Glutathione

Prezentare generală

Glutationul (GSH) este tripeptida γ-L-glutamil-L-cisteinil-glicină, formula brută C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. În celule este cel mai abundent tiol cu masă moleculară mică, prezent în concentrații milimolare, iar în cercetare servește drept moleculă de referință a echilibrului redox: raportul dintre forma redusă GSH și disulfura oxidată GSSG este un indicator consacrat al stării redox a celulei. Molequa® îl oferă ca liofilizat de 1 500 mg cu puritate declarată ≥ 98 % HPLC, exclusiv pentru cercetare de laborator.

Ce este glutationul și de unde provine

Glutationul nu este o moleculă de designer dintr-un catalog, ci tripeptida proprie a fiecărei celule cu nucleu. Este alcătuit din trei aminoacizi obișnuiți, acidul glutamic, cisteina și glicina, iar celula și-l sintetizează singură; de aceea îl găsiți în concentrații milimolare în fiecare țesut (sinteza Forman 2009).

Imaginați-vă celula ca pe un atelier în care, la fiecare lucrare cu oxigen, sar scântei, adică specii reactive de oxigen. Glutationul este găleata cu apă de lângă fiecare post de lucru: la stingere se „consumă” (se oxidează la GSSG), apoi se umple din nou (se reduce înapoi la GSH). Raportul dintre gălețile pline și cele goale este ceea ce cercetătorul măsoară ca raport GSH/GSSG.

Ce știm despre structură și ce nu

Structura glutationului este complet lipsită de echivoc, o diferență plăcută față de multe peptide de cercetare. Două lucruri o fac excepțională:

• Legătura γ-peptidică. Acidul glutamic nu este legat de cisteină prin gruparea α-carboxil obișnuită, ci prin carboxilul catenei laterale (poziția γ). Această legătură neobișnuită este rezistentă la peptidazele obișnuite, de aceea glutationul supraviețuiește destul de mult în celulă.
• Gruparea tiol liberă (–SH) a cisteinei. Purtătoarea activității redox: tiolul cedează un electron, două molecule de GSH se unesc printr-o punte disulfurică și rezultă glutationul oxidat GSSG.

Ce nu știm încă despre produsul Molequa® sunt datele lotului concret: puritatea HPLC măsurată și masa confirmată prin LC-MS. Primul lot nu este încă în stoc, de aceea aici găsiți doar valorile declarate (≥ 98 % HPLC) și valorile din baze de date (307,3 Da); cifrele măsurate le completăm în ziua intrării în stoc.

Mecanism: ce face glutationul în celulă

Protecția antioxidantă (glutation-peroxidazele)

Glutation-peroxidazele reduc peroxidul de hidrogen și peroxizii lipidici cu electroni de la două molecule de GSH; rezultă GSSG, pe care celula îl reduce înapoi. De aceea raportul GSH/GSSG reflectă atât de sensibil încărcarea oxidativă: când peroxizii se înmulțesc, gălețile se golesc mai repede decât se umplu (Forman 2009, PubMed 18796312).

Conjugarea xenobioticelor (glutation-S-transferazele)

Glutation-S-transferazele leagă glutationul, prin gruparea tiol, de molecule electrofile străine; conjugatul este mai solubil în apă, iar celula îl poate elimina. Un model clasic de cercetare a metabolismului substanțelor străine.

Semnalizarea redox și S-glutationilarea proteinelor

Raportul GSH/GSSG și starea grupărilor tiol din proteine funcționează și ca semnal, care modifică activitatea enzimelor și a factorilor de transcripție (Lushchak 2012, PubMed 22500213). La încărcare oxidativă, glutationul se leagă în plus reversibil, printr-o legătură disulfurică, de cisteinele proteinelor; această S-glutationilare protejează cisteinele sensibile de oxidarea ireversibilă și poate fi cartografiată proteomic.

Domenii cercetate

Liofilizatul Molequa® este molecula însăși, nu celula: se folosește acolo unde GSH este necesar ca substanță definită, adică drept standard, substrat sau agent reducător. Întrebări tipice:

• Măsurarea stării redox: raportul GSH/GSSG în celule, țesuturi și componente ale sângelui, validarea metodelor HPLC și enzimatice (Forman 2009).
• Modele de încărcare oxidativă in vitro: dacă adăugarea de GSH în mediu se reflectă în raportul intracelular GSH/GSSG este o întrebare experimentală, nu o proprietate a produsului.
• Enzimologia și chimia analitică a tiolilor: cinetica glutation-peroxidazelor și a S-transferazelor cu GSH ca substrat, stabilitatea GSH în soluție la diferite valori de pH și la acces de oxigen, comparația cu N-acetilcisteina.

Cum să cumperi glutation: la ce să fii atent

La cumpărarea glutationului pentru cercetare decid cinci lucruri: certificatul de analiză pentru lotul concret, puritatea HPLC dovedită cu cromatogramă, identitatea confirmată prin LC-MS (307,3 Da), forma de liofilizat în loc de soluție și expedierea din UE cu trasabilitatea lotului. Un flacon de 1 500 mg costă în UE între 197,95 și 292,05 lei. Molequa® îl oferă la 266,81 lei (0,20 lei pe mg), iar până la intrarea în stoc a primului lot exclusiv ca rezervare fără plată.

1. Puritate HPLC ≥ 98 % dovedită cu cromatogramă

Puritatea spune ce proporție din pulbere o reprezintă componenta principală. La glutation întrebați și dacă se referă la forma redusă GSH, pentru că GSSG oxidat este impuritatea cea mai firească. O valoare fără cromatogramă este o afirmație, nu o dovadă.

2. Certificat de analiză pentru lotul concret

Un document cu număr de lot, dată și valoare măsurată, emis de un laborator independent. Dacă vânzătorul arată doar un model generic sau un certificat „la cerere”, nu cumpărați.

3. Identitate LC-MS, 307,3 Da

Spectrul de masă confirmă că în pulbere se află tripeptida cu masa de 307,3 Da, și nu o altă substanță tiolică. Un certificat fără identitate este incomplet.

4. Proveniență și livrare din UE cu trasabilitatea lotului

Un depozit în UE înseamnă transport mai scurt, niciun risc vamal și un lot pe care îl puteți urmări înapoi. Molequa® expediază din UE, de obicei în 1 până la 3 zile lucrătoare de la intrarea în stoc.

5. Forma corectă: liofilizat, niciodată soluție

În soluție, GSH se oxidează la GSSG, mai repede la pH neutru până la bazic, la acces de oxigen și în prezența ionilor metalici, așa că o soluție gata preparată are în ziua livrării un raport GSH/GSSG necunoscut. Glutationul de calitate se livrează ca liofilizat, iar soluția o preparați proaspătă, chiar înainte de experiment.

Verificați calitatea în 30 de secunde

• ✅ CoA pe lot disponibil public?
• ✅ Puritate HPLC ≥ 98 % dovedită cu cromatogramă?
• ✅ Identitate confirmată prin LC-MS, cu masa de 307,3 Da?
• ✅ Depozit în UE și trasabilitatea lotului?
• ✅ Livrare ca liofilizat, nu ca soluție gata preparată?

Toate loturile Molequa® primesc certificat de analiză de la un laborator independent încă înainte de vânzare; la glutation, acesta va fi publicat în secțiunea Rezultatele testelor lotului la intrarea în stoc a primului lot.

Notă legală: Glutationul Molequa® este o substanță chimică de laborator pentru cercetare, nu un medicament și nici un supliment alimentar. Se vinde exclusiv pentru cercetare științifică de laborator și nu este destinat consumului uman sau animal; studiile de suplimentare citate s-au referit la suplimente alimentare, nu la acest produs.

Știință și studii

Literatura despre glutation are două straturi. Primul îl formează sintezele biochimice despre rolurile, măsurarea și biosinteza sa (Forman 2009, Lushchak 2012). Al doilea îl formează studiile umane de suplimentare orală cu supliment alimentar (Richie 2015, Allen 2011, Sinha 2018). Al doilea strat nu se referă la liofilizatul de laborator Molequa®. Îl prezentăm ca fapte din literatură, cu cifre, nu ca promisiune.

4.1 Publicații cheie

Biochimia este acoperită de două sinteze, Forman 2009 și Lushchak 2012. Cele trei lucrări umane sunt studii cu supliment alimentar: își au locul aici ca cele mai citate date umane despre glutation, dar despre produsul Molequa® nu spun nimic.

Mărimea eșantionului din Sinha 2018 nu o indicăm până nu o verificăm în textul integral; niciuna dintre aceste cifre nu este o instrucțiune.

