Коротко
AOD-9604 є модифікованим фрагментом гормону росту: ділянка hGH 177–191 із тирозином, доданим на N-кінець (16 амінокислот). Розробку як препарату проти ожиріння припинили після фази 2b; ті дослідження не є даними про цей продукт.
- Розробку як лікарського засобу припинено у 2007 році
- Не є лікарським засобом, схваленим у ЄС чи США
- Ліполітичну дію описано в гризунів (Heffernan 2001, Ng 2000)
- Напрям досліджень GH, присвячений метаболізму жирів
Читати далі Згорнути
Огляд
Походження і навіщо його розробили
У 1990-х роках дослідники поставили собі просте запитання: GH (гормон росту) має ліполітичну дію. Але він має й багато інших ефектів: ріст тканин, інсулінорезистентність, підвищення IGF-1 і ризик акромегалії. А що, коли можна виділити лише ліполітичну частину?
В Університеті Монаша в Австралії команда професора Ф. М. Нґ (Ng F. M.) картувала мишачий mGH і людський hGH, щоб зрозуміти, яка частина молекули за яку функцію відповідає. GH — це білок із 191 амінокислоти. Після вивчення синтетичних пептидів, що відповідають ділянкам hGH, команда виявила, що C-кінцева ділянка (амінокислоти 177–191) зберігає ліполітичну активність.
Тож питання було таке: що саме роблять ці 15 амінокислот? Нґ із колегами синтезували їх, додали на N-кінець тирозин і отримали AOD-9604, Anti-Obesity Drug 9604, кодову назву програми розробки.
У тестах на мишах і щурах AOD-9604 зменшував жирову тканину, а в щурів Zucker не погіршував чутливості до інсуліну (Ng 2000). Щоб вивести AOD-9604 на ринок, заснували австралійську біотехнологічну компанію Metabolic Pharmaceuticals (згодом Calzada).
Клінічна програма та невдача фази 2b
Дослідження фаз 1 і 2a були дослідженнями безпеки: пептид добре переносився, без значущих побічних ефектів (Stier 2013). Компанія розпочала дослідження фази 2b з амбіцією зареєструвати AOD-9604 як препарат від ожиріння.
Потім настав холодний душ. У дослідженні фази 2b (2007, 502 рандомізовані учасники, 24 тижні) AOD-9604 статистично значуще не відрізнявся від плацебо щодо маси тіла. Клінічна програма провалилася.
Чому? Одна з гіпотез: ліполітичний ефект, помічений у тваринних моделях генетичного ожиріння (щури Zucker, миші ob/ob), не перенісся на людей з ожирінням.
У США та ЄС AOD-9604 ніколи не отримував регуляторного схвалення.
Друге життя в дослідницькій спільноті
Хоча AOD-9604 у клінічних дослідженнях не досяг мети, дослідники метаболічних пептидів і далі ним цікавляться. Причина: механізм відмінний від механізму агоністів GLP-1. Агоністи GLP-1 вивчають щодо апетиту, AOD-9604 — щодо ліполізу. Це окремі дослідницькі напрями.
Механізм дії: що відбувається на клітинному рівні
AOD-9604 особливий в одному: він не має чітко ідентифікованого рецептора-мішені. На відміну від більшості пептидів, які зв’язуються з конкретним GPCR або тирозинкіназою, AOD-9604, як вважається, діє опосередковано, а описані ефекти стосуються переважно адипоцитів (жирових клітин) у тваринних моделях.
Ліполіз через β3-адренергічний рецептор (гіпотетичний механізм)
Одна з гіпотез полягає в тому, що AOD-9604 непрямо впливає на β3-адренергічні рецептори в адипоцитах; у мишей з ожирінням він підвищував їхню експресію (Heffernan 2001). Активація β3-AR через Gαs → cAMP → PKA → фосфорилювання гормоночутливої ліпази (HSL) веде до:
- розщеплення тригліцеридів на вільні жирні кислоти + гліцерол
- вивільнення жирних кислот із жирової тканини в кров
- посиленого окиснення жирних кислот у мітохондріях (м’язи, печінка)
Heffernan et al. (2001) описали в мишей з ожирінням, що AOD-9604 і hGH підвищують експресію РНК β3-AR у жировій тканині. Сам ліполітичний ефект, за висновком авторів, не опосередковується безпосередньо через β3-AR: у мишей із нокаутом β3-AR тривале введення зміни маси тіла не дало, але в гострому експерименті AOD-9604 підвищив витрату енергії та окиснення жирів.
Інгібування ліпогенезу
У доклінічних дослідженнях описано не лише ліполіз, а й гальмування ліпогенезу: у жировій тканині ex vivo та в ізольованій жировій тканині гризунів і людини in vitro ліпогенна активність знижувалася (Heffernan 2000; досліджуваний фрагмент hGH мав позначення AOD-9401).
Рецептор GH і розділення функцій
Це ключовий момент, що відрізняє AOD-9604 від інших пептидів, похідних GH. Хоч це похідна hGH, вважається, що він не діє через рецептор GH (GHR). Причина: для зв’язування з GHR потрібна вся згорнута молекула hGH; у розпізнаванні рецептора беруть участь залишки 2–19, 54–74 і 167–191 (Cunningham і Wells 1989), а короткий фрагмент такої структури не утворює.
В опублікованих дослідженнях AOD-9604 не підвищував IGF-1 і не погіршував толерантності до глюкози (Stier 2013, до 24 тижнів), а в щурів Zucker не погіршував чутливості до інсуліну (Ng 2000).
Це приклад спроби відокремити ліполітичну дію GH від інших його ефектів.
Хрящ: тваринна модель остеоартрозу
В одному доклінічному дослідженні AOD-9604 вводили внутрішньосуглобово кроликам із моделлю остеоартрозу коліна, індукованою колагеназою, і оцінювали морфологічні та гістопатологічні ознаки дегенерації хряща (Kwon і Park 2015). Механізм не з’ясований, а даних у людини немає.
Досліджувані напрями
В опублікованій доклінічній і клінічній літературі AOD-9604 вивчають у контексті таких напрямів. Жоден із них не є доведеним ефектом у людини:
- Ожиріння, клінічна програма зупинилася після невдачі у фазі 2b (2007)
- Ліполіз у тваринних моделях (Heffernan 2001, Ng 2000)
- Ліпогенез, жирова тканина ex vivo та in vitro (Heffernan 2000, фрагмент AOD-9401)
- Остеоартроз і хрящ, тваринна модель у кроликів (Kwon і Park 2015)
Наука та дослідження
4.1 Ключові публікації
Heffernan M., Summers R.J., Thorburn A., et al. (2001). The effects of human GH and its lipolytic fragment (AOD9604) on lipid metabolism following chronic treatment in obese mice and beta(3)-AR knock-out mice. Endocrinology. 142(12):5182–5189. Робота про механізм.
Ng F.M., Sun J., Sharma L., et al. (2000). Metabolic studies of a synthetic lipolytic domain (AOD9604) of human growth hormone. Horm Res. 53(6):274–278. Первинна характеристика.
Stier H., Vos E., Kenley D. (2013). Safety and tolerability of the hexadecapeptide AOD9604 in humans. J Endocrinol Metab. 3(1–2):7–15. Аналіз безпеки за даними на людях.
Heffernan M., Jiang W.J., Thorburn A.W., Ng F.M. (2000). Effects of oral administration of a synthetic fragment of human growth hormone on lipid metabolism. Am J Physiol Endocrinol Metab. 279(3):E501–507. Пероральне введення та ліпідний обмін.
4.2 Дослідження докладно
▸ Дослідження 1: Heffernan 2001, базовий механізм
Цитата: Heffernan M., Summers R.J., Thorburn A., et al. The effects of human GH and its lipolytic fragment (AOD9604) on lipid metabolism following chronic treatment in obese mice and beta(3)-AR knock-out mice. Endocrinology. 2001;142(12):5182–5189.
Що зробили: миші з ожирінням отримували hGH або AOD-9604 внутрішньоочеревинно протягом 14 днів. Ту саму тривалу схему повторили на мишах із нокаутом β3-AR (з інактивованим геном рецептора β3), а окремо провели гострий експеримент.
