører for oxidativt stress. Sinha 2018: liposomalt GSH i 1 måned, højere GSH-depoter og NK-cytotoksicitet. De gælder ikke for Molequa®-produktet.

Hvorfor tilberedes en glutathionopløsning frisk?

Fordi GSH i opløsning oxideres til GSSG, hurtigere ved neutral til basisk pH, ved adgang til ilt og ved metalioner, og oxidationen er ikke synlig: både GSH og GSSG danner en klar, farveløs opløsning. Tilbered derfor opløsningen lige før forsøget; bakteriostatisk vand er ikke nødvendigt.

Hvordan adskiller glutathion sig fra N-acetylcystein?

Glutathion er et færdigt tripeptid med en fri thiol. N-acetylcystein (NAC) er acetyleret L-cystein, et derivat af én aminosyre, som i cellemodeller fungerer som kilde til cystein for cellens egen syntese af GSH og som thiolbaseret reduktionsmiddel. I forskningen sammenlignes de som to måder at påvirke cellens glutathionpulje på.

Hvordan opbevares glutathion?

Opbevar lyofilisatet ved 2 til 8 °C, beskyttet mod lys og fugt, i et tæt lukket hætteglas; til langtidsopbevaring i fryser ved −20 °C. Lad hætteglasset nå stuetemperatur, før du åbner det. Opløsningen skal ikke opbevares, den tilberedes frisk. Stabilitetsperioderne for batchen bekræfter vi ud fra certifikatet.

Hvor kan jeg købe glutathion i EU til videnskabelig forskning?

Molequa® tilbyder glutathion som lyofilisat på 1 500 mg til 53,90 € (0,04 € pr. mg), ≥ 98 % HPLC, med et analysecertifikat for batchen efter lagerføring; markedsprisen i EU er 39,99 til 59 €. Indtil den første batch er på lager, er produktet i reservation uden betaling. Til Danmark leverer vi med FedEx til døren, typisk på 3 til 5 hverdage, inden for EU og uden told. Udelukkende til laboratorieforskning (RUO).