4.2 Rezumate detaliate ale studiilor

▸ Studiu 1: Forman 2009, sinteza rolurilor, a măsurării și a biosintezei

Citare: Forman H.J., Zhang H., Rinna A. Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis. Mol Aspects Med. 2009. PubMed 18796312.

Ce au făcut: O sinteză a biochimiei glutationului, de la biosinteză, prin protecția antioxidantă și conjugarea xenobioticelor, până la metodele de măsurare a GSH și GSSG.

Ce au constatat: Glutationul este cel mai abundent tiol cu masă moleculară mică din celulă, în concentrații milimolare. Raportul GSH/GSSG spune ceva despre starea redox doar atunci când GSH nu se oxidează în timpul pregătirii probei.

De ce contează pentru cercetarea cu GSH: Baza metodologică atât pentru măsurarea glutationului, cât și pentru folosirea lui ca standard. Condițiile care compromit proba compromit și soluția preparată din liofilizat.

▸ Studiu 2: Lushchak 2012, homeostazia și funcțiile

Citare: Lushchak V.I. Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions. J Amino Acids. 2012. PubMed 22500213.

Ce au făcut: O sinteză a modului în care celula menține nivelul de glutation în echilibru și a funcțiilor care decurg de aici, inclusiv semnalizarea redox și S-glutationilarea.

Ce au constatat: Nivelul de GSH este rezultatul mai multor fluxuri simultane, nu o valoare statică. Deplasarea stării redox modifică activitatea enzimelor și a factorilor de transcripție, așadar glutationul este și o moleculă de semnalizare.

De ce contează pentru cercetarea cu GSH: Explică de ce adăugarea de GSH într-un sistem nu trebuie să aibă un rezultat simplu: celula are propria homeostazie și reacționează la schimbare, de aceea se măsoară mai mult de o singură mărime.

▸ Studiu 3: Richie 2015, studiu randomizat cu supliment oral

Citare: Richie J.P. Jr., et al. Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione. Eur J Nutr. 2015. PubMed 24791752.

Ce au făcut: Studiu randomizat controlat la 54 de adulți: glutation oral ca supliment alimentar, 250 sau 1 000 mg pe zi timp de 6 luni; rezervele de GSH din eritrocite, plasmă și limfocite.

Ce au constatat: La 1 000 mg pe zi, după 6 luni, rezervele de GSH din sânge au fost mai mari cu 30–35 % în toate cele trei componente.

De ce contează pentru cercetarea cu GSH: Este un studiu cu supliment alimentar la oameni, nu cu liofilizat de laborator; produsul Molequa® nu este destinat consumului uman. Metodologic arată unde se măsoară rezervele de GSH și ce orizont de timp necesită acest lucru.

▸ Studiu 4: Allen 2011 și Sinha 2018, două studii mai scurte cu rezultat opus

Citare: Allen J., Bradley R.D. Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers. J Altern Complement Med. 2011. PubMed 21875351. Sinha R., et al. Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function. Eur J Clin Nutr. 2018. PubMed 28853742.

Ce au făcut: Allen 2011: 40 de voluntari, glutation oral ca supliment alimentar, 500 mg de două ori pe zi timp de 4 săptămâni, biomarkeri ai stresului oxidativ. Sinha 2018: glutation lipozomal, 500 sau 1 000 mg pe zi timp de 1 lună, rezervele de GSH și indicatori ai funcției imunitare.

Ce au constatat: Allen 2011: fără modificarea biomarkerilor, un studiu negativ. Sinha 2018: după o lună, atât rezervele de GSH, cât și citotoxicitatea celulelor NK au fost mai mari.

De ce contează pentru cercetarea cu GSH: Din nou, studii cu supliment alimentar la oameni. Două lucrări la fel de scurte, cu concluzii opuse, arată că decid mărimea măsurată și forma de administrare (GSH liber față de GSH lipozomal); liofilizatul Molequa® nu este lipozomal.

Depozitare

Depozitați liofilizatul de glutation la 2–8 °C, la loc uscat și întunecat, într-un flacon bine închis. Preparați soluția proaspătă, în apă sau în tampon, și folosiți-o în ziua preparării: în soluție, GSH se oxidează la GSSG, mai repede la pH neutru până la bazic, la acces de oxigen și în prezența ionilor metalici. Apa bacteriostatică cu alcool benzilic nu este necesară.

Liofilizat (pulbere uscată înainte de reconstituire)

• Frigiderul la 2 până la 8 °C este standardul, exact cum indică eticheta; congelatorul la −20 °C pentru depozitarea pe termen lung, dacă nu veți deschide flaconul. Temperatura camerei doar pentru transport și manipulare.
• Ferit de lumină și umiditate. La un tiol, umiditatea este un dușman mai mare decât căldura, pentru că odată cu apa vin oxigenul și oxidarea.

După reconstituire (soluție în apă sau în tampon)

• Folosiți-o în ziua preparării. Soluția de glutation nu este o rezervă, este un reactiv de lucru. Mediul acid încetinește oxidarea, mediul bazic și ionii metalici o accelerează; folosiți un tampon fără ioni metalici și țineți soluția pe gheață.
• Oxidarea nu se vede. Atât GSH, cât și GSSG formează o soluție limpede și incoloră, așa că aspectul nu este o dovadă a prospețimii; singura dovadă este timpul scurs de la preparare și măsurătoarea.

Reguli practice de depozitare

• Înainte de deschidere, lăsați flaconul să ajungă la temperatura camerei (15 până la 20 de minute), altfel pe pulbere se condensează umezeala.
• La 1 500 mg într-un singur flacon, nu deschideți inutil: cântăriți cât aveți nevoie și închideți imediat; la lucru repetat, împărțiți liofilizatul în flacoane uscate mai mici imediat după prima deschidere.
• Soluțiile de NAD+ sau GHK-Cu nu le amestecați niciodată în același flacon cu GSH. GSH este un agent reducător, iar ionii de cupru(II) accelerează oxidarea tiolului.

Sfaturi de combinare, peptide și molecule frecvent combinate

În designul de cercetare, glutationul se încadrează între moleculele axei redox și mitocondriale: NAD+ ca al doilea mare cuplu redox al celulei și MOTS-c pentru mitocondrii, principala sursă de specii reactive de oxigen. Combinația înseamnă brațe paralele ale experimentului, niciodată o soluție comună: GSH este un agent reducător și reacționează într-un singur flacon cu NAD+ sau cu GHK-Cu, care conține cupru(II).

NAD+, al doilea cuplu redox

Celula are două mari cupluri redox, NAD+/NADH și GSH/GSSG, iar acestea sunt legate: reciclarea GSSG la GSH folosește echivalenți reducători de la coenzimele nicotinamidice, de aceea ambele axe se măsoară în paralel. În flacon însă își au locul separat.

MOTS-c, sursa mitocondrială a încărcării

Mitocondriile sunt principala sursă de specii reactive de oxigen din celulă și au propriul pool de glutation. MOTS-c țintește metabolismul mitocondrial, glutationul îi captează produsele secundare; perechea are sens în modelele relației dintre metabolism și starea redox.

GHK-Cu, atenție la cupru

GHK-Cu este o tripeptidă cu un ion de cupru(II) legat, iar ionii de cupru(II) accelerează oxidarea tiolilor. Dacă cercetați ambele peptide în același proiect, țineți-le în soluții separate și adăugați-le în sistem independent.

Date și citate științifice cheie

Toate cifrele de pe această pagină provin din două sinteze ale biochimiei glutationului, din trei studii umane cu supliment alimentar, din baza de date PubChem și din parametrii produsului. Cifrele studiilor umane sunt fapte din literatură, nu proprietăți ale liofilizatului Molequa®, și niciuna nu este o instrucțiune de utilizare.

“Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.”
Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009), Mol Aspects Med, PubMed 18796312

Tabelul cifrelor cheie

Statistici din literatura de cercetare

• Studii umane cu supliment alimentar: Richie 2015 (n = 54, 6 luni) +30–35 % rezerve de GSH în sânge; Allen 2011 (n = 40, 4 săptămâni) fără modificarea biomarkerilor stresului oxidativ; Sinha 2018 (1 lună) rezerve de GSH și citotoxicitate NK mai mari
• Măsurători directe pe liofilizatul Molequa®: deocamdată niciuna; prima dată măsurată va fi certificatul de analiză al primului lot

Surse de referință (PubMed)

1. Forman HJ., Zhang H., Rinna A. (2009). “Glutathione: overview of its protective roles, measurement, and biosynthesis.” Mol Aspects Med. PubMed 18796312
2. Lushchak VI. (2012). “Glutathione homeostasis and functions: potential targets for medical interventions.” J Amino Acids. PubMed 22500213
3. Richie JP Jr. et al. (2015). “Randomized controlled trial of oral glutathione supplementation on body stores of glutathione.” Eur J Nutr. PubMed 24791752
4. Allen J., Bradley RD. (2011). “Effects of oral glutathione supplementation on systemic oxidative stress biomarkers in human volunteers.” J Altern Complement Med. PubMed 21875351
5. Sinha R. et al. (2018). “Oral supplementation with liposomal glutathione elevates body stores of glutathione and markers of immune function.” Eur J Clin Nutr. PubMed 28853742

Statutul produsului: Glutationul Molequa® este o substanță chimică de laborator exclusiv pentru cercetare științifică (RUO), nu un medicament și nici un supliment alimentar; nu este destinat consumului uman sau animal.

Întrebări frecvente despre glutation

Aceste întrebări răspund celor mai frecvente căutări despre glutation în context de cercetare: ce fel de moleculă este, prin ce se deosebește GSH de GSSG și de N-acetilcisteină, ce spun studiile umane cu supliment alimentar și cum se lucrează cu liofilizatul. Pentru documentația tehnică, consultați secțiunile de mai sus.

Ce este glutationul și de ce este numit tripeptidă?

Glutationul (GSH) este tripeptida γ-L-glutamil-L-cisteinil-glicină, C10H17N3O6S, 307,3 Da, CAS 70-18-8. Glutamatul este legat de cisteină printr-o legătură γ-peptidică neobișnuită, rezistentă la peptidazele obișnuite, iar gruparea tiol liberă a cisteinei poartă activitatea redox. În celule este cel mai abundent tiol cu masă moleculară mică.

Care este diferența dintre GSH și GSSG?

GSH este forma redusă, cu grupare tiol liberă, GSSG este disulfura oxidată, în care două molecule de GSH sunt unite printr-o punte –S–S–. Raportul GSH/GSSG este un indicator consacrat al stării redox a celulei (Forman 2009, PubMed 18796312). În soluție, GSH se transformă spontan în GSSG, de aceea soluțiile se prepară proaspete.

Ce spun studiile despre glutationul oral la oameni?

Este vorba de studii cu supliment alimentar, nu cu liofilizat de laborator. Richie 2015 (n = 54): 1 000 mg/zi timp de 6 luni, rezervele de GSH din sânge mai mari cu 30–35 %. Allen 2011 (n = 40): 500 mg de două ori pe zi timp de 4 săptămâni, fără modificarea biomarkerilor stresului oxidativ. Sinha 2018: GSH lipozomal timp de 1 lună, rezerve de GSH și citotoxicitate NK mai mari. Nu se aplică produsului Molequa®.

De ce se prepară soluția de glutation proaspătă?

Pentru că în soluție GSH se oxidează la GSSG, mai repede la pH neutru până la bazic, la acces de oxigen și în prezența ionilor metalici, iar oxidarea nu este vizibilă: atât GSH, cât și GSSG formează o soluție limpede și incoloră. De aceea preparați soluția chiar înainte de experiment; apa bacteriostatică nu este necesară.

Prin ce se deosebește glutationul de N-acetilcisteină?

Glutationul este o tripeptidă gata formată, cu tiol liber. N-acetilcisteina (NAC) este L-cisteină acetilată, un derivat al unui singur aminoacid, care în modelele celulare servește drept sursă de cisteină pentru sinteza proprie a GSH și drept agent reducător tiolic. În cercetare sunt comparate ca două căi de a influența pool-ul celular de glutation.

Cum se depozitează glutationul?

Depozitați liofilizatul la 2 până la 8 °C, ferit de lumină și umiditate, într-un flacon bine închis; pe termen lung, în congelator la −20 °C. Înainte de deschidere, lăsați flaconul să ajungă la temperatura camerei. Soluția nu o depozitați, o preparați proaspătă. Termenele de stabilitate pentru lot le vom confirma pe baza certificatului.

De unde se poate cumpăra glutation în UE pentru cercetare științifică?

Molequa® oferă glutation ca liofilizat de 1 500 mg la 266,81 lei (0,20 lei pe mg), ≥ 98 % HPLC, cu certificat de analiză al lotului după intrarea în stoc; prețul pieței în UE este de 197,95 până la 292,05 lei. Până la intrarea în stoc a primului lot, produsul este în rezervare fără plată. Livrare prin Packeta (punct de ridicare sau curier Cargus) în România în 3 până la 5 zile lucrătoare. Exclusiv pentru cercetare de laborator (RUO).