Glutationa (GSH)

Visão geral

A glutationa (GSH) é o tripéptido γ-L-glutamil-L-cisteinil-glicina, fórmula molecular C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. Nas células é o tiol de baixo peso molecular mais abundante, presente em concentrações milimolares, e na investigação serve de molécula de referência do equilíbrio redox: a razão entre a forma reduzida GSH e o dissulfureto oxidado GSSG é um indicador estabelecido do estado redox da célula. A Molequa® oferece-a como liofilizado de 1 500 mg com pureza declarada ≥ 98 % HPLC, exclusivamente para investigação laboratorial.

O que é a glutationa e de onde vem

A glutationa não é uma molécula de design saída de um catálogo, é o tripéptido próprio de cada célula com núcleo. É constituída por três aminoácidos comuns, ácido glutâmico, cisteína e glicina, e a célula sintetiza-a por si mesma; por isso a encontra em concentrações milimolares em todos os tecidos (revisão de Forman 2009).

Imagine a célula como uma oficina onde cada trabalho com oxigénio faz saltar faíscas, as espécies reativas de oxigénio. A glutationa é o balde de água junto a cada posto de trabalho: ao apagar as faíscas «gasta-se» (oxida-se a GSSG) e depois volta a encher-se (é reduzida de novo a GSH). A proporção entre baldes cheios e vazios é o que o investigador mede como razão GSH/GSSG.

O que sabemos sobre a estrutura e o que não sabemos

A estrutura da glutationa é totalmente inequívoca, uma diferença agradável em relação a muitos péptidos de investigação. Duas coisas a tornam excecional:

• A ligação γ-peptídica. O ácido glutâmico não está ligado à cisteína pelo grupo α-carboxilo habitual, mas pelo carboxilo da cadeia lateral (posição γ). Esta ligação atípica é resistente às peptidases comuns, e é por isso que a glutationa sobrevive na célula tempo suficiente.
• O grupo tiol livre (–SH) da cisteína. O portador da atividade redox: o tiol cede um eletrão, duas moléculas de GSH unem-se por uma ponte dissulfureto e forma-se a glutationa oxidada GSSG.

O que ainda não sabemos sobre o produto Molequa® são os dados do lote concreto: a pureza HPLC medida e a massa confirmada por LC-MS. O primeiro lote ainda não está em stock, por isso encontra aqui apenas os valores declarados (≥ 98 % HPLC) e os valores das bases de dados (307,3 Da); os números medidos serão acrescentados no dia da entrada em stock.

Mecanismo: o que a glutationa faz na célula

Proteção antioxidante (glutationa-peroxidases)

As glutationa-peroxidases reduzem o peróxido de hidrogénio e os peróxidos lipídicos com eletrões de duas moléculas de GSH; forma-se GSSG, que a célula reduz de volta. É por isso que a razão GSH/GSSG reflete de forma tão sensível a carga oxidativa: quando os peróxidos aumentam, os baldes esvaziam-se mais depressa do que se enchem (Forman 2009, PubMed 18796312).

Conjugação de xenobióticos (glutationa-S-transferases)

As glutationa-S-transferases ligam a glutationa, através do grupo tiol, a moléculas eletrófilas estranhas; o conjugado é mais solúvel em água e a célula consegue excretá-lo. O modelo clássico de investigação do metabolismo de substâncias estranhas.

Sinalização redox e S-glutationilação das proteínas

A razão GSH/GSSG e o estado dos grupos tiol nas proteínas funcionam também como um sinal que altera a atividade de enzimas e de fatores de transcrição (Lushchak 2012, PubMed 22500213). Sob carga oxidativa, a glutationa liga-se ainda de forma reversível, por dissulfureto, às cisteínas das proteínas; esta S-glutationilação protege as cisteínas sensíveis da oxidação irreversível e pode ser mapeada por proteómica.