Що виявили:
- hGH і AOD-9604 зменшили масу тіла та жирову масу мишей з ожирінням
- обидві сполуки підвищили пригнічену експресію РНК β3-AR у мишей з ожирінням до рівня худих мишей
- у мишей із нокаутом β3-AR тривале введення не дало зміни маси тіла ані посилення ліполізу
- у гострому експерименті AOD-9604 і в мишей із нокаутом підвищив витрату енергії та окиснення жирів
Чому це важливо: дослідження описало зв’язок AOD-9604 з експресією β3-AR. Автори дійшли висновку, що ліполітична дія hGH і AOD-9604 не опосередковується безпосередньо через β3-AR, хоча обидві сполуки підвищують його експресію, що може сприяти більшій ліполітичній чутливості.
▸ Дослідження 2: Ng 2000, первинна характеристика
Цитата: Ng F.M., Sun J., Sharma L., et al. Metabolic studies of a synthetic lipolytic domain (AOD9604) of human growth hormone. Horm Res. 2000;53(6):274–278.
Що зробили: щури Zucker з ожирінням отримували AOD-9604 перорально в дозі 500 мкг/кг маси тіла на добу протягом 19 днів, порівняно з контрольною групою. Оцінювали приріст маси тіла, ліполітичну активність жирової тканини та чутливість до інсуліну (методом еуглікемічного клемпу).
Що виявили:
- приріст маси тіла був більш ніж на 50 % меншим, ніж у контролі (15,8 ± 0,6 г проти 35,6 ± 0,8 г)
- жирова тканина тварин, які отримували AOD-9604, мала підвищену ліполітичну активність
- на відміну від тривалого введення інтактного hGH, AOD-9604 не погіршив чутливості до інсуліну
Чому це важливо: це одна з перших публікацій про AOD-9604 in vivo. Вона описала ліполітичну дію фрагмента без негативного впливу на чутливість до інсуліну, характерного для інтактного GH. Результати стосуються гризунів і не переносяться на людину.
▸ Дослідження 3: Heffernan 2000, пероральне введення
Цитата: Heffernan M., Jiang W.J., Thorburn A.W., Ng F.M. Effects of oral administration of a synthetic fragment of human growth hormone on lipid metabolism. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2000;279(3):E501–507.
Що зробили: миші ob/ob з ожирінням отримували перорально фізіологічний розчин (n = 8) або фрагмент hGH AOD-9401 (n = 10) протягом 30 днів. Окремо оцінювали жирову тканину ex vivo, витрату енергії та окиснення субстратів, а in vitro ізольовану жирову тканину гризунів з ожирінням і людини.
Що виявили:
- від 16-го дня приріст маси тіла в групі фрагмента був значущо меншим, ніж у контролі
- споживання їжі між групами не відрізнялося
- у жировій тканині ex vivo знизилася ліпогенна й зросла ліполітична активність
- гостро зросли витрата енергії та окиснення глюкози й жирів
- in vitro фрагмент посилив ліполіз і знизив ліпогенез в ізольованій жировій тканині гризунів і людини
Чому це важливо: дослідження описало ефект перорального введення в мишей і ліполітичну та антиліпогенну дію на ізольовану жирову тканину. Ці результати стосуються доклінічних моделей; клінічне дослідження фази 2b за участю людей значущого ефекту на масу тіла не показало.
▸ Дослідження 4: Stier 2013, аналіз безпеки на людях
Цитата: Stier H., Vos E., Kenley D. Safety and tolerability of the hexadecapeptide AOD9604 in humans. J Endocrinol Metab. 2013;3(1–2):7–15.
Що зробили: зведення даних про безпеку на людях із клінічних досліджень фаз 1, 2a і 2b (загалом n > 800 пацієнтів). Аналіз побічних ефектів, лабораторних показників і життєвих функцій.
Що виявили:
- жодної серйозної небажаної події, пов’язаної з AOD-9604
- найчастішою небажаною подією був головний біль, з частотою, порівнянною з плацебо
- жодної зміни рівнів IGF-1, глікемії, артеріального тиску та частоти серцевих скорочень
- жодного сигналу серцево-судинної, печінкової чи ниркової токсичності
- профіль безпеки зіставний із плацебо
Чому це важливо: у цих дослідженнях AOD-9604 показав сприятливий профіль переносимості.
▸ Дослідження 5: клінічне дослідження фази 2b, невдача при ожирінні
Цитата: дослідження фази 2b компанії Metabolic Pharmaceuticals (2007), не опубліковане повністю; результати наведено в Calzada Annual Report 2008 та в галузевих аналізах.
Що зробили: 502 рандомізовані дорослі з ожирінням (ІМТ 30–45), три рівні дози AOD-9604 або плацебо. Тривалість: 24 тижні (дизайн за Stier 2013). Первинна кінцева точка: зміна маси тіла.
Що виявили:
- жодна доза статистично значуще не відрізнялася від плацебо щодо маси тіла
- клінічно незадовільний результат для показання «ожиріння»
- профіль безпеки лишався сприятливим
Чому це важливо: дослідження зупинило розробку AOD-9604 як лікарського засобу; дані про дію походять із тваринних моделей.
Зберігання
Ліофілізат (сухий порошок до реконституції)
- 2 роки за −20 °C (морозильна камера)
- 18 місяців за 2–8 °C (холодильник)
- До 30 днів за кімнатної температури (до 25 °C), захищено від світла та вологи
Після реконституції (пептид у розчині з бактеріостатичною водою)
- До 28 днів за 2–8 °C, захищено від світла
Практичні правила зберігання
- Дай флакону нагрітися до кімнатної температури (15–20 хв), перш ніж проколювати пробку. Холодний флакон + тепле повітря = конденсація вологи всередині.
- Уникай контакту з відновниками.
- Темрява — твій союзник: зберігай флакон захищеним від світла.
- Не струшуй флакон: розчин лише обережно перемішуй обертальними рухами.
- Розчин має лишатися прозорим. AOD-9604 добре розчинний; каламуть може вказувати на деградацію чи забруднення, такий розчин не використовують.
Комбінації та споріднені молекули
Нижче наведено лише порівняння AOD-9604 зі спорідненими молекулами, які вивчають в окремих дослідницьких напрямах. Це не рекомендації щодо поєднання; опублікованих даних про такі комбінації бракує.
HGH Fragment 176-191
Споріднена молекула; клінічні дослідження за участю людей стосуються AOD-9604, а не HGH Fragment 176-191. Опублікованих даних про їх поєднання немає.
Семаглутид, тирзепатид, ретатрутид
Ці молекули вивчають щодо регуляції маси тіла та глікемії через рецептори GLP-1, GIP чи глюкагону. AOD-9604 вивчають щодо ліполізу безпосередньо в жировій тканині. Опублікованих досліджень їх поєднання немає.
Іпаморелін + CJC-1295
Ці молекули вивчають у зв’язку з ендогенною секрецією GH. AOD-9604 є фрагментом hGH; у клінічних даних безпеки AOD-9604 рівень IGF-1 не підвищувався (Stier 2013), тож ідеться про різні дослідницькі напрями.
BPC-157 і TB-500
BPC-157 і TB-500 вивчають у моделях регенерації тканин. Опублікованих даних про їх поєднання з AOD-9604 немає.
Ключові наукові дані та джерела
Основні дані з літератури
- AOD-9604 = модифікований фрагмент hGH 177–191 + N-кінцевий Tyr (послідовність Tyr-Leu-Arg-Ile-Val-Gln-Cys-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys-Gly-Phe), CAS 221231-10-3, молекулярна маса 1 815,1 Да
- Розроблений компанією Metabolic Pharmaceuticals (Австралія) на основі роботи професора Ф. М. Нґ (Університет Монаша) у 1990-х роках
- Механізм у гризунів: посилення ліполізу й окиснення жирних кислот у жировій тканині; у мишей AOD-9604 підвищував експресію β3-адренергічних рецепторів, але ліполітична дія, за висновком авторів, не опосередковується безпосередньо через них
- Клінічне дослідження фази 2b (2007, 502 рандомізовані учасники, 24 тижні): статистично значущої різниці в масі тіла порівняно з плацебо не було
- Понад 15 рецензованих публікацій у PubMed
Джерела (PubMed)
- Ng FM. et al. (2000). «Metabolic studies of a synthetic lipolytic domain (AOD9604) of human growth hormone.» Horm Res 53(6):274–278. PubMed 11146367
- Heffernan M. et al. (2001). «The effects of human GH and its lipolytic fragment (AOD9604) on lipid metabolism following chronic treatment in obese mice.» Endocrinology 142(12):5182–5189. PubMed 11713213
- Stier H. et al. (2013). «Safety and tolerability of the hexadecapeptide AOD9604 in humans.» J Endocrinol Metab 3(1–2):7–15.
Регуляторний статус: AOD-9604 не є лікарським засобом для застосування людьми, затвердженим у ЄС чи США (відмова FDA за NDI у 2014 році). В Австралії він доступний лише через виробничі аптеки, за рецептом. Речовина входить до Забороненого списку WADA (категорія S2, фрагменти гормону росту). Продукт продається виключно для наукових лабораторних досліджень (RUO).
Поширені запитання про AOD-9604
Ці запитання відповідають на найчастіші пошукові запити про AOD-9604 у дослідницькому контексті. Повну технічну документацію дивись у попередніх розділах.
Що таке AOD-9604 і для чого він потрібен у дослідженнях?
AOD-9604 (Anti-Obesity Drug 9604, послідовність hGH 177–191 + Tyr) — це фрагмент людського гормону росту з 16 амінокислот, який вивчають через його ліполітичний ефект (розщеплення жирів) у тваринних моделях. У мишей він підвищував експресію β3-адренергічних рецепторів у жировій тканині та посилював окиснення жирів. У дослідженнях його використовують у моделях ожиріння та метаболічного синдрому.
Які дози AOD-9604 використовували дослідники у тваринних моделях?
У пероральному дослідженні Ng 2000, наприклад, щури Zucker з ожирінням отримували 500 мкг/кг на добу протягом 19 днів. Дози в різних тваринних моделях різнилися; дози для людей ми не наводимо.
Яка різниця між AOD-9604 і HGH Fragment 176-191?
AOD-9604 є спорідненою модифікованою молекулою: його визначають як ділянку hGH 177–191 із тирозином, доданим на N-кінець. Для обох продуктів задекларовано ту саму послідовність Tyr-Leu-Arg-Ile-Val-Gln-Cys-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys-Gly-Phe (16 амінокислот), але в базах даних речовини мають різні номери CAS: 221231-10-3 (AOD-9604) і 66004-57-7 (HGH Fragment 176-191). Клінічні дослідження фаз 1–2b проводили з AOD-9604 під цим позначенням; їхні результати не є даними про цей продукт.
AOD-9604 — це затверджений лікарський засіб чи дослідницька речовина?
AOD-9604 не є лікарським засобом для застосування людьми, затвердженим в ЄС чи США; у 2014 році FDA відхилила його NDI-повідомлення як харчової добавки. В Австралії він доступний лише як екстемпоральний препарат в аптеці за рецептом. Речовина входить до Забороненого списку WADA (категорія S2, фрагменти гормону росту). Продукт продається виключно для наукових лабораторних досліджень (RUO) і не призначений для використання людьми.
Як зберігати AOD-9604?
Ліофілізований AOD-9604 слід зберігати за −20 °C із захистом від світла: так він стабільний 2 роки, а за 2–8 °C — близько 18 місяців. Після реконституції розчин стабільний 28 днів за 2–8 °C.
Який період напіввиведення AOD-9604?
Докладних фармакокінетичних даних AOD-9604 у людини в опублікованих анотаціях немає, тому період напіввиведення ми не наводимо.
Де купити AOD-9604 в ЄС для наукових досліджень?
AOD-9604 для наукових досліджень у ЄС доступний у Molequa®. Ми доставляємо до країн ЄС зі складу в ЄС, тому без мита та митного оформлення; вартість і терміни доставки для твоєї країни відображаються під час оформлення замовлення. Продукт відправляється ліофілізованим, із сертифікатом аналізу (CoA) і чистотою за HPLC 98,80 %. Призначений виключно для наукових лабораторних досліджень (RUO).