Áreas investigadas

O liofilizado Molequa® é a própria molécula, não uma célula: utiliza-se onde a GSH é necessária como substância definida, ou seja, como padrão, substrato ou agente redutor. Perguntas típicas:

• Medição do estado redox: a razão GSH/GSSG em células, tecidos e frações sanguíneas, validação de métodos de HPLC e enzimáticos (Forman 2009).
• Modelos de carga oxidativa in vitro: se a adição de GSH ao meio se reflete na razão GSH/GSSG intracelular é uma pergunta experimental, não uma propriedade do produto.
• Enzimologia e química analítica dos tióis: cinética das glutationa-peroxidases e das S-transferases com GSH como substrato, estabilidade da GSH em solução a diferentes pH e exposições ao oxigénio, comparação com a N-acetilcisteína.

Comprar glutationa: a que deve estar atento

Ao comprar glutationa para investigação, cinco coisas decidem: o certificado de análise do lote concreto, a pureza HPLC comprovada por cromatograma, a identidade confirmada por LC-MS (307,3 Da), a forma de liofilizado em vez de solução e o envio a partir da UE com rastreabilidade do lote. Um frasco de 1 500 mg custa na UE entre 39,99 e 59 €. A Molequa® oferece-o por 53,90 € (0,04 € por mg) e, até à entrada em stock do primeiro lote, exclusivamente como reserva sem pagamento.

1. Pureza HPLC ≥ 98 % comprovada por cromatograma

A pureza diz que proporção do pó é o componente principal. Na glutationa, pergunte também se se refere à forma reduzida GSH, porque o GSSG oxidado é a impureza mais natural. Um valor sem cromatograma é uma afirmação, não uma prova.

2. Certificado de análise do lote concreto

Um documento com número de lote, data e valor medido, emitido por um laboratório independente. Se o vendedor apenas mostrar um modelo genérico ou um certificado «mediante pedido», não compre.

3. Identidade por LC-MS, 307,3 Da

O espetro de massa confirma que o pó contém o tripéptido com massa de 307,3 Da e não outra substância tiólica. Um certificado sem identidade está incompleto.

4. Origem e envio a partir da UE com rastreabilidade do lote

Um armazém na UE significa transporte mais curto, nenhum risco aduaneiro e um lote que consegue rastrear. A Molequa® expede a partir da UE, normalmente em 1 a 3 dias úteis após a entrada em stock.

5. A forma correta: liofilizado, nunca solução

A GSH em solução oxida-se a GSSG, mais depressa a pH neutro a alcalino, com exposição ao oxigénio e iões metálicos, pelo que uma solução pronta tem, no dia da entrega, uma razão GSH/GSSG desconhecida. Uma glutationa de qualidade é fornecida como liofilizado e a solução prepara-se fresca imediatamente antes da experiência.

Verifique a qualidade em 30 segundos

• ✅ CoA do lote disponível publicamente?
• ✅ Pureza HPLC ≥ 98 % comprovada por cromatograma?
• ✅ Identidade confirmada por LC-MS com massa de 307,3 Da?
• ✅ Armazém na UE e rastreabilidade do lote?
• ✅ Entregue como liofilizado, não como solução pronta?

Todos os lotes Molequa® recebem um certificado de análise de um laboratório independente ainda antes da venda; no caso da glutationa será publicado na secção Resultados das análises do lote na entrada em stock do primeiro lote.

Aviso legal: A glutationa Molequa® é um produto químico de laboratório para investigação, não um medicamento nem um suplemento alimentar. É vendida exclusivamente para investigação científica de laboratório e não se destina ao consumo humano ou animal; os estudos de suplementação citados diziam respeito a suplementos alimentares, não a este produto.

Ciência e estudos

A literatura sobre a glutationa tem duas camadas. A primeira são as revisões bioquímicas sobre os seus papéis, medição e biossíntese (Forman 2009, Lushchak 2012). A segunda são os estudos em humanos de suplementação oral com um suplemento alimentar (Richie 2015, Allen 2011, Sinha 2018). A segunda camada não diz respeito ao liofilizado laboratorial Molequa®. Apresentamo-la como factos da literatura, com números, não como promessa.

4.1 Publicações-chave

A bioquímica é coberta por duas revisões, Forman 2009 e Lushchak 2012. Os três trabalhos em humanos são estudos de um suplemento alimentar: estão aqui como os dados humanos mais citados sobre a glutationa, nada dizem sobre o produto Molequa®.

Não indicamos a dimensão da amostra de Sinha 2018 enquanto não a verificarmos no texto integral; nenhum destes números é uma instrução.

4.2 Estudos detalhados

▸ Estudo 1: Forman 2009, revisão dos papéis, da medição e da biossíntese

Citação: Forman H.J., Zhang H., Rinna A. Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis. Mol Aspects Med. 2009. PubMed 18796312.

O que fizeram: Uma revisão da bioquímica da glutationa, da biossíntese à proteção antioxidante e à conjugação de xenobióticos, até aos métodos de medição da GSH e do GSSG.

O que encontraram: A glutationa é o tiol de baixo peso molecular mais abundante na célula, em concentrações milimolares. A razão GSH/GSSG só informa sobre o estado redox quando a GSH não se oxida durante a preparação da amostra.

Porque interessa para a investigação com GSH: A base metodológica tanto para a medição da glutationa como para a sua utilização como padrão. As condições que estragam uma amostra estragam também uma solução do liofilizado.

▸ Estudo 2: Lushchak 2012, homeostasia e funções

Citação: Lushchak V.I. Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions. J Amino Acids. 2012. PubMed 22500213.

O que fizeram: Uma revisão de como a célula mantém o nível de glutationa em equilíbrio e que funções daí decorrem, incluindo a sinalização redox e a S-glutationilação.

O que encontraram: O nível de GSH é o resultado de vários fluxos simultâneos, não um valor estático. Uma alteração do estado redox muda a atividade de enzimas e de fatores de transcrição, pelo que a glutationa é também uma molécula de sinalização.

Porque interessa para a investigação com GSH: Explica porque é que a adição de GSH a um sistema não tem necessariamente um resultado simples: a célula tem a sua própria homeostasia e reage à alteração, e é por isso que se mede mais do que uma variável.

▸ Estudo 3: Richie 2015, ensaio aleatorizado de um suplemento oral

Citação: Richie J.P. Jr., et al. Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione. Eur J Nutr. 2015. PubMed 24791752.

O que fizeram: Um ensaio aleatorizado e controlado em 54 adultos: glutationa oral como suplemento alimentar, 250 ou 1 000 mg por dia durante 6 meses; reservas de GSH nos eritrócitos, no plasma e nos linfócitos.

O que encontraram: A 1 000 mg por dia, ao fim de 6 meses as reservas de GSH no sangue eram superiores em 30–35 % nas três frações.

Porque interessa para a investigação com GSH: Um estudo de um suplemento alimentar em humanos, não de um liofilizado laboratorial; o produto Molequa® não se destina ao consumo humano. Do ponto de vista metodológico, mostra onde se medem as reservas de GSH e que horizonte temporal isso exige.

▸ Estudo 4: Allen 2011 e Sinha 2018, dois estudos mais curtos com resultados opostos

Citação: Allen J., Bradley R.D. Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers. J Altern Complement Med. 2011. PubMed 21875351. Sinha R., et al. Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function. Eur J Clin Nutr. 2018. PubMed 28853742.

O que fizeram: Allen 2011: 40 voluntários, glutationa oral como suplemento alimentar, 500 mg duas vezes por dia durante 4 semanas, biomarcadores de stress oxidativo. Sinha 2018: glutationa lipossomal, 500 ou 1 000 mg por dia durante 1 mês, reservas de GSH e indicadores da função imunitária.

O que encontraram: Allen 2011: sem alteração dos biomarcadores, um estudo negativo. Sinha 2018: reservas de GSH e citotoxicidade das células NK mais elevadas ao fim de um mês.

Porque interessa para a investigação com GSH: De novo, estudos de um suplemento alimentar em humanos. Dois trabalhos igualmente curtos com conclusões opostas mostram que o decisivo é a variável medida e a forma de administração (GSH livre versus lipossomal); o liofilizado Molequa® não é lipossomal.

Conservação

Conserve o liofilizado de glutationa a 2–8 °C, em local seco e escuro, num frasco bem fechado. Prepare a solução fresca em água ou em tampão e utilize-a no dia da preparação: em solução a GSH oxida-se a GSSG, mais depressa a pH neutro a alcalino, com exposição ao oxigénio e na presença de iões metálicos. Não é necessária água bacteriostática com álcool benzílico.

Liofilizado (pó seco antes da reconstituição)

• Frigorífico a 2 a 8 °C é o padrão, exatamente como indica o rótulo; congelador a −20 °C para conservação prolongada, se não for abrir o frasco. Temperatura ambiente apenas para transporte e manuseamento.
• Proteger da luz e da humidade. Para um tiol, a humidade é um inimigo maior do que o calor, porque com a água vêm o oxigénio e a oxidação.

Após a reconstituição (solução em água ou tampão)

• Utilize no dia da preparação. Uma solução de glutationa não é uma reserva, é um reagente de trabalho. O meio ácido abranda a oxidação, o meio alcalino e os iões metálicos aceleram-na; use um tampão sem iões metálicos e mantenha a solução em gelo.
• A oxidação não se vê. Tanto a GSH como o GSSG formam uma solução límpida e incolor, pelo que o aspeto não é prova de frescura; a única prova é o tempo decorrido desde a preparação e uma medição.

Regras práticas

• Antes de abrir, deixe o frasco aquecer até à temperatura ambiente (15 a 20 minutos), caso contrário a humidade condensa sobre o pó.
• Com 1 500 mg num único frasco, não o abra desnecessariamente: pese o que precisa e feche de imediato; para trabalho repetido, divida o liofilizado em frascos secos mais pequenos logo após a primeira abertura.
• Nunca misture soluções de NAD+ ou de GHK-Cu num frasco comum com GSH. A GSH é um agente redutor e os iões de cobre aceleram a oxidação do tiol.

Dicas de combinação: péptidos frequentemente combinados

No desenho experimental, a glutationa alinha-se com as moléculas do eixo redox e mitocondrial: o NAD+ como o outro grande par redox da célula e o MOTS-c para as mitocôndrias como principal fonte de espécies reativas de oxigénio. Combinação significa braços paralelos da experiência, nunca uma solução comum: a GSH é um agente redutor e reage num único frasco com o NAD+ ou com o GHK-Cu, que transporta cobre.

NAD+, o outro par redox

A célula tem dois grandes pares redox, NAD+/NADH e GSH/GSSG, e eles estão ligados: a reciclagem de GSSG em GSH vai buscar equivalentes redutores às coenzimas nicotinamídicas, e é por isso que os dois eixos se medem em paralelo. No frasco, porém, pertencem separados.

MOTS-c, a fonte mitocondrial de carga

As mitocôndrias são a principal fonte de espécies reativas de oxigénio na célula e têm o seu próprio pool de glutationa. O MOTS-c visa o metabolismo mitocondrial, a glutationa capta os seus subprodutos; o par faz sentido em modelos da relação entre metabolismo e estado redox.

GHK-Cu, atenção ao cobre

O GHK-Cu é um tripéptido com um ião de cobre ligado, e os iões de cobre aceleram a oxidação dos tióis. Se estudar os dois péptidos num mesmo projeto, mantenha-os em soluções separadas e adicione-os ao sistema separadamente.

Números científicos-chave e citações

Todos os números desta página provêm de duas revisões da bioquímica da glutationa, de três estudos em humanos de um suplemento alimentar, da base de dados PubChem e dos parâmetros do produto. Os números dos estudos em humanos são factos da literatura, não propriedades do liofilizado Molequa®, e nenhum deles é uma instrução de utilização.

“Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.”
Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009), Mol Aspects Med, PubMed 18796312

Tabela de números-chave

Estatísticas da literatura de investigação

• Estudos em humanos de um suplemento alimentar: Richie 2015 (n = 54, 6 meses) +30–35 % de reservas de GSH no sangue; Allen 2011 (n = 40, 4 semanas) sem alteração dos biomarcadores de stress oxidativo; Sinha 2018 (1 mês) reservas de GSH e citotoxicidade NK mais elevadas
• Medições diretas do liofilizado Molequa®: ainda nenhuma; o primeiro dado medido será o certificado de análise do primeiro lote

Fontes de referência (PubMed)

1. Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009). “Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.” Mol Aspects Med. PubMed 18796312
2. Lushchak VI. (2012). “Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions.” J Amino Acids. PubMed 22500213
3. Richie JP Jr. et al. (2015). “Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione.” Eur J Nutr. PubMed 24791752
4. Allen J., Bradley RD. (2011). “Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers.” J Altern Complement Med. PubMed 21875351
5. Sinha R. et al. (2018). “Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function.” Eur J Clin Nutr. PubMed 28853742

Estatuto do produto: A glutationa Molequa® é um produto químico de laboratório exclusivamente para investigação científica (RUO), não um medicamento nem um suplemento alimentar; não se destina ao consumo humano ou animal.

Perguntas frequentes sobre a glutationa

Estas perguntas respondem às pesquisas mais frequentes sobre a glutationa em contexto de investigação: que molécula é, em que diferem a GSH do GSSG e da N-acetilcisteína, o que dizem os estudos em humanos do suplemento alimentar e como se trabalha com o liofilizado. Para a documentação técnica, consulte as secções acima.

O que é a glutationa e porque é designada tripéptido?

A glutationa (GSH) é o tripéptido γ-L-glutamil-L-cisteinil-glicina, C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. O glutamato está ligado à cisteína por uma ligação γ-peptídica atípica, resistente às peptidases comuns, e o grupo tiol livre da cisteína transporta a atividade redox. Nas células é o tiol de baixo peso molecular mais abundante.

Qual é a diferença entre GSH e GSSG?

A GSH é a forma reduzida, com um grupo tiol livre; o GSSG é o dissulfureto oxidado, em que duas moléculas de GSH estão unidas por uma ponte –S–S–. A razão GSH/GSSG é um indicador estabelecido do estado redox da célula (Forman 2009, PubMed 18796312). Em solução, a GSH converte-se espontaneamente em GSSG, e é por isso que as soluções se preparam frescas.

O que dizem os estudos sobre a glutationa oral em humanos?

São estudos de um suplemento alimentar, não de um liofilizado laboratorial. Richie 2015 (n = 54): 1 000 mg/dia durante 6 meses, reservas de GSH no sangue superiores em 30–35 %. Allen 2011 (n = 40): 500 mg duas vezes por dia durante 4 semanas, sem alteração dos biomarcadores de stress oxidativo. Sinha 2018: GSH lipossomal durante 1 mês, reservas de GSH e citotoxicidade NK mais elevadas. Não se aplicam ao produto Molequa®.

Porque é que a solução de glutationa se prepara fresca?

Porque a GSH em solução oxida-se a GSSG, mais depressa a pH neutro a alcalino, com exposição ao oxigénio e iões metálicos, e a oxidação não é visível: tanto a GSH como o GSSG formam uma solução límpida e incolor. Prepare por isso a solução imediatamente antes da experiência; não é necessária água bacteriostática.

Em que difere a glutationa da N-acetilcisteína?

A glutationa é o tripéptido completo, com um tiol livre. A N-acetilcisteína (NAC) é L-cisteína acetilada, um derivado de um único aminoácido, que em modelos celulares serve de fonte de cisteína para a síntese própria de GSH e de agente redutor tiólico. Na investigação comparam-se como duas formas de influenciar o pool celular de glutationa.

Como se conserva a glutationa?

Conserve o liofilizado a 2 a 8 °C, protegido da luz e da humidade, num frasco bem fechado; a longo prazo no congelador a −20 °C. Antes de abrir, deixe o frasco aquecer até à temperatura ambiente. Não conserve a solução; prepare-a fresca. Os prazos de estabilidade do lote serão confirmados de acordo com o certificado.

Onde comprar glutationa na UE para investigação científica?

A Molequa® oferece a glutationa como liofilizado de 1 500 mg por 53,90 € (0,04 € por mg), ≥ 98 % HPLC, com certificado de análise do lote após a entrada em stock; o preço de mercado na UE é de 39,99 a 59 €. Até à entrada em stock do primeiro lote, o produto está em reserva sem pagamento. Entrega por Packeta ou estafeta (3 a 5 dias úteis em Portugal e nos restantes países da UE). Exclusivamente para investigação laboratorial (RUO